| 重组腺病毒Ad-sTNFRI-IgGFc转染人气道上皮细胞及其表达的实验研究 |
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| 引用本文： | 苏瑾,尤长宣,蔡绍曦,马骊,温茜,罗微,黄泳塔.重组腺病毒Ad-sTNFRI-IgGFc转染人气道上皮细胞及其表达的实验研究[J].南方医科大学学报,2008,28(4):517-521. |
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| 作者姓名： | 苏瑾 尤长宣 蔡绍曦 马骊 温茜 罗微 黄泳塔 |
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| 作者单位： | 1. 南方医科大学,南方医院呼吸科,广东,广州,510515
2. 南方医科大学,生物技术学院分子免疫学研究所,广东,广州,510515 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)
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广东省科技攻关计划
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广东省广州市科技攻关项目
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广东省医学科学技术研究基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建携带人可溶性肿瘤坏死因子受体I胞外区和IgGFc融合基因的重组腺病毒载体(Ad-sTNFRI-IgGFc),体外转染正常人气道上皮细胞株(HBE135-E6E7),探讨重组腺病毒Ad-sTNFRI-IgGFc转染气道上皮治疗支气管哮喘的可行性.方法 将sTNFRI-IgGFc基因插入腺病毒穿梭质粒pDC316,与辅助质粒pBHGlox△E1,3Crc共转染HEK293细胞,重组产生Ad-sTNFRI-IgGFc,PCR鉴定毒种正确后,进行扩增、纯化和滴度测定,转染培养HBE135-E6E7,流式细胞术检测转染效率,RT-PCR、免疫组化检测转染后细胞中sTNFRI-IgGFc的表达和转录.结果 成功构建了Ad-sTNFRI-IgGFc,感染性滴度达3×1010TCID50/ml,转染后HBE135-E6E7在mRNA和蛋白水平均有sTNFRI-IgGFc表达.结论 构建的Ad-sTNFRI-IgGFc可有效转染HBE135-E6E7,并在其中高效表达,并能拈抗TNF活性,为将表达sTNFRI-IgGFc腺病毒基因治疗哮喘的实验研究提供了基础.
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| 关 键 词： | 可溶性肿瘤坏死因子受体 腺病毒载体 气道上皮细胞 支气管哮喘 重组 病毒 转染效率 人气道上皮细胞 高效表达 实验 研究 bronchial epithelial cells human expression encoding adenoviral vector 支气管哮喘 基因治疗 活性 蛋白水平 mRNA 感染性滴度 结果 转录 |
| 文章编号： | 1673-4254(2008)04-0517-05 |
| 修稿时间： | 2007年12月10 |
Construction of adenoviral vector encoding soluble human TNFRI-IgGFc cDNA and its expression in human bronchial epithelial cells |
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| SU Jin,YOU Chang-xuan,CAI SHAO-xi,MA Li,WEN Qian,LUO Wei,HUANG Yong-ta.Construction of adenoviral vector encoding soluble human TNFRI-IgGFc cDNA and its expression in human bronchial epithelial cells[J].Journal of Southern Medical University,2008,28(4):517-521. |
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| Authors: | SU Jin YOU Chang-xuan CAI SHAO-xi MA Li WEN Qian LUO Wei HUANG Yong-ta |
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| Institution: | Department of Respiratory Diseases, Nanfang Hospital; School of Biotechnology, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China. drsujin@126.com |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | tumor necrosis factor alpha receptor adenovirus vector human bronchial epithelial cells asthma |
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