按法对大鼠脑卒中后肌痉挛的影响及其机理研究

目的:观察按法干预后脑卒中后肌痉挛大鼠血浆及脊髓L1-L3节段灰质前角组织中γ-氨基丁酸(GABA)和甘氛酸(Gly)含量的变化,探讨按法缓解脑卒中后肌痉挛的作用机制。方法:健康成年雄性Sprague-DawIey(SD)大鼠80只,随机抽取10只为空白组,其余70只造模。采用左颈外动脉插入线栓法建立大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血(MCAO)模型。Longa神经功能评定为2-3分,且改良Ashworth肌张力评分评定为;1+、1+及2级的30只大鼠纳入实验。用随机数字表法将30只造模成功的大鼠随机分为模型组、按肌腱组和按肌腹组。造模成功2 d后,按肌腱组及按肌腹组大鼠分别接受大鼠按法橾作治疗仪按股四头肌肌腱和按股四头肌肌腹治疗,压力控制在(350±50)g,按压频率为5s/次,每次15 min,每日1次,连续治疗5d。各组于治疗第5次后,采用改良Ashworth#挛评定标准对大鼠股四头肌的张力进行评定。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法观察大鼠血浆及脊髓L1-L3节段中Gly的含量变化,采用高效液相色谱法(HPLC)观察大鼠血浆及脊髓L1-L3节段中GABA的含量变化。结果:各组改良Ashworth量表肌张力评定中,按肌腱组大鼠肌张力下降较按肌腹组更为明显(P<0.01);按肌腱组血浆及香髓L1-L3节段组织中Gly及GABA的含量增加较按肌腹组更为明显(均P<0.01)。结论:基于腱器官“反牵张反射”理论,采用按法刺激腱器官诱发“反牵张反射”对大鼠肌痉挛状态的改善效果优于按压肌腹。大鼠血浆和脊髓L1-L3节段中Gly和GABA含量的增加,可能是按法刺激腱器官改善大鼠肌痉挛状态的作用机制之一。     

基于网络药理学探讨黄连阿胶汤治疗失眠症的作用机制

目的采用网络药理学方法寻找黄连阿胶汤的有效成分、治疗靶标。方法根据药代动力学参数筛选药物成分,通过网络药理学方法挖掘药物和疾病靶标并构建药物-靶点网络,研究黄连阿胶汤成分的作用机制。结果发现黄连阿胶汤中的氢化小檗碱、β-谷甾醇、山姜素、山柰酚、小檗浸碱、荠苎黄酮等19个成分可能通过调控5-羟色胺、多巴胺、γ氨基丁酸、阿片受体、乙酰胆碱等25个靶点作用于失眠症治疗。结论黄连阿胶汤可能主要通过多个靶点调控多种神经递质发挥对失眠症的治疗作用。     

抗GABABR抗体和抗KCTD16抗体双阳性自身免疫性脑炎(附1例报告及文献复习)

目的提高和拓展对抗γ-氨基丁酸B型受体(GABABR)抗体和抗钾离子通道四聚体结构域蛋白16(KCTD16)抗体双阳性自身免疫性脑炎的认识。方法收集1例抗GABABR抗体和抗KCTD16抗体双阳性的自身免疫性脑炎患者的临床资料,总结诊断、治疗经过等临床特点,结合文献复习进行分析和讨论。结果患者男性,50岁,亚急性起病,表现为精神行为异常、记忆障碍和癫痫发作。脑脊液蛋白增高(1.10g·L^-1),细胞数正常,血清和脑脊液抗GABABR抗体阳性。头颅磁共振检查示双侧海马信号增高。诊断为抗GABABR脑炎。对糖皮质激素、静脉注射免疫球蛋白、血浆置换治疗反应良好,但经历多次复发。随访过程中,患者血清中检测到抗KCTD16抗体阳性。发病1年后,患者全身正电子发射计算机断层显像示右肺近肺门软组织结节,远端阻塞性炎症,氟代脱氧葡萄糖代谢异常增高,行肺结节穿刺未见异形细胞,支气管镜未见出血及新生物。后续随访患者肺部结节进一步增大,最终病理活检证明为小细胞肺癌。结论抗KCTD16抗体可存在于抗GABAbR脑炎患者中,且与小细胞肺癌密切相关。     

复方氨基丁酸维E胶囊联合左乙拉西坦治疗小儿癫痫的临床疗效观察

目的分析复方氨基丁酸维E胶囊联合左乙拉西坦对小儿癫痫的治疗效果及安全性,为临床治疗小儿癫痫提供参考。方法选择2010-08—2014-08我院收治的小儿癫痫68例为研究对象,随机分为2组。对照组使用左乙拉西坦治疗,实验组在对照组基础上联合使用复方氨基丁酸维E胶囊治疗,对比观察2组疗效。结果实验组总有效率明显高于对照组,发作频率低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论复方氨基丁酸维E联合左乙拉西坦治疗小儿癫痫的效果更好,安全性高,值得应用。     

丙泊酚麻醉对老龄大鼠认知功能和海马神经元γ-氨基丁酸A受体表达的影响

目的观察丙泊酚麻醉对老龄大鼠认知功能及海马神经元γ-氨基丁酸A(GABA)受体表达的影响。方法50只SD老年大鼠随机分为丙泊酚组和对照组,每组25只。丙泊酚组大鼠腹腔注射1%丙泊酚中/长链脂肪乳注射液6 mL/kg,对照组腹腔注射等体积的生理盐水。麻醉后1 d进行Morris水迷宫实验,分别采用HE染色和尼氏体染色观察海马区神经细胞及尼氏体(Nissl体)形态学变化,Western Blot检测GABA蛋白量表达。结果麻醉后,2组大鼠肛温、心率、呼吸频率、血氧饱和度比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。随着实验时间的延长,2组大鼠逃逸潜伏期、总里程数逐渐减小,丙泊酚组大鼠各时间点逃逸潜伏期、总里程均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。丙泊酚组大鼠穿越平台区域次数、时间小于、短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组海马区Nissl体存在于细胞浆及树突,染色较深,神经细胞排列整齐,形态规则;丙泊酚组Nissl体消失,神经细胞数量减少,细胞核破裂、丢失。丙泊酚组大鼠海马GABA蛋白表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论丙泊酚对大鼠认知功能有影响,并与海马区GABA的表达相关。     

别孕烯醇酮对6-羟基多巴胺损伤的细胞系SH-SY5Y的保护作用

目的 明确别孕烯醇酮（APα）对6-羟多巴胺（6-OHDA）损伤的SH-SY5Y细胞系的保护作用，并阐明可能的分子机制。方法 向体外培养的SH-SY5Y细胞系中分别加入6-OHDA、APα、γ-氨基丁酸A受体（GABAAR）拮抗剂荷包牡丹碱（Bic）和电压门控L型Ca²⁺通道拮抗剂硝苯地平（nifedipine），采用免疫荧光细胞化学染色方法观察不同组别酪氨酸羟化酶（TH）阳性细胞的变化，Western blotting检测胞质钙调蛋白（CaM）、钙离子 钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ δ3（CaMKⅡδ3），胞核CaMKⅡδ3、脑源性神经营养因子（BDNF）和细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK1）表达的变化，采用蛋白质免疫共沉淀验证CaMKⅡδ3与CDK1/BDNF的相互作用。 结果 APα作用后，6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞TH和5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）阳性细胞数目均明显增加，而TH/BrdU双阳性细胞数目无显著变化；同时Western blotting结果表明，SH-SY5Y细胞胞质和胞核上述蛋白的表达与单纯 6-OHDA 组相比也明显上升，经Bic处理后各蛋白增加更为明显。免疫共沉淀结果表明，CaMKⅡδ3与CDK1/BDNF存在相互作用。 结论 APα对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞的保护中，GABAAR发挥负性调控作用，通过稳定细胞的内环境达到增加TH阳性神经元数量的目的，其中Ca²⁺ -CaM-CaMKⅡδ3信号通路和BDNF与CDK1发挥了关键作用。     

血栓素A_2受体在正常大鼠脑内的分布定位

目的探讨血栓素A2受体(TP)在正常大鼠脑内的表达分布特点。方法正常成年SD大鼠脑组织冰冻切片,TP免疫荧光染色,TP/神经核蛋白(Neu N),TP/胶质纤维酸性蛋白(GFAP),TP/谷氨酸脱羧酶67(GAD67)免疫荧光双标染色,观察TP在脑内分布表达情况。结果 TP免疫阳性产物主要分布在扣带回皮质、皮层Ⅲ~V层、下丘和小脑的浦肯野细胞层;免疫荧光双标结果显示TP与神经元胞核特异性标记物Neu N共存,但不与星形胶质细胞标记物GFAP共存;同时,所有TP阳性神经元表达γ氨基丁酸(GABA)能神经元标记物GAD67。结论 TP表达于大鼠扣带回皮质、皮层Ⅲ~V层、下丘脑和小脑的浦肯野细胞层,主要分布于GABA能神经元,提示TP可能参与了大鼠大脑GABA能神经元的功能调节和病变过程。     

难治性癫痫基因靶向治疗研究进展

目前难治性癫痫的基因治疗策略主要通过调节神经递质网络、神经肽Y和神经营养因子等以发挥抗癫痫作用。其中研究较为热门的靶点包括γ-氨基丁酸及其受体、N-甲基-D-天冬氨酸及其受体、甘丙肽、神经肽Y和神经营养因子等。本文就上述靶点的主要研究结果、各研究的优劣做简要介绍,以为临床解决难治性癫痫提供证据。     

Local inhibition of GABA affects precedence effect in the inferior colliculus

The precedence effect is a prerequisite for faithful sound localization in a complex auditory environment, and is a physiological phenomenon in which the auditory system selectively suppresses the directional information from echoes. Here we investigated how neurons in the inferior colliculus respond to the paired sounds that produce precedence-effect illusions, and whether their firing behavior can be modulated through inhibition with gamma-aminobutyric acid （GABA）. We recorded extracellularly from 36 neurons in rat inferior colliculus under three conditions： no injection, injection with saline, and injection with gamma-aminobutyric acid. The paired sounds that produced precedence effects were two identical 4-ms noise bursts, which were delivered contralaterally or ipsilaterally to the recording site. The normalized neural responses were measured as a function of different inter-stimulus delays and half-maximal interstimulus delays were acquired. Neuronal responses to the lagging sounds were weak when the inter-stimulus delay was short, but increased gradually as the delay was lengthened. Saline injection produced no changes in neural responses, but after local gamma-arninobutyric acid application, responses to the lagging stimulus were suppressed. Application of gamma-aminobutyric acid affected the normalized response to lagging sounds, independently of whether they or the paired sounds were contralateral or ipsilateral to the recording site. These observations suggest that local inhibition by gamma-aminobutyric acid in the rat inferior colliculus shapes the neural responses to lagging sounds, and modulates the precedence effect.     

无抽搐电休克治疗对抑郁症患者γ-氨基丁酸的影响

目的 探讨无抽搐电休克治疗（MECT）对抑郁症患者γ-氨基丁酸（GABA）的影响。方法 入组45例抑郁症患者,接受12次MECT治疗,采用汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评估疗效;采用ET-脑超慢涨落分析仪测定MECT治疗前后患者的GABA的相对功率。结果 经过12次MECT治疗,患者HAMD评分由治疗前的（28．87±6．01）分降低为（11．64±4．04）分,GABA相对功率由（14．21±7．93）升高为（29．71±8．46）,差异均有统计学意义（t值分别为-23．540,14．601;P〈0．01）;GABA递质相对功率的变化与抑郁症患者临床症状的改善呈正相关（r=0．61,P〈0．01）;GABA递质相对功率的变化能预测抑郁症临床症状变化的35．3％。结论 MECT可以使抑郁症患者异常降低的GABA的递质相对功率增高,GABA可能参与了抑郁症的发病机制。