RNA干扰靶向沉默EGFR基因对卵巢癌耐药细胞凋亡影响的实验观察

目的:探讨RNA干扰表皮生长因子受体(EGFR)基因对卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP凋亡的影响。方法:利用基因重组技术构建携带EGFR小发夹干扰RNA(pEGFR-shRNA)的重组质粒表达载体,脂质体法转染SKOV3/DDP细胞。实验分组:对照组(不进行干扰)、S1组(转染非特异性质粒)、S2组(转染特异性质粒)。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学法(ICC)检测转染后细胞内EGFRmRNA和蛋白的表达,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期和凋亡率。结果:与对照组相比,S2组细胞EGFRmRNA的表达明显受抑制,抑制率达57%(P<0.01)。蛋白质的表达水平显著降低(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,顺铂作用24h后,特异性转染组细胞周期分布发生明显改变,G0/G1期细胞比例增多,而S期细胞比例减少,凋亡率显著升高(P<0.01)。结论:RNA干扰EGFR基因通过抑制SKOV3/DDP细胞中EGFR基因的表达,恢复细胞对顺铂的敏感性。     

EGFR及其信号通路分子在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义

目的:探讨表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ERK及细胞外信号调节激酶AKT mRNA在上皮性卵巢癌的表达及其临床意义。方法:选取2008年12月至2010年4月青岛大学医学院附属医院经病理证实的上皮性卵巢癌61例,RT-PCR检测上皮性卵巢癌、良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织中EGFR、AKT、ERK mRNA的表达,并结合上皮性卵巢癌临床病理资料分析其临床意义。结果:上皮性卵巢癌组织中EGFR、ERK和AKT mRNA的阳性表达率高于正常卵巢及良性卵巢肿瘤组织(78.7%vs14.3%、31.3%,80.3%vs35.7%、35.7%,90.2%vs21.4%、25.0%;P<0.01)。EGFR、AKT mRNA的表达与肿瘤临床分期、细胞分化和淋巴结转移有关(P<0.05),与组织学类型和年龄无关(P>0.05);ERK mRNA的表达与细胞分化程度相关(P<0.05)。AKT mRNA和ERK mRNA的表达具有相关性(r=0.048,P<0.05)。结论:EGFR、AKT、ERK的表达与上皮性卵巢癌的发生、发展相关。     

EGFR信号通路相关分子在上皮性卵巢癌表达的研究

目的:探讨EGFR、Akt、Raf-1、ERK mRNA在上皮性卵巢癌组织中表达的临床意义、相关性及对预后的影响。方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测14例正常卵巢组织、16例卵巢良性肿瘤组织及61例上皮性卵巢癌组织中EGFR、Akt、Raf-1、ERK mRNA的表达,并分析它们与临床病理参数之间的关系及其相关性。结果:卵巢癌组织中EGFR、Akt、Raf-1、ERK阳性表达率显著高于正常卵巢及卵巢良性肿瘤组织(P<0.05);EGFR、Akt表达水平与卵巢癌手术病理分期、细胞学分级及淋巴结转移有关(P<0.05),Raf-1表达水平与手术病理分期及淋巴结转移有关(P<0.05);ERK表达水平与细胞学分级有关(P<0.05);两两比较,EGFR与Raf-1,Akt与Raf-1,Akt与ERK,Raf-1与ERK mRNA的表达呈正相关(P<0.05)。结论:上皮性卵巢癌组织EGFR、Raf-1、Akt、ERK的过表达与卵巢癌的发生发展及侵袭有关,可能为多靶点联合治疗提供新方向。     

子宫颈鳞癌胫骨转移一例报告及文献复习

宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤,其转移途径主要为直接蔓延、淋巴转移,而血行转移较少见;远处转移中以肺转移和锁骨上淋巴结转移较多见,骨转移少见;骨转移最常见的部位是脊柱,其次为骨盆骨,四肢长骨罕见[1-2].骨转移一旦发生预后极差,并严重影响患者的生命质量.本文报道了1例罕见的宫颈鳞癌胫骨转移患者,并进行相关文献复习.     

靶向EGFR的干扰RNA对卵巢癌耐药细胞凋亡的影响

目的：探讨RNA干扰表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）的表达对多药耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDP凋亡的影响。方法：构建携带EGFR小发夹干扰RNA(small hairpin RNA, shRNA)的重组表达载体（pEGFRshRNA）,脂质体法转染入SKOV3/DDP细胞,同时设未转染对照组和非特异性干扰质粒CtrlshRNA对照组。RTPCR和免疫细胞化学法检测转染后SKOV3/DDP细胞内EGFR mRNA和蛋白的表达;流式细胞仪分析EGFR沉默后SKOV3/DDP细胞周期和凋亡率的变化。结果：与转染对照质粒组相比,转染pEGFRshRNA组细胞EGFR mRNA和蛋白的表达明显受抑制(P<001)。流式细胞仪检测结果显示：顺铂作用24 h后,pEGFRshRNA转染组细胞周期分布发生明显改变,与对照组和CtrlsiRNA组相比,G0/G1期细胞比例和凋亡率明显增加（P<0.01）,而S期细胞比例显著降低（P<0.01);凋亡率显著升高。结论：靶向EGFR的干扰RNA可抑制SKOV3/DDP细胞中EGFR的表达,调节耐药细胞周期,促进耐药细胞凋亡。     

卵巢癌组织EGFR及下游信号分子的表达及其临床意义

目的:探讨表皮生长因子受体(EG-FR)、蛋白激酶B(PKB/Akt)、Ras相关因子-1(Raf-1)mRNA在上皮性卵巢癌组织中表达的临床意义、相关性及对预后的影响。方法:转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测14例正常卵巢组织、16例卵巢良性肿瘤组织及61例上皮性卵巢癌组织中EGFR、Akt和Raf-1 mRNA的表达,并分析它们与临床病理参数之间的关系及其相关性。结果:卵巢癌组织中EGFR、AKT和Raf-1阳性表达率分别为78.7%(48/61)、80.3%(49/61)和75.4%(46/61),显著高于正常卵巢及卵巢良性肿瘤组织,P<0.05;三者表达水平均与卵巢癌手术病理分期及淋巴结转移有关,P<0.05;EGFR、Akt表达水平与细胞学分级有关,P<0.05;EGFR与Raf-1及Akt与Raf-1之间的联系有统计学意义,P<0.05。结论:上皮性卵巢癌组织EGFR、Raf-1和Akt的过表达与卵巢癌的发生发展及侵袭有关,可能为多靶点联合治疗提供新方向。