| 中国人Brugada综合征SCN5A基因突变K317N的定点诱变及其载体构建 |
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| 引用本文： | 易绍东,孟素荣,崔英凯,陈哲明,彭健.中国人Brugada综合征SCN5A基因突变K317N的定点诱变及其载体构建[J].南方医科大学学报,2003,23(11):1139-1142. |
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| 作者姓名： | 易绍东 孟素荣 崔英凯 陈哲明 彭健 |
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| 作者单位： | 第一军医大学南方医院心内科,广东,广州,510515 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30278368)，广东省自然科学基金(20042)~~ |
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| 摘 要： | 目的对我们发现的中国人Brugada综合征新的SCN5A基因突变K317N进行体外定点诱变研究,并构建携带有基因突变K317N的pRc/CMV-hH1的表达载体。方法采用PCR定点突变技术,根据突变位置附近的两个单一限制性内切酶位点AgeI/Sse8387I设计一对定点诱变引物,将突变位点设计在引物上,通过PCR扩增,使扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩增片段克隆入pRc/CMV-hH1载体中。结果DNA测序表明,在预期位点巳经发生突变,SCN5A基因在第317密码子由赖氨酸(K)突变为天冬氨酸(N),成功实现定点诱变。结论PCR技术诱导定点突变,准确、高效。pRc/CMV-hH1(K317N)的成功构建,为进一步进行该突变的结构与功能研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 聚合酶链反应 定点诱变 SCN5A pRc/CMV-hH1 Brugadasyndrome |
| 文章编号： | 1000-2588(2003)11-1139-04 |
| 修稿时间： | 2003年7月9日 |
PCR-based site-directed mutagenesis and recombinant expression plasmid construction of a SCN5A mutation (K317N) identified in a Chinese family with Brugada syndrome |
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| YI Shao-dong,MENG Su-rong,CUI Ying-kai,CHEN Zhe-ming,PENG Jian.PCR-based site-directed mutagenesis and recombinant expression plasmid construction of a SCN5A mutation (K317N) identified in a Chinese family with Brugada syndrome[J].Journal of Southern Medical University,2003,23(11):1139-1142. |
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| Authors: | YI Shao-dong MENG Su-rong CUI Ying-kai CHEN Zhe-ming PENG Jian |
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| Institution: | YI Shao-dong,MENG Su-rong,CUI Ying-kai,CHEN Zhe-ming,PENG JianDepartment of Cardiology,Nanfang Hospital,First Military Medical University,Guangzhou 510515,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | polymerase chain reaction site-directed mutagenesis SCN5A pRc/CMV-hH1 Brugada syndrome |
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