川陈皮素对糖尿病肾病大鼠AMPK和eNOS表达的影响研究

【摘要】目的 观察川陈皮素对糖尿病肾病大鼠的治疗作用，并从腺苷酸蛋白活化激酶（AMPK）和内皮型一氧化氮酶（eNOS）途径探讨其作用机理。方法 采用高脂高糖饲料喂养+链脲佐菌素（STZ）腹腔注射复制2型糖尿病肾脏损害大鼠模型，模型构建成功后，将其随机分为正常组、模型组、贝那普利干预组以及川陈皮素低、中和高剂量治疗组（n=20）。实验中密切监测大鼠一般情况，治疗期结束后收集尿液检测24h蛋白尿，收集血液检测肾功能指标、抗氧化指标，收集肾脏观察肾脏病理学，同时检测肾脏组织中AMPK及eNOS蛋白和mRNA的表达结果。结果 正常组肾小球正常，无明显病理特征；模型组出现肾小球增大，系膜和肾间质纤维组织增生；贝那普利组和川陈皮素三个剂量组相较于模型组明显减轻。与正常组相比，模型组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显升高(P＜005)；SOD和GSH明显降低(P＜005)，与模型组相比，贝那普利和川陈皮素三个剂量组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显降低(P＜005)，SOD和GSH明显升高(P＜005)。与正常组相比，模型组p AMPK、AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达均明显降低(P＜005)；与模型组相比，贝那普利组和川陈皮素低、中和高剂量组AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达明显升高(P＜005)。结论 川陈皮素可保护肾功能，提高血清和肾脏抗氧化指标，同时增加AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达，最终保护糖尿病肾脏损害。     

鼻咽癌组织中iNOS的表达与微血管密度计数的研究

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)在鼻咽癌中的表达与鼻咽癌生物学行为的关系,探讨肿瘤血管生成与鼻咽癌生物学行为的关系,探讨iNOS的表达与鼻咽癌血管生成的关系。方法采用非生物素二步免疫组化法,检测iNOS在鼻咽癌组织中表达,并根据CD34相关抗原标记血管内皮细胞。结果鼻咽癌组织中MVD显著高于慢性鼻咽炎组织(27.7±8.88 vs 9±3.1,P<0.05)。MVD与年龄、性别无关,临床分期Ⅲ、Ⅳ期组的MVD显著高于Ⅰ、Ⅱ期组(30.7±4.7 vs 22.2±7.5,P<0.05)。淋巴转移组MVD显著高于淋巴结未转移组(29.6±4.8 vs 20.5±4.8,P<0.05)。iNOS在鼻咽癌组织中阳性表达率为56.25%,iNOS的表达与年龄、性别无关。临床分期Ⅲ、Ⅳ期组iNOS的阳性表达率为70.97%,显著高于Ⅰ、Ⅱ期组29.41%(P<0.05)。淋巴转移组iNOS的阳性表达率为65.79%,显著高于淋巴结未转移组20.00%(P<0.05)。iNOS阳性表达组的MVD显著高于iNOS阴性表达组(30.0±5.4 vs 24.0±6.0,P<0.05)。结论血管生成及iNOS的表达与鼻咽癌生物学行为关系密切。iNOS表达促进了鼻咽癌血管生成及颈淋巴结的转移。测定MVD及iNOS的表达有助于判断鼻咽癌的恶性程度及预后。     

克罗米酚对多囊卵巢综合征患者血清中NO、IL-10及MMP-9的调节作用

目的探索克罗米酚(CC)对多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清中的一氧化氮(NO)、白细胞介素-10(IL-10)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的调节作用。方法选取2017年1～12月在内蒙古包钢医院生殖医学中心就诊的141例PCOS女性患者为研究对象,对其进行口服CC诱导排卵(50mg/d,连续5d)治疗,然后在治疗前和CC治疗4周后采集静脉血运用酶联免疫吸附实验检测患者血清中IL-10、MMP-9和NO的水平。治疗后患者依据有无排卵分为排卵组和未排卵组,依据是否妊娠分为妊娠组和未妊娠组,比较CC治疗前后血清中各指标变化及各组间差异。结果 CC处理后,患者血清中NO和IL-10水平显著上升,而MMP-9水平显著下降,与处理前相比差异均有统计学意义(P0.05),且CC使PCOS患者的排卵率达到53.2%,临床妊娠率达到20.6%。组间比较时,治疗前3个指标均无显著性差异;治疗后排卵组的MMP-9水平显著低于未排卵组(P0.01),妊娠组的MMP-9水平显著低于未妊娠组(P0.01),IL-10和NO水平的水平无显著性差异(P0.05)。结论用CC诱导的排卵能增加NO和IL-10的水平,并降低MMP-9的水平,对有排卵和妊娠患者MMP-9水平影响更为显著,同时也提高了PCOS不孕妇女的排卵率和临床妊娠率。     

一氧化氮合酶在外阴慢性单纯性苔藓和外阴硬化性苔藓中的表达

目的：检测诱导型和内皮型一氧化氮合酶（iNOS 和eNOS）在外阴慢性单纯性苔藓和外阴硬化性苔藓中的表达。方法：采用免疫组织化学SABC法检测iNOS和eNOS在30例外阴慢性单纯性苔藓蜡块（LSC）、30例外阴硬化性苔藓蜡块（LS）和10例外阴正常皮肤中的表达，并以人原始造血细胞抗原（CD34）标记微血管内皮细胞，测量各组织的微血管密度（MVD）。结果：iNOS和eNOS在外阴正常皮肤中无表达；在LSC中iNOS和eNOS每视野平均阳性细胞数分别为14.83±3.79和17.86±4.82，高于LS的8.00±3.35和6.43±3.87，差异均有统计学意义（P＜0.05）；在LSC和正常皮肤中MVD分别为21.58±2.48和20.44±3.66，高于LS（10.34±2.83）。iNOS和eNOS的表达具有明显的正相关性（Kappa=0.811，P＜0.05）。结论：iNOS和eNOS可能与LSC炎症过程中的血管扩张有关；在LS皮损真皮中微血管减少，iNOS和eNOS可代偿性地改善LS的血液循环。     

谷氨酸对腺苷A2A受体调节一氧化氮合酶活力的影响

目的探讨谷氨酸是否能够影响腺苷A2A受体对一氧化氮合酶（NOS）活力的调节。方法用1000ng／ml脂多糖（LPS）刺激小胶质细胞，分别加入100nmol／L A2A受体激动剂CGS21680以及不同浓度的谷氨酸（0，1，0，25，0，5mmol／L）干预，观察NOS活力变化。结果LPS诱导NOS活力增高，激活A2A受体可以产生抑制作用；0，25及0．5mmoL／L谷氨酸和A2A受体激动剂同时存在时，NOS活力进一步增高。结论高浓度谷氨酸可逆转腺苷A2A受体激动剂抑制升高NOS活力的作用。     

酶双循环法测定血清中NOS的活性

一氧化氮合酶(NOS)催化精氨酸、NADPH H 和O2,生成胍氨酸、NADP 、NO。以往NOS活性测定的方法主要是测定胍氨酸和NO的含量,由于方法学的弊病使其应用范围受限。W ang[1]建立了生物组织中测定NOS的酶双循环方法,其放大倍数为1000~4000。目前尚未见用酶双循环法测定血清NOS活性的     

慢性乙型肝炎患者可溶性E-选择素、层黏连蛋白和一氧化氮水平及临床意义

E-选择素（E-selectin）是由白细胞介素1（IL-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和脂多糖（LPS）激活的内皮细胞产生，产生后24小时释放入血，形成可溶性的分子。可溶性E-选择素（sE-selectin）可诱导82整合素（Mac-1）（CD11b／CD18）活化，对多形核粒细胞有趋化作用，是内皮细胞活化的标志。。在慢性乙型肝炎中，淋巴细胞与内皮细胞黏附、渗出及与肝细胞的黏附均由黏附分子（sE-选择素等）所介导，肝脏内皮的损伤与sE-选择素水平有着很大的关系。层黏连蛋白（LN）是细胞外间质中的一种非胶原性糖蛋白，可介导细胞与细胞、细胞与细胞间质间的黏附，     

颞下颌关节紊乱病滑液及血清中一氧化氮检测

一氧化氮(aitric oxide，NO)是一种高反应性细胞毒自由基，其在许多疾病中对组织造成损伤已得到证实。我们通过检测颞下颌关节紊乱病(temporomandibular disorders，TMD)患者关节滑液及血清中NO，探讨NO在TMD中的作用。