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幽门螺杆菌UreB414-OMP18-LTB融合蛋白的构建及免疫原性初步研究
引用本文:葛迪,郭刚,毛旭虎,张卫军,邹全明.幽门螺杆菌UreB414-OMP18-LTB融合蛋白的构建及免疫原性初步研究[J].第三军医大学学报,2008,30(12):1107-1110.
作者姓名:葛迪  郭刚  毛旭虎  张卫军  邹全明
作者单位:第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室,重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,400038
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:目的 构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp) 尿素酶B亚单位活性片段(UreB414)、外膜蛋白(OMP18)及大肠埃希菌LTB融合疫苗并研究其抗原性.方法 PCR扩增ureb414、omp18、ltb基因,分别克隆入pMD18-T载体,测序并鉴定方向后依次连接,构建融合基因UOL,然后将其亚克隆入原核表达载体pET-28a,转化入大肠埃希菌BL21,SDS-PAGE电泳进行表达,Western印迹检测表达蛋白的抗原性.结果 PCR扩增分别获得约414、537 bp和320 bp产物,与GenBank中相关序列具有高度同源性,三者融合后获得一约1 200 bp目的 基因.重组融合蛋白表达量可达细菌总蛋白的15%,免疫印迹检测结果显示该重组蛋白可为UreB、OMP18、LTB兔抗血清特异识别,具有良好的抗原性.结论 成功构建了具有良好免疫原性的UreB-OMP18-LTB融合蛋白.

关 键 词:幽门螺杆菌  尿素酶  外膜蛋白  大肠埃希菌不耐热毒素B亚单位  疫苗
文章编号:1000-5404(2008)12-1107-04
修稿时间:2007年7月26日

Construction and immunogenicity of a fusion vaccine candidate of UreB-OMP18-LTB from H.pylori
GE Di,GUO Gang,MAO Xu-hu,ZHANG Wei-jun,ZOU Quan-ming.Construction and immunogenicity of a fusion vaccine candidate of UreB-OMP18-LTB from H.pylori[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2008,30(12):1107-1110.
Authors:GE Di  GUO Gang  MAO Xu-hu  ZHANG Wei-jun  ZOU Quan-ming
Institution:GE Di,GUO Gang,MAO Xu-hu,ZHANG Wei-jun,ZOU Quan-ming (Laboratory of Clinic Microbiology , Immunology,College of Medical Laboratory,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China)
Abstract:Objective To construct a fusion vaccine of Helicobacter pylori(Hp) urease subunit B(UreB),outer membrane protein18(OMP18) and E.coli heat-labile enterotoxin B subunit,summarized as UOL and study its antigenicity so as to lay a foundation to produce an H.pylori vaccine.Methods The UreB414,OMP18 and LTB genes were amplified by PCR, and cloned into pMD 18-T vector,and the products were identified and fused to abtain UOL.UOL was then subcloned into a procaryon expression vector pET-28a and transformed into E.co...
Keywords:Helicobacter pylori  urease  outer memberane protein18  E  coli heatlabile enterotoxin B subunit  vaccine  
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