沉默CTHRC1表达对乳癌MDA-MB-157细胞体外侵袭转移能力的影响

目的:探讨沉默CTHRC1基因表达对乳癌MDA-MB-157细胞体外侵袭转移能力的影响。方法:化学合成靶向CTHRC1基因的siRNA,分别以不同浓度(10、20和30nmol/L)转染MDA-MB-157细胞,同时以转染阴性对照siRNA和未转染细胞为对照。转染48h后,应用RT-PCR和Westernblot检测细胞CTHRC1mRNA和蛋白的表达情况。以干扰效率最高的CTHRC1siRNA浓度再次转染MDA-MB-157细胞,同时以转染阴性对照siRNA、转染Lipofectamine2000和未转染细胞为对照,分别在转染前、转染24、48和72h后收集细胞,BoydenChamber检测细胞侵袭能力的变化;转染48h后做细胞划痕实验,分别于划痕后24、48和72h检测划痕宽度。结果:各组细胞CTHRC1mRNA和蛋白表达的差异有统计学意义(F=28.185和17.776,P<0.001)。随着CTHRC1siRNA转染浓度的增加,CTHRC1mRNA和蛋白的表达下降,30nmol/LCTHRC1siRNA干扰效率最高。MDA-MB-157细胞转染30nmol/LCTHRC1siRNA后,穿膜细胞数和划痕愈合能力明显下降(P<0.05)。结论:抑制CTHRC1基因的表达能有效抑制乳癌MDA-MB-157细胞体外的侵袭和转移能力。