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大鼠维生素D受体蛋白表达载体的构建及遗传性高钙尿性结石大鼠十二指肠维生素D受体cDNA序列分析
引用本文:罗冬喜,王少刚,刘继红,席启林,杨为民,陈志强,王涛,余虓,叶章群.大鼠维生素D受体蛋白表达载体的构建及遗传性高钙尿性结石大鼠十二指肠维生素D受体cDNA序列分析[J].中华实验外科杂志,2006,23(11):1358-1360.
作者姓名:罗冬喜  王少刚  刘继红  席启林  杨为民  陈志强  王涛  余虓  叶章群
作者单位:430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30200283)
摘    要:目的构建大鼠维生素D受体(VDR)蛋白表达载体,测定并分析遗传性高钙尿性结石(GHS)大鼠VDRcDNA序列。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)方法扩增含VDR蛋白编码基因序列,将扩增产物克隆至真核表达载体pcDNA3.1/Zero(+),对5只GHS大鼠和4只正常尿钙对照(NC)大鼠十二指肠VDRcDNA序列进行测序分析。结果琼脂糖凝胶电泳示PCR扩增产物碱基数目与目的片段大小一致。对重组质粒的分析表明,插入片段的序列与发表的VDR基因编码序列相同。5只GHS鼠和4只NC鼠肠VDR cDNA序列均有3个相同的位点不同于已公布的大鼠肠VDR cDNA序列:在256bp位点:C取代G;569bp位点:G代替A;1658位点:A替代G。另外,GHS鼠在1795bp位点发生改变,G取代A,而NC鼠则无改变。结论大鼠维生素D受体蛋白编码序列被成功地克隆至表达载pcDNA3.1/Zero(+)上。GHS大鼠基因编码区的序列组成同NC大鼠相一致,但GHS鼠1795bp位点的碱基改变未见于NC鼠。

关 键 词:真核表达  维生素D受体  克隆
收稿时间:2006-03-29
修稿时间:2006年3月29日

Construction of rat VDR protein expression plasmid and analysis of GHS rats duodenum VDR cDNA
LUO Dong-xi, WANG Shao-gang, LIU Ji-hong,et al..Construction of rat VDR protein expression plasmid and analysis of GHS rats duodenum VDR cDNA[J].Chinese Journal of Experimental Surgery,2006,23(11):1358-1360.
Authors:LUO Dong-xi  WANG Shao-gang  LIU Ji-hong  
Institution:Department of Urology, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030 ,China
Abstract:
Keywords:Ekaryotic expression  Vitamin D receptor  Clone
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