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| 小鼠轮状病毒EW株VP7基因的克隆及其在重组腺病毒中的表达 | |
| 引用本文： | 李勇,王健伟,屈建国,于修平,王大燕,姜秀丽,洪涛.小鼠轮状病毒EW株VP7基因的克隆及其在重组腺病毒中的表达[J].山东大学学报(医学版),2003,41(6):595-599,606. |
| 作者姓名： | 李勇 王健伟 屈建国 于修平 王大燕 姜秀丽 洪涛 |
| 作者单位： | 1. 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所;山东大学病原生物学研究所;山东大学齐鲁医院检验科 2. 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 3. 山东大学病原生物学研究所 |
| 基金项目： | 国家863计划现代农业与生物技术领域资助项目(编号:2001AA2150112002AA206641) |
| 摘 要： | 目的：构建表达小鼠轮状病毒(EDIM)EW株VP7基因的重组腺病毒，以在小鼠模型上研究轮状病毒的免疫保护机制。方法：用RT-PCR方法扩增EDIM VP7全长cDNA并进行基因序列分析，将所得的VP7基因片段插入腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV，获得重组质粒pShuttleCMV-EVP7，将该质粒与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183获得重组腺病毒质粒pAdCMV-EVP7，将该质粒线性化后转染293细胞包装重组腺病毒rvAdEVP7。以rvAdEVP7感染293细胞，并分别应用电子显微镜、PCR、RT-PCR和Western blot等方法观察rvAdEVP7的形态、VP7基因整合、遗传稳定性、VP7基因在细胞内转录及表达等有关生物学特性。结果：获得了小鼠轮状病毒的全长cDNA，重组腺病毒rvAdEVP7具有典型的腺病毒形态，PCR、RT-PCR和Western blot等分子生物学方法分析显示：rvAdEVP7中确有特异性的VP7基因稳定整合；有较好的遗传稳定性；感染293细胞后能有效转录；可表达轮状病毒主要结构蛋白VP7。结论：成功构建含VP7基因的重组腺病毒rvAdEVP7，为进一步研究轮状病毒的免疫保护机制打下了基础。 |
| 关 键 词： | 重组腺病毒 轮状病毒 VP7基因 基因表达 克隆 分子 小鼠 |
| 文章编号： | 1671-7554(2003)06-0595-05 |
Cloning and expression in replication defective recombinant adenovirus of VP7 of murine rotavirus EW strain |
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| Li Yong ,,Wang Jian-wei ,Qu Jian-guo ,et al.Cloning and expression in replication defective recombinant adenovirus of VP7 of murine rotavirus EW strain[J].Journal of Shandong University:Health Sciences,2003,41(6):595-599,606. | |
| Authors: | Li Yong Wang Jian-wei Qu Jian-guo |
| Institution: | Li Yong 1,2,3,Wang Jian-wei 1,Qu Jian-guo 1,et al |
| Abstract: | |
| Keywords: | Adenovirus vector Rot avirus Gene VP7 Gene expression Cloning molecular Mice |
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