LC-MS/MS测定药根碱、巴马汀和小檗碱在Caco-2细胞的摄取特性

 目的 建立药根碱、巴马汀、小檗碱的LC-MS/MS测定法，研究其在Caco-2细胞上的摄取特性。方法 色谱条件：Phenomenex luna C₁₈柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；乙腈-水(4 mmol·L^-1醋酸铵和0.08%甲酸)为流动相，梯度洗脱；质谱条件：采用电喷雾离子源(ESI)，正离子检测，MRM模式。实验考察药物浓度和P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)抑制剂环孢素A和维拉帕米对药根碱、巴马汀、小檗碱在Caco-2细胞上摄取的影响。结果 药根碱、小檗碱在0.001 5~0.30 μmol·L^-1（r=0.999 8、r=1.000 0），巴马汀在0.001 4~0.28 μmol·L^-1（r=0.999 8）内均呈良好的线性关系；药根碱、巴马汀、小檗碱在Caco-2细胞的摄取在一定范围内呈浓度依赖性，表现为被动扩散；P-gp抑制剂环孢素A和维拉帕米可显著增加药根碱、巴马汀、小檗碱在Caco-2细胞上的摄取。结论 该法快速、灵敏、简单。药根碱、巴马汀、小檗碱在Caco-2细胞的摄取存在P-gp的参与，药根碱、巴马汀和小檗碱是P-gp的底物。