| 人源抗Trop-2抗体Fab的制备及条件优化 |
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| 引用本文： | 王小英,林 红,张慧林,仇金荣,丁贵鹏,唐小军,陈汐敏,唐 甜,刘琼琼,冯振卿,朱 进.人源抗Trop-2抗体Fab的制备及条件优化[J].南京医科大学学报,2012(1):35-39. |
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| 作者姓名： | 王小英 林 红 张慧林 仇金荣 丁贵鹏 唐小军 陈汐敏 唐 甜 刘琼琼 冯振卿 朱 进 |
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| 作者单位： | 南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029/江苏省血液中心,江苏 南京 210042;南京医科大学附属南京妇幼保健院,江苏 南京 210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029/南京军区军事医学研究所,江苏 南京 210002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(81101704);南京市医学科技发展重点项目(ZKX09015) |
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| 摘 要： | 目的:探讨人源抗Trop-2抗体片段Fab在大肠杆菌中的诱导表达,优化蛋白表达及纯化的条件?方法:将含有抗Trop-2 Fab 抗体基因的质粒转化宿主菌E.coli TOP10F ′大肠杆菌,比较诱导前培养液更换对抗Trop-2 Fab片段表达量的影响;比较不同诱导温度?诱导时间及诱导前加入葡萄糖对蛋白表达的影响;大量表达的抗Trop-2 Fab经亲和层析纯化后,用免疫荧光和流式细胞术检测其免疫学特性?结果:在培养液中加入5 g/L的葡萄糖,人源抗Trop-2抗体Fab片段的表达产量明显增加;16℃的诱导温度比其它温度能表达更多的Fab分子;加诱导剂12 h,目的蛋白的表达量至峰值?结论:本实验结果为在原核系统中大量制备抗Trop-2抗体片段及后续的肿瘤靶向治疗提供了基础?
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| 关 键 词： | 人源抗Trop-2抗体片段 原核表达 免疫学检测 |
| 收稿时间： | 2011/10/24 0:00:00 |
Preparation and optimization of human anti-Trop-2 antibody fragment Fab |
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| WANG Xiao-ying,LIN Hong,ZHANG Hui-lin,QIU Jing-rong,DING Gui-peng,TANG Xiao-jun,CHEN Xi-min,TANG Tian,LIU Qiong-qiong,FENG Zhen-Qing and ZHU Jin.Preparation and optimization of human anti-Trop-2 antibody fragment Fab[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2012(1):35-39. |
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| Authors: | WANG Xiao-ying LIN Hong ZHANG Hui-lin QIU Jing-rong DING Gui-peng TANG Xiao-jun CHEN Xi-min TANG Tian LIU Qiong-qiong FENG Zhen-Qing and ZHU Jin |
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| Institution: | Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029/Blood Center of Jiangsu Province,Nanjing 210042;Nanjing Maternal and Child Health Hospital Affiliated to NJMU,Nanjing 210029;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029/Medical Research Institute of Nanjing Military Region,Nanjing 210002,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human anti-Trop-2 antibody fragment prokaryotic expression immunology detection |
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