体外骨髓基质干细胞中腺病毒介导的胶质细胞源性神经营养因子基因的表达及其生物学活性

背景：骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells，BMSCs)是外源性目的基因的良好靶细胞，在脊髓损伤的修复中具有良好的应用前景。目的：观察重组腺病毒介导的胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor，GDNF)基因在体外培养的骨髓基质干细胞中的表达，并探讨其生物学活性。设计：以细胞为研究对象，对照观察性研究。单位：一所大学医院骨科实验室。材料：实验于2004-03／06在华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科实验室完成、SD大鼠24只，雌雄不限，体质量(180&;#177;20)g。干预：用重组腺病毒载体Adv—GDNF感染体外培养的BMSCs．并与脊髓背根神经节共培养。免疫荧光化学的方法检测BMSCs中的GDNF的表达，提取细胞总RNA进行RT—PCR扩增GDNF基因．应用ELISA方法检测其培养上清中的GDNF含量，并通过与脊髓背根神经节共培养观测GDNF的活性。主要观察指标：主要结局：①RT-PCR。②免疫荧光结果。③GDNF的体外活性。次要结局：①BMSCs的培养与鉴定。②ELISA检测蛋白表达与时间的关系。结果：免疫荧光显示Adv-GDNF感染BMSCs 48h后即有GDNF的表达．体外培养的BMSCs经Adv-GDNF转染后有GDNF的转录．其培养上清应用ELISA方法分析．在感染24h岳即有GDNF的表达．并可持续5～7d的高峰Adv—GDNF感染的BMSCs的培养液上清可以促进脊髓背根神经节大量轴突的生长。结论：Adv—GDNF基因可以在BMSCs中稳定、高效表达．其表达的GDNF具有促进轴突生长的活性，为GDNF基冈治疗脊髓损伤的研究奠定了基础。     

肝脏局灶性结节性增生21例的诊断与治疗

目的探讨肝脏局灶性结节性增生（FNH）的临床诊断与治疗,以提高对FNH的认识。方法回顾性分析我院普通外科2004年7月至2011年7月期间收治的21例经术后病理证实为FNH的临床资料。结果本组21例FNH患者中男6例,女15例,平均年龄31.1岁。单发19例,多发2例。9例为体检发现,无不适症状;12例有右上腹隐痛不适症状,均无肝炎、肝硬变病史;1例女性患者有长期口服雌激素病史。化验检查：谷丙转氨酶轻度升高1例,其余肝功能检查、肿瘤标志物及HBsAg均为阴性。术前影像学检查诊断符合率：彩超检查为42.9%（6/14）,CT检查为50.0%（6/12）,MRI检查为38.5%（5/13）。术后均恢复良好,随访至今无复发。结论 FNH术前确诊率仍较低,主要依赖术后病理学检查。对于术前诊断不明确、病灶巨大或有临床症状者仍应采取手术切除治疗。     

浅议“脾主谏议之官”

＂脾主谏议之官＂与人体免疫监视有重要关系,这一命题具有坚实的理论基础和临床应用价值。临床中通过调理脾胃、健脾实脾以增强人体的免疫监视作用,可以预防疾病的发生。     

腺病毒介导的NT-3基因在骨髓间质干细胞中的表达

目的:研究腺病毒介导的NT-3基因在培养的大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)中的表达.方法:在293细胞中培养扩增NT-3重组腺病毒(adenovirus vector for NT-3,Ad-NT-3),测定病毒滴度,然后用Ad-NT-3感染传代培养的MSCs,RT-PCR技术检测NT-3基因的表达.结果:Ad-NT-3扩增后获得了较高滴度的病毒,MSCs经Ad-NT-3感染后有NT-3 mRNA的转录.结论:腺病毒介导的NT-3基因可转入培养的MSCs并高效表达,为NT-3基因治疗的研究奠定了基础.     

骨髓基质细胞与骨缺损的修复

目的综述骨髓基质细胞(marrow stromal cells，MSCs)与骨缺损修复的发展近况。方法广泛查阅近年来有关MSCs的生物学特性及其在骨缺损中的应用文献，并作综合分析。结果在适当条件下，MSCs可诱导为成骨细胞，在体内具有成骨性能。以MSCs为种子细胞的骨组织工程学方法和以其为靶细胞的基因治疗方法都可应用于骨缺损的修复。结论MSCs在骨缺损的修复中具有良好的应用前景。     

浅谈温病过程中痰的形成与辨治

浅谈温病过程中痰的形成与辨治张官启，谢有良，彭松林（河南省信阳市结核病防治所，４６４０００；河南中医学院，修武县人民医院）主题词温病／中医病机，痰（中医）／中医病机，痰（中医）／中医药疗法痰，是水液代谢障碍所形成的病理产物，同时又是一种致病因素。痰不...     

性别对二乙基亚硝胺诱发Wistar大鼠肝癌的影响

参照peraino方法用二乙基亚硝胺Diethylnisamine建立新生Wislar大鼠肝癌模型，同时对诱癌方法适当改进．通过对肝重、体重及肝／体比的分析，并采用病理组织学观察和六种酶组织化学染色比较了不同性别大鼠在癌前期病变、诱癌率等方面的差异．结果表明，本方法诱癌雌性大鼠较雄性犬鼠敏感性高，根据诱癌率、癌前期病变、两种性别大鼠及两组处理方法的比较，证实Wjstar大鼠性别对DEN致癌作用有一定的影响；其影响机制可能与大鼠机体的性激素水平有关．     

神经外科颅内感染危险因素的病例对照研究

目的回顾分析神经外科颅脑手术后发生颅内感染的危险因素，为临床预防和控制颅内感染提供依据。方法对2006年1-8月神经外科颅脑手术后38例发生颅内感染和68例未发生颅内感染病例的一般资料、基础疾病、主要诊断、手术情况、抗菌药物应用情况、侵入性操作、住院时间及手术人员等因素进行统计分析。结果单因素分析结果显示，两组病例在主要诊断、手术入路方式、入住重症监护室、手术持续时间、住院时间、留置导尿、H2受体阻滞剂（包括质子泵抑制剂）应用、手术人员等方面有统计学差异（均P＜0.05）；进一步通过多因素Logistic回归分析发现，手术持续时间和手术人员是颅脑手术后发生颅内感染的独立危险因素。结论颅脑手术后发生颅内感染与手术持续时间和手术人员的手术技巧及其无菌观念有关。     

c—FLIP、bcl—xS和caspase-3在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的：探讨c—FLIP、bcl—xS和caspase-3在乳腺癌发生发展中的意义。方法：采用RT—PCR技术检测57例浸润性乳腺癌组织和癌周组织中c—FLIP、bcl—xS和caspase-3表达及其与肿瘤临床特征之间的关系。结果：与癌周组织相比，乳腺癌组织中c—FLIP呈过表达，其阳性率及半定量测定均明显高于癌周组织；c—FLIP表达与肿瘤的组织分级之间有显著相关性，随组织分级增高表达升高。而bcl—xS和caspase-3低表达，其阳性率及半定量测定均明显低于癌周组织。随分级增高，bcl—xS表达下降，同时临床Ⅰ期乳腺癌bcl—xS的表达阳性率明显高于Ⅱ期、Ⅲ期乳腺癌。结论：c—FLIP过表达、bcl—xS和caspase-3低表达是促进乳腺癌发生发展的因素之一，有望作为判断和监测乳腺癌预后的指标。     

Effect of Electromagnetic Fields on Proliferation and Differentiation of Cultured Mouse Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells

Previous clinical observations and animal ex periments showed that EMFs could stimulate newbone formation of the fractures and increase thebone mineral density[1], but the manner in whichEMFs influence the behavior of bone remains poor ly understood. Recent studies[2] found that signaltransduction system plays an important role in thebiological effect of EMFs. Intracellular cAMP wasan important second messenger in signal transduc tion pathway. The cellular proliferation …