lncRNA 178030.2通过TRPS1对三阴性乳腺癌细胞紫杉醇耐药的影响与机制研究

目的:探讨lncRNA 178030.2通过TRPS1对三阴性乳腺癌细胞紫杉醇耐药的影响与机制。方法:采用逐步增加剂量间歇作用的方法诱导三阴性乳腺癌紫杉醇耐药细胞系并命名为MDA-MB-231/R。采用定量PCR和Western blot检测耐药细胞和亲本细胞中lncRNA 178030.2和TRPS1的表达；应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2高表达质粒pcmv-178030.2和对照质粒pcmv转染至MDA-MB-231细胞，分别为高表达组和对照组，定量PCR检测lncRNA 178030.2水平的变化，分别用定量PCR和Western blot检测TRPS1 mRNA及蛋白水平的变化；RIP实验检测lncRNA 178030.2是否与TRPS1相结合；MTT法检测MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2小干扰RNA si178030.2和对照siNC转染至MDA-MB-231/R细胞，分别为干扰组和对照组，定量PCR检测lncRNA 178030.2水平的变化，分别用定量PCR和Western blot检测TRPS1 mRNA及蛋白水平的变化；MTT法检测MDA-MB-231/R细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000将TRPS1过表达质粒pcmv-TRPS1和对照质粒pcmv转染至MDA-MB-231细胞，分别为高表达组和对照组，分别用定量PCR和Western blot检测两组细胞中TRPS1 mRNA及蛋白水平的表达情况，然后再分别应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2高表达质粒pcmv-178030.2转染入两组细胞，MTT法检测MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。结果:成功构建在3 μg/ml紫杉醇中稳定生长的三阴性乳腺癌耐药细胞系MDA-MB-231/R。定量PCR结果显示:lncRNA 178030.2在紫杉醇耐药细胞系MDA-MB-231/R中的表达明显高于在其亲本细胞MDA-MB-231中的表达；定量PCR和Western blot显示:TRPS1 mRNA和蛋白在紫杉醇耐药细胞系MDA-MB-231/R中的表达明显低于在其亲本细胞系MDA-MB-231中的表达；与对照组相比，高表达lncRNA 178030.2组的MDA-MB-231细胞中TRPS1表达下降，细胞对紫杉醇的敏感性降低，细胞增殖增强，且lncRNA 178030.2确实可以与TRPS1相结合；与对照组相比，低表达lncRNA 178030.2组的MDA-MB-231/R细胞中TRPS1表达升高，细胞对紫杉醇的敏感性升高，细胞增殖减弱；在MDA-MB-231细胞中过表达TRPS1后再过表达lncRNA 178030.2，其促进紫杉醇耐药、促进细胞增殖的作用也明显减弱。结论:lncRNA 178030.2促进三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的紫杉醇耐药，促进细胞增殖，其发生机制可能与下调TRPS1的表达有关。     

CTEN通过TGF-β1促进非小细胞肺癌细胞紫杉醇耐药的作用及机制研究

目的:探讨CTEN通过TGF-β1促进非小细胞肺癌（NSCLC）细胞紫杉醇耐药的作用和分子机制。方法:采用逐步增加剂量间歇作用的方法诱导非小细胞肺癌紫杉醇耐药细胞系并命名为A549/R,采用定量PCR和Western blotting检测耐药细胞和亲本细胞中CTEN和TGF-β1 mRNA及蛋白的表达,应用Lipofectamine 2000分别将CTEN高表达质粒pcmv-CTEN及其对照质粒pcmv转染至非小细胞肺癌A549细胞,分别为高表达组和对照组,分别用定量PCR和Western blotting检测CTEN和TGF-β1 mRNA及蛋白水平的变化;MTT法检测A549细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000分别将CTEN干扰质粒siCTEN及其对照siNC转染至紫杉醇耐药细胞系A549/R细胞,分别为干扰组和对照组,分别用定量PCR和Western blotting检测CTEN和TGF-β1 mRNA及蛋白水平的变化;MTT法检测A549/R细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000分别将TGF-β1干扰质粒siTGF-β1及其对照质粒siNC转染至非小细胞肺癌A549细胞,分别为干扰组和对照组,分别检测两组细胞中TGF-β1 mRNA及蛋白水平的表达情况,然后再分别用Lipofectamine 2000将CTEN高表达质粒pcmv-CTEN转染入两组细胞,MTT法检测A549细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。结果:成功构建在5 μg/mL紫杉醇中稳定生长的非小细胞肺癌耐药细胞系A549/R。定量PCR和Western blotting显示,CTEN和TGF-β1 mRNA及蛋白在紫杉醇耐药细胞系A549/R中的表达明显高于在其亲本细胞系A549中的表达;与对照组相比,高表达CTEN组的A549细胞中TGF-β1表达上升,细胞对紫杉醇的敏感性降低,细胞增殖增强;与对照组相比,低表达CTEN组的A549/R细胞中TGF-β1表达降低,细胞对紫杉醇的敏感性升高,细胞增殖减弱;在A549细胞中低表达TGF-β1后再过表达CTEN,其促进紫杉醇耐药及细胞增殖的作用也明显减弱。结论:CTEN具有促进非小细胞肺癌A549的紫杉醇耐药,促进细胞增殖的作用,其发生机制可能与上调TGF-β1的表达有关。     

伊立替康联合顺铂治疗广泛期小细胞肺癌的临床观察

目的观察周剂量伊立替康联合顺铂一线治疗广泛期小细胞肺癌(SCLC)的疗效及不良反应。方法 42例经病理或细胞学诊断为广泛期SCLC患者接受伊立替康60mg/m2第1、8、15天,顺铂25mg/m2第1-3天,每28天为1个周期,治疗2个周期评价疗效,每周期评价不良反应。结果 42例入选患者均可评价疗效。获完全缓解(CR)3例,部分缓解(PR)34例,总有效率(CR+PR)为88.09%。所有患者中位疾病进展时间为225d,中位生存时间401d。主要不良反应为Ⅲ/Ⅳ度中性粒细胞下降(19例,45.2%),腹泻(7例,16.7%)和恶心、呕吐(13例,31.0%)等。结论周剂量伊立替康联合顺铂一线治疗广泛期SCLC安全、有效,可作为一线化疗方案的选择。     

益生饮药物血清对A549人肺癌细胞株体外生长的影响

目的观察益生饮药物血清对A549人肺癌细胞株体外生长的影响。方法以不同浓度的益生饮药物血清培养人肺癌细胞A549,用MTT技术体外观察不同浓度益生饮药物血清对人肺癌细胞生长的影响。结果各组抑瘤率分别为：大剂量组41．18％,中剂量组33．16％,小剂量组25．67％,3种剂量组间差异显著（P〈0．01）。抑瘤率以大剂量组最高,为41．18％。结论益生饮药物血清对肺癌A549细胞体外生长有较好的抑制作用。     

CTEN和E-cad在乳腺浸润性导管癌的表达及临床意义

目的研究CTEN蛋白和E-钙黏蛋白(E-cad)在乳腺浸润性导管癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化检测80例乳腺浸润性导管癌组织(A组)和25例癌旁乳腺组织(B组)中CTEN和E-cad蛋白的表达量,分析其与临床病理特征及预后的关系。结果 A组CTEN蛋白表达阳性率为68.75%,B组无CTEN蛋白表达;A组E-cad蛋白表达阳性率为58.75%,低于B组的92.00%(P<0.05)。A组CTEN和E-cad蛋白的表达与肿瘤大小、组织学分级、有无淋巴结转移、TNM分期和雌激素受体表达密切相关性(P<0.05);乳腺浸润性导管癌组织中CTEN和E-cad的表达呈负相关(r=-0.346,P<0.05);COX回归分析显示,CTEN表达水平可作为乳腺浸润性导管癌预后判断的独立因素(P<0.05)。结论 CTEN和E-cad蛋白可能在乳腺浸润性导管癌的发生和发展中起重要作用,检测CTEN表达对患者預后的判断具有一定的意义。     

原发性肝癌行TACE治疗后腹腔热灌注顺铂的观察及护理研究

采用Ｓｅｌｄｉｎｇｅｒｓ技术对原发性中、晚期肝癌 (ＰＨＣ)行肝动脉化疗 +栓塞术 (ＴＡＣＥ)治疗 ,经多年的临床实践已被证实 ,并为国内、外许多学者所接受 ,且ＴＡＣＥ疗效肯定。但术后的进一步治疗问题往往被忽视 ,导致很快复发 ,近期疗效可 ,远期疗效很差。我院在此基础上自 1 999年起引用ＴＡＣＥ后行腹腔热灌注顺铂 (ＣＨＰＰ) ,取得了满意的疗效。此类患者大多数全身代谢状况差 ,病情复杂 ,如何确保治疗成功 ,手术前后及ＣＨＰＰ后的特殊护理极其重要。1 临床资料一般资料　本组 2 7例 ,男 2 5例 ,女 2例 ,年龄 3 2～71岁 ,平均 (…     

慢性胰源性腹泻15例分析

15例中,男11例,女4例,年龄最大者64岁,最小者9岁,平均年龄41.2岁;腹泻时间最长者8年,最短者5月余,大便均为稀软便呈泡沫状,每天次数5～10次不等,量多少不一.大便镜检均有脂肪颗粒和不消化的肌纤维.12例有暴饮、暴食史,9例有长期饮酒史;14例有不规则上腹部疼痛发作史.最后确诊:慢性胰腺炎6例,胰腺假性囊肿2例,胰腺癌3例,胰腺切除术后2例,胰腺囊性纤维化1例(外院活检),胰腺结石1例.     

听宫穴位封闭疗法治疗三叉神经痛37例疗效观察

1 临床资料 37例均为门诊病人,男15例,女22例;年龄最小19岁,最大86岁,平均43.7岁。病程最短者4月余,最长者27年,3年以内者共29例。本组病例均有典型的三叉神经痛症状,疼痛呈烧灼样、刀割样或触电样,每次发作持续时间7～20min不等,经常反复发作,21例已予卡马西平口服,效果不佳。全组病例均排除了高血压、副鼻窦炎、脑外伤后遗症等。其中7例脑电图正常,9例头颅CT正常,1例经核磁共振确诊为三叉神经肿瘤。 治疗方法,先抽取2％利多卡因4ml,确炎舒松-A10mg,骨宁注射液2ml,VB_120.5mg(共8ml),再混匀。患者取平卧位,头偏向健侧,张口取听宫穴,局部碘酒、酒精消毒,铺洞巾,予9号注射针垂直刺入约3.5～4.0cm,待患者自诉有突然出现触电样感觉为佳(此时以第三支根部多见),如没有,则轻度转动针栓部,方能确准。再将针栓沿颈部平行下移0.5cm,再刺入0.5～0.8cm,有落空感后,随进入三叉神经半月节下极部,将上述药液注入4ml,后退0.5～0.8cm至原垂直穿刺位,注入3ml,最后边退边注1ml。每隔1周再封闭一次,共3次为1疗程。