| 肠出血性大肠杆菌0157:H7 LexA蛋白的表达、纯化及鉴定 |
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| 引用本文： | 沙建平,邹全明,张卫军,杨珺,毛旭虎,郭刚,罗萍,刘开云,陈洪章.肠出血性大肠杆菌0157:H7 LexA蛋白的表达、纯化及鉴定[J].第三军医大学学报,2008,30(12):1114-1117. |
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| 作者姓名： | 沙建平 邹全明 张卫军 杨珺 毛旭虎 郭刚 罗萍 刘开云 陈洪章 |
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| 作者单位： | 第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室,重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的 对EHEC 0157:H7 lexA达、纯化,并检测其免疫活性.方法 lexA基因片段插入表达载体pET22b( ),在E..coli BL21(DE3)中表达.包涵体经洗涤并用8 mol/L尿素溶解,Heparin Agrose亲合柱层析为第-步纯化,Superdex75凝胶过滤层析作为第二步精细纯化,HPLC测定LexA蛋白的浓度,将纯化的kxA蛋白经注射途径免疫家兔,制备兔抗lexA血清,采用免疫双扩、ELISA及Western blot分析LexA的免疫活性.结果 lexA以包涵体形式表达,表达产量高达总菌体蛋白的40%左右,经Heparin Agrose亲合柱层析和凝胶过滤层析两步组合纯化目的 蛋白,经HPLC测定目的 蛋白的最终纯度为98%,表达及纯化的lexA具有良好的免疫活性.结论 在E.coli BL21(DE3)中表达的LexA蛋白具有良好的免疫活性.
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| 关 键 词： | 肠m血性大肠杆菌0157 纯化 免疫活性 |
| 文章编号： | 1000-5404(2008)12-1114-04 |
| 修稿时间： | 2007年7月3日 |
Expression,purification and identification of EHEC 0157:H7 LexA protein |
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| SHA Jian-ping,ZOU Quan-ming,ZHANG Wei-jun,YANG Jun,MAO Xu-hu,GUO Gang,LUO Ping,HU Kai-yun,CHEN Hong-zhang.Expression,purification and identification of EHEC 0157:H7 LexA protein[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2008,30(12):1114-1117. |
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| Authors: | SHA Jian-ping ZOU Quan-ming ZHANG Wei-jun YANG Jun MAO Xu-hu GUO Gang LUO Ping HU Kai-yun CHEN Hong-zhang |
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| Institution: | SHA Jian-ping,ZOU Quan-ming,ZHANG Wei-jun,YANG Jun,MAO Xu-hu,GUO Gang,LUO Ping,LIU Kai-yun,CHEN Hong-zhang(Department of Clinical Microbiology , Immunology,College of Pharmacy , Laboratory Medicine,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | lexA |
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