circAPLP2对结直肠癌细胞SW480侵袭与转移的影响及其机制

目的 探讨circAPLP2对结直肠癌细胞SW480侵袭与转移的调控作用及其分子机制。方法 采用在线数据库Starbase预测circAPLP2与miR-497-5p的结合位点,TargetScan预测miR-497-5p与FGFR1的结合位点。采用qRT-PCR检测LoVo、DLD1、SW480、SW620、Caco-2、HCoEpiC细胞中circAPLP2、miR-497-5p的相对表达水平,Westernblotting检测FGFR1蛋白的相对表达水平。取SW480细胞,设置：(1)siNC组(转染siControl)与sicircAPLP2组(转染sicircAPLP2),采用qRT-PCR检测circAPLP2、miR-497-5p、FGFR1 mRNA的相对表达水平,Western blotting检测FGFR1蛋白的表达;(2)Vector组(转染对照空载质粒)与circAPLP2组(转染circAPLP2过表达质粒),采用qRT-PCR检测miR-497-5p、FGFR1mRNA的相对表达水平,Westernblotting检测FGFR1蛋白的相对表达水平;(3)si...     

miRNA-455-5p对人结肠癌HT-29细胞株PIK3R1基因靶向调控作用的研究

目的探讨miRNA-455-5p对人结肠癌HT-29细胞株磷脂酰肌醇三激酶调节亚单位α（PIK3R1）基因靶向调控的作用。方法培养HT-29细胞并用脂质体转染试剂进行转染,利用实时定量逆转录-聚合酶链反应、免疫印迹试验分别检测miRNA-455-5p上下调后PIK3R1及PI3K/AKT信号通路的PI3K下游效应分子（AKT1、MTOR）的基因及蛋白相对表达量。构建PIK3R1的3′非编码区（3′UTR）报告载体,利用双荧光素酶报告基因实验验证PIK3R1基因是否为miRNA-455-5p靶基因。结果与模拟剂对照组比较,上调miRNA-455-5p能抑制HT-29细胞中PIK3R1、AKT1、MTORmRNA及蛋白的表达（均P＜0.05）;与抑制剂对照组比较,抑制miRNA-455-5p能促进HT-29细胞中PIK3R1、AKT1、MTORmRNA及蛋白的表达（均P＜0.05）。双荧光素酶报告基因实验可获得测序验证正确的PIK3R1的3′UTR报告载体。hsa-miRNA-455-5p与psicheck3-gluc-_PIK3R1-3′UTR-WT_-fluc共转染293细胞48h后检测得到的分泌型荧光素酶/非分泌型荧光素酶（Gluc/Fluc）值较mimics-N与psicheck3-gluc-_PIK3R1-3′UTR-WT_-fluc共转染48h后得到的值明显降低（P＜0.05）。结论miRNA-455-5p对人结肠癌HT-29细胞株PIK3R1基因存在负向调控作用,PIK3R1基因是miRNA-455-5p调控的靶基因。     

花青苷联合氟尿嘧啶抑制体外胃癌细胞SGC-7901增殖

花青苷也称花色素,为植物主要显色物质,有较强的抗氧化活性,近年来又发现其抗肿瘤作用,正成为国内外研究热点[1].杨梅为中国特产水果,其果实富含花青苷,其中矢车菊素-3-葡萄糖苷(cyanidin-3 -glucopyranoside,C3G)为主要成分.本实验旨在明确C3G同氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)在胃癌细胞中联合应用的相互作用.     

花青苷联合氟尿嘧啶拮抗性抑制体外胃癌细胞SGC-7901增殖

花青苷也称花色素,为植物主要显色物质,有较强的抗氧化活性,近年来又发现其抗肿瘤作用,正成为国内外研究热点[1]。杨梅为中国特产水果,其果实富含花青苷,其中矢车菊素-3-葡萄糖苷(cyanidin-3-glucopyranoside,C3G)为主要成分。本实验旨在明确C3G同氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)在胃癌细胞中联合应用的相互作用。