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RNA干扰HIF-1α对食管癌细胞糖酵解相关基因表达的影响
引用本文:张伟锋,朱〓宏,曾楷峰,金海林,施瑞华,郝〓波.RNA干扰HIF-1α对食管癌细胞糖酵解相关基因表达的影响[J].南京医科大学学报,2010(7):905-909.
作者姓名:张伟锋  朱〓宏  曾楷峰  金海林  施瑞华  郝〓波
作者单位:南京医科大学第一附属医院消化科,江苏 南京〓210029;南京医科大学第一附属医院消化科,江苏 南京〓210029;南京医科大学第一附属医院消化科,江苏 南京〓210029;南京医科大学第一附属医院消化科,江苏 南京〓210029;南京医科大学第一附属医院消化科,江苏 南京〓210029;南京医科大学第一附属医院消化科,江苏 南京〓210029
基金项目:国家自然科学基金青年科学基金资助(30800511)
摘    要:目的:探讨常氧及缺氧培养对RNA干扰的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及糖酵解相关基因表达的影响?方法:选择3组细胞分别为食管鳞癌Eca-109细胞稳定转染HIF-1α siRNA及空质粒的Eca-109细胞,予以常氧和缺氧培养,缺氧培养时间分别为6?12?24?48 h,采用Western blot检测HIF-1α蛋白表达,Western blot和RT-PCR检测3组细胞常氧和缺氧条件下糖酵解相关基因(Glut-1?LDH-A?HK-Ⅱ)的表达,分光光度法分别测定3组细胞常氧和缺氧培养下胞液中乳酸脱氢酶(LDH)?己糖激酶(HK)酶活性?结果:Eca-109细胞缺氧条件下培养,HIF-1α蛋白表达较常氧时增高,干扰细胞常氧下HIF-1α几乎无表达,缺氧后亦无增强?常氧和缺氧条件下,干扰细胞Glut-1?LDH-A?HK-Ⅱ mRNA和蛋白表达较未干扰细胞明显减弱(P < 0.05),干扰细胞胞液LDH?HK活性较未干扰细胞明显减少(P < 0.05)?结论:RNA干扰能抑制Eca-109细胞的HIF-1α基因表达,进而不同程度减少Glut-1?LDH-A?HK-Ⅱ糖酵解相关基因的表达?

关 键 词:糖酵解    RNA干扰    缺氧诱导因子-1α    食管肿瘤
收稿时间:2010/1/13 0:00:00
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