FLNA在肝癌中的表达及其对细胞增殖、侵袭转移的作用

摘 要：［目的］ 探讨细丝蛋白A（FLNA）在肝癌组织中的表达及过表达对肝癌细胞生物表型的影响。［方法］ 采用免疫组织化学方法、Western Blot检测75例肝癌组织及距其癌组织边缘2cm以上的镜下未见癌浸润的37例正常肝脏组织中FLNA的表达情况。采用慢病毒转染建立FLNA过量表达的肝癌HepG2细胞株。荧光定量PCR及Western Blot检测FLNA转染后肝癌HepG2细胞株中FLNA表达含量的变化。MTT法、Transwell检测FLNA过量表达对肝癌细胞增殖及细胞侵袭转移的影响。［结果］ 免疫组织化学结果表明,FLNA蛋白在肝癌组织及正常肝脏组织中的表达阳性率分别为37.3%、89.2%,差异有统计学意义（P＜0.05）。Western Blot结果表明,FLNA 蛋白在肝癌组织的相对表达量较正常肝脏组织明显降低,两者比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。FLNA蛋白表达水平与肝癌有无淋巴结转移、临床分期以及组织学分级有关（P＜0.05）,而与患者年龄、性别、肝癌病理类型及T分期无关（P＞0.05）。FLNA高表达的肝癌细胞其增殖能力明显减弱、侵袭转移能力降低,MMP-9蛋白的表达量明显下调。［结论］ 肝癌组织中FLNA蛋白表达明显下降,可能是正常肝脏组织恶性转变的重要生物学标志,对预测肝癌发生、浸润转移有重要意义。     

阿帕替尼治疗化疗失败的转移性结直肠癌近期疗效及预后分析

  目的  评价阿帕替尼单药或联合化疗治疗转移性结直肠癌的近期疗效及耐受性。  方法  选取2016年1月至2017年12月唐山市人民医院收治的化疗失败的转移性结直肠癌患者23例,病理均经肠镜或手术证实,术后按结直肠癌诊疗规范行化疗,一线或二线化疗进展后进入阿帕替尼单药或联合化疗。单药阿帕替尼组16例,口服阿帕替尼联合化疗组7例,前3个月剂量250~500 mg,每个月评价可测量病灶,3个月以后每3个月应用CT评价疗效,评估阿帕替尼治疗的有效性及不良反应。  结果  所有患者中,无完全缓解（complete response,CR）,部分缓解（partial response,PR）9例,病情稳定（stable disease,SD）7例,疾病进展（progressive disease,PD）7例,客观缓解率（overall response rate,ORR）为39.13%,疾病控制率（disease control rate,DCR）为69.56%,疾病无进展生存时间（progressionfree survival,PFS）为1~19.0个月,中位PFS为5.0个月。单药阿帕替尼组无CR,PR 5例,SD 5例,PD 6例,ORR为31.25%,DCR为62.50%,中位PFS为4.5个月。阿帕替尼联合化疗组无CR,PR 4例,SD 2例,PD 1例,ORR为57.10%,DCR为85.70%,中位PFS为12.0个月。Log-Rank单因素分析显示,同步化疗、阿帕替尼剂量、LDH升高、低蛋白血症及疗效评价与PFS相关（均P < 0.05）;同步化疗、阿帕替尼剂量、血红蛋白降低、CD4+淋巴细胞下降及疗效评价与OS相关（均P < 0.05）。Cox回归多因素分析显示,LDH升高为PFS的独立影响因素,上述因素与OS差异无统计学意义（P>0.05）。两组患者不良反应以轻度高血压、蛋白尿、手足综合征为主,差异无统计学意义（均P>0.05）。  结论  阿帕替尼联合化疗可改善化疗失败的转移性结直肠癌患者PFS,可作为转移性结直肠癌治疗的一种有效方法。      

miR-769-5p在非小细胞肺癌中的表达及其对细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响

目的 探讨微小RNA-769-5p （miR-769-5p） 在非小细胞肺癌（NSCLC）细胞株中的表达及其对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法 采用实时荧光定量PCR（QPCR）技术检测miR-769-5p 在5种NSCLC细胞（A549、NCI-H1299、NCI-H157、ANIP-973和GLC-82）中的相对表达量,选择相对表达量最低和最高的细胞株分别转染miR-769-5p mimics／miR-769-5p inhibitor,另设miRNA mimics control／inhibitor control对照组;采用MTS 实验、克隆形成实验及Transwell 小室实验检测miR-769-5p对NSCLC 细胞增殖、克隆形成、侵袭和迁移能力的影响。结果 miR-769-5p在A549、NCI-H1299、NCI-H157、ANIP-973 及GLC-82细胞中的相对表达量分别为 0.06、0.40、0.09、1.04和2.31。在miR-769-5p表达水平最低的A549细胞中瞬时转染miR-769-5p mimics,在miR-769-5p表达水平最高的GLC-82细胞中瞬时转染miR-769-5p inhibitor。MTS结果显示,与对照组比较,miR-769-5p mimics 能够抑制A549细胞的增殖 （P＜0.05）,而miR-769-5p inhibitor能够促进GLC-82细胞的增殖 （P＜0.05）。平板克隆实验结果显示,与对照组比较,miR-769-5p mimics 能够抑制A549细胞的平板克隆形成数 （124.7±14.7 vs. 399.4±46.0,P＜0.05）;而miR-769-5p inhibitor能够促进GLC-82细胞的平板克隆形成数 （555.7±29.7 vs. 366.3±28.7,P＜0.05）。Transwell实验结果显示,与对照组迁移和侵袭跨膜细胞数比较,miR-769-5p mimics能够抑制A549细胞的迁移和侵袭 （94.4±18.1 vs. 157.8±22.9,84.4±15.1 vs. 135.6±16.7,P＜0.05）;miR-769-5p inhibitor能够促进GLC-82细胞的迁移和侵袭 （226.7±40.3 vs. 153.3±38.7,196.7±39.1 vs. 138.9±40.4,P＜0.05）。结论 miR-769-5p可以抑制NSCLC细胞的增殖、侵袭和迁移,可能成为NSCLC的潜在靶点。     

榄香烯联合奈达铂胸腔灌注治疗肺癌恶性胸水

目的观察榄香烯联合奈达铂胸腔灌注治疗恶性胸水的疗效。方法将65例肺癌恶性胸水患者随机分成联合治疗组(34例)和对照组(31例),联合组给予两药联合,对照组单纯给予奈达铂。结果联合组有效率为88.23%,对照组为58.06%,(P0.01)。联合组生活质量改善优于对照组(76.47%,61.29%),(P0.05)。主要不良反应有骨髓抑制、发热、胸痛、消化道反应等,联合组发热、胸痛发生率高于对照组(P0.05),经对症处理可较好控制。结论榄香烯联合奈达铂胸腔注射治疗肺癌恶性胸水疗效确切,改善晚期肿瘤患者的生存质量,毒副反应较低,安全有效。     

Survivin siRNA沉默对非小细胞肺癌细胞生物学的影响

目的探讨凋亡抑制蛋白(Survivin)对非小细胞肺癌(NSCLC)H1299细胞株的生物学影响。方法通过脂质体介导将Survivin基因siRNA瞬时转染H1299细胞。采用RT-PCR及Western blot检测转染后H1299细胞内Survivin基因的表达水平。MTT比色法、流式细胞术(FCM)及Western blot观察细胞增殖、凋亡、周期及Caspase-9蛋白表达变化情况。结果 RT-PCR及Western blot证实,siRNA沉默的H1299细胞中Survivin mRNA、蛋白的表达水平较未转染组明显降低(t=10.970,P=0.000;t=9.192,P=0.003)。MTT、细胞凋亡及周期结果表明,siRNA沉默的H1299细胞其增殖能力明显减弱、细胞凋亡明显升高,G2/M期阻滞,Caspase-9蛋白表达增加(t=8.162,P=0.001;t=10.800,P=0.000;t=9.192,P=0.003)。结论 Survivin参与NSCLC细胞增殖、凋亡、周期这一生物学过程。     

凋亡相关蛋白FLIP和NF-κB在人骨肉瘤中表达及其与凋亡的关系研究

目的探讨FLIP、NF-κB蛋白在人骨肉瘤组织中的表达以及与骨肉瘤细胞凋亡的关系。方法免疫组化方法检测FLIP、NF-κB蛋白在骨肉瘤及骨软骨瘤中的表达;用TUNEL方法通过激光扫描共聚焦显微镜检测骨肉瘤及骨软骨瘤细胞凋亡并计算细胞凋亡指数(AI)。结果骨肉瘤组织FLIP蛋白表达强度(0.276±0.013)高于骨软骨瘤(0.171±0.007)(t=26.122,P<0.05)。NF-κB蛋白表达也高于骨软骨瘤〔(0.754±0.026)和(0.318±0.009)〕(t=56.700,P<0.05)。骨肉瘤中AI显著低于骨软骨瘤(P<0.01)。骨肉瘤中FLIP蛋白表达与细胞凋亡指数呈负相关(r=-0.949,P<0.01);NF-κB蛋白表达与细胞凋亡指数之间也呈负相关(r=-0.877,P<0.01)。结论 FLIP、NF-κB均参与细胞凋亡的调控过程,二者均可抑制骨肉瘤细胞凋亡;骨肉瘤组织中FLIP及NF-κB蛋白均呈过表达,对其发生、发展中起促进作用。     

DMBT1在乳腺癌组织中的表达及临床意义

[目的]探讨脑恶性肿瘤缺失基因1（DMBTI）在乳腺癌组织中的表达及意义。[方法]采用免疫组织化学方法检测73例乳腺癌组织及距其癌组织边缘2cm以上镜下未见癌浸润的正常组织中DMBT1蛋白的表达情况。[结果]免疫组织化学结果表明,DMBT1蛋白在乳腺癌组织及正常乳腺组织中的表达阳性率分别为35．6％、70．9％,差异有统计学意义（P〈0．05）。DMBT1蛋白表达与T分期、分化程度、淋巴结转移以及临床分期有关（P〈0．05）。Kap1an—Meier生存分析提示,DMBT1表达阳性的乳腺癌患者5年总生存率明显高于表达阴性者,两者比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。[结论]乳腺癌组织中DMBT1蛋白表达降低,且与乳腺癌T分期、分化程度、淋巴结转移、临床分期及患者预后有关。     

细丝蛋白A在肺鳞癌组织中的表达及临床意义

[目的]探讨细丝蛋白A (filamin A,FLNa)在肺鳞癌组织中的表达及其临床意义.[方法]采用Western Blot方法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),分别检测43例肺鳞癌组织及距肺鳞癌组织边缘5cm以上的镜下未见癌组织浸润的正常组织中FLNa蛋白、mRNA的表达情况.[结果] FLNa蛋白在肺腺鳞组织及正常肺组织中的相对表达量分别为0.381±0.032、0.673±0.072,两组差异有统计学意义(P＜0.05).FLNa mRNA在肺腺鳞组织及正常肺组织中的相对表达量分别为0.356±0.052、0.573±0.075,两组差异有统计学意义(P＜0.05).FLNa蛋白、mRNA表达与肺鳞癌患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分化无关(P＞0.05);而与淋巴结转移以及肿瘤TNM分期有关(P＜0.05).[结论]肺鳞癌中FLNa蛋白和mRNA的表达均降低,可能与肺鳞癌的发生、发展相关.     

分子靶向药物索拉非尼不良反应的防治

目的探讨分子靶向药物索拉非尼的不良反应及防治方法。方法总结2006年11月至2008年12月应用索拉非尼治疗的5例患者的临床资料,探讨索拉非尼的不良反应及处理方法。结果5例患者应用索拉非尼后均出现不良反应,但表现及轻重各异。结论分子靶向药物索拉非尼不良反应明显,临床应用中应加强监护和针对性治疗。