甘草干姜汤抗小鼠乳腺癌实验研究

目的：探讨甘草干姜汤(LDGD)对荷乳腺癌小鼠肿瘤生长、免疫器官及肝肾功能的影响。方法：雌性BALB/c小鼠随机分为5组：正常对照组,模型对照组,LDGD低、中、高剂量组(分别为0.1、0.3、0.9g/kg)。正常对照组小鼠灌胃给予蒸馏水,其他各组小鼠接种乳腺癌4T1细胞后,次日开始LDGD低、中、高剂量组小鼠连续灌胃给药20d,模型对照组小鼠给予相应体积的蒸馏水。测定各组小鼠的体质量、胸腺系数、脾脏系数、肝脏系数、肾脏系数、血清肝功能、肾功能生化指标及肿瘤体积、质量,HE染色后观察荷瘤小鼠的肿瘤组织病理变化。结果：与模型对照组相比,LDGD高剂量组小鼠肿瘤生长受到明显抑制,抑瘤率为(44.76±0.06)%(P<0.01),中剂量组抑瘤率为(15.68±0.21)%(P<0.05),低剂量组无明显抑瘤作用;肿瘤组织病理切片HE染色结果表明,LDGD高剂量组中肿瘤坏死灶区域显著增多;各剂量组LDGD对小鼠体质量均无明显影响,不同剂量LDGD组的胸腺系数、肝脏系数、肾脏系数均无明显变化,脾脏系数下降;LDGD高剂量组ALP和CRE与正常对照组小鼠的差异有统计学意义(P<0.05),但与模型对照组相比无明显差异,其他肝肾血生化指标与正常对照组小鼠比较差异均无统计学意义。结论：高剂量LDGD对4T1荷瘤小鼠的肿瘤生长具有明显的抑制作用,无明显免疫抑制作用和肝肾毒性。     

甘草干姜汤的抗胃癌作用及其机制研究

目的: 采用血清药理学方法探究甘草干姜汤(LDGD)的体外抗胃癌作用,并基于网络药理学和分子对接法探讨其抗胃癌机制。方法: 以不同配比的甘草干姜汤灌胃大鼠后以腹主动脉取血方式提取含药血清,利用四甲基噻唑蓝(MTT)法观察甘草、干姜不同配比LDGD大鼠含药血清对人胃腺癌细胞AGS以及人脐静脉血管内皮细胞HUVEC活力的影响;基于网络药理学构建LDGD抗胃癌的“成分-靶点”网络,通过构建蛋白-蛋白相互作用网络(PPI)筛选出关键靶点,通过GO功能和KEGG通路富集分析探究LDGD抗胃癌可能涉及的生物学功能和信号通路;通过分子对接分析LDGD中文献报道的8种主要成分甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草酸、6-姜酚、6-姜烯酚、8-姜酚和抗胃癌关键靶点的结合情况。结果: 血清药理学实验中不同配比LDGD灌胃大鼠后提取的30%含药血清对人胃腺癌细胞AGS的细胞活力均产生了显著的抑制作用,而对HUVEC无明显抑制作用;通过网络药理学分析得到LDGD有效化学成分101个,抗胃癌关键靶点为VEGFA、TNF-α、CASP3、MYC;富集分析结果表明,LDGD抗胃癌可能主要通过对凋亡信号、氧化应激、活性氧反应等途径的调节,以及对TNF、p53等信号通路发挥作用;分子对接结果表明,甘草酸、甘草苷与VEGFA对接良好,6-姜酚与TNF-α对接良好,且这3种成分在LDGD中含量相对较高。结论: 甘草干姜汤具有一定抗胃癌活性,其机制可能是通过调节氧化应激,作用于TNF、p53等信号通路,其中甘草酸、甘草苷、6-姜酚可能为关键药效成分。     

基于网络药理学和分子对接法预测甘草干姜汤抗乳腺癌的主要活性成分及作用机制

目的： 利用网络药理学和分子对接法研究甘草干姜汤（LDGD）可能的抗乳腺癌活性成分及作用机制。方法： 借助TCMSP数据库筛选出复方甘草干姜汤的主要有效成分;利用Genecards人类基因数据库获取乳腺癌的疾病靶点;利用STRING数据库和Cytoscape 3.8.0软件进行蛋白相互作用网络的构建和分析;并通过DAVID数据库进行GO富集分析和KEGG通路富集分析;基于文献检索甘草干姜汤的药效成分并将筛选出的关键靶点进行分子对接。结果： LDGD抗乳腺癌潜在的关键靶点有AKT1、MYC、TP53、EGF等;GO功能富集分析显示与作用靶点有关的生物学过程主要有凋亡信号通路、氧化应激等;细胞成分主要有细胞周期蛋白依赖性激酶、转录因子复合体、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶复合物、膜区、膜微区等;分子功能主要有蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶活性、转录因子活性核受体活性、泛素蛋白连接酶结合等;KEGG通路分析结果显示主要涉及p53、TNF、IL-17、EGFR、细胞凋亡等信号通路;以AKT1为靶点,8种药效成分中与其结合的小分子有甘草苷、6-姜酚、6-姜烯酚、甘草素、异甘草素、异甘草苷,其中甘草苷、6-姜酚、6-姜烯酚、甘草素的打分值大于原配体打分值的80%。结论： 甘草苷、6-姜酚、6-姜烯酚、甘草素可能是甘草干姜汤中抗乳腺癌主要活性成分之一,抗肿瘤作用机制可能涉及细胞增殖、凋亡、氧化应激、炎症等相关通路。