气血双补酊剂HPLC指纹图谱及含量测定

目的：采用HPLC-DAD方法,对气血双补酊剂进行指纹图谱分析和10种活性成分同时测定来进行质量控制。方法：通过优化提取、分离和分析条件,采用Merck C₁₈色谱柱,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液,波长203 nm。结果：通过分析10批样品指纹图谱,确立了32个共有峰作为特征峰来进行评价,10批样品相似度高,10种活性成分含量同时测定的结果稳定可靠。结论：该多成分含量测定的方法,结合色谱指纹图谱分析,具有实际应用,可以全面对气血双补酊剂进行质量进行控制。     

Aβ25-35对原代培养大鼠皮质神经元的损伤作用

目的 考察Aβ25-35对原代培养大鼠皮质神经元的损伤作用.方法 将原代培养的大鼠皮质神经元分为对照组、谷氨酸(glutamate,Glu)组及3个浓度的Aβ25-35组,每组各6孔.观察神经元的形态改变,并测定细胞存活率及培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活力值.结果 与对照组比较,Glu组可造成大鼠皮质神经元明显损伤,形态发生显著改变,细胞存活率为(53.1±5.5)%(P<0.01),并且培养液中LDH漏出显著增多,LDH的活力值为(39.9 4±2.9)U/g Prot (P<0.01);Aβ25-35三个剂量组神经元存活率均显著降低,分别为(69.3±5.9)%(P<0.01)、(52.7±3.0)%(P<0.01)和(33.2±1.8)%(P<0.01),Aβ25-35低、中剂量组培养液中LDH漏出未见明显改变,LDH活力值分别为(23.5±1.4)U/g Prot和(24.7±1.3)U/g Prot(P>0.05),Aβ25-35高剂量组培养液中LDH漏出显著升高,LDH活力值为(38.8±2.0)U/g Prot(P<0.01),与Glu组相当(P>0.05).结论 Aβ25-35能剂量依赖性地损伤皮质神经元,1 μmol/L Aβ25-35剂量组处理24 h后细胞存活率可降低50%左右,可用于Aβ25-35体外诱导阿尔茨海默病细胞模型的建立.     

Aβ（25-35）对原代培养大鼠皮质神经元的损伤作用

目的考察Aβ25-35对原代培养大鼠皮质神经元的损伤作用。方法将原代培养的大鼠皮质神经元分为对照组、谷氨酸（glutamate,Glu）组及3个浓度的Aβ25-35组,每组各6孔。观察神经元的形态改变,并测定细胞存活率及培养液中乳酸脱氢酶（LDH）的活力值。结果与对照组比较,Glu组可造成大鼠皮质神经元明显损伤,形态发生显著改变,细胞存活率为（53.1±5.5）%（P〈0.01）,并且培养液中LDH漏出显著增多,LDH的活力值为（39.9±2.9）U/gProt（P〈0.01）;Aβ25-35三个剂量组神经元存活率均显著降低,分别为（69.3±5.9）%（P〈0.01）、（52.7±3.0）%（P〈0.01）和（33.2±1.8）%（P〈0.01）,Aβ25-35低、中剂量组培养液中LDH漏出未见明显改变,LDH活力值分别为（23.5±1.4）U/gProt和（24.7±1.3）U/gProt（P〉0.05）,Aβ25-35高剂量组培养液中LDH漏出显著升高,LDH活力值为（38.8±2.0）U/gProt（P〈0.01）,与Glu组相当（P〉0.05）。结论 Aβ25-35能剂量依赖性地损伤皮质神经元,1μmol/LAβ25-35剂量组处理24h后细胞存活率可降低50%左右,可用于Aβ25-35体外诱导阿尔茨海默病细胞模型的建立。     

国产盐酸托莫西汀胶囊在健康人体的生物等效性

目的：建立人血浆中托莫西汀浓度的 HPLC-MS/ MS 测定方法,研究国产盐酸托莫西汀胶囊在中国健康男性志愿者的主要药动学参数及与参比制剂的生物等效性。方法采用两试剂双周期交叉试验设计,24名健康受试者分别单剂量口服受试制剂和参比制剂20mg,采用 LC-MS/ MS 法测定血浆中托莫西汀的浓度,DAS 2.1.1软件计算药动学参数并考察生物等效性。结果受试制剂和参比制剂在受试者体内的药动学参数如下：Cmax 分别为（232.5±86.9）和（222.8±101.1）ng/ ml;tmax 分别为（1.17±1.14）和（1.27±1.09）h;t1/2分别为（3.55±1.33）和（3.38±1.2）h;AUC0- t分别为（1610±1329）和（1575±1301）ng·ml -1·h -1;AUC0-∞分别为（1683±1466）和（1634±1392）ng·ml -1·h -1;受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为（104.9±14.3）%。结论两制剂具有生物等效性。     

基于分子对接方法的木犀草素和罗汉松脂素与p38α激酶的分子作用机制研究

摘要：目的:研究络石藤中化合物木犀草素和罗汉松脂素与p38α之间的分子相互作用机制。方法:以p38α激酶抑制剂SB-203580、BIRB-796为阳性对照化合物,利用分子对接技术研究木犀草素和罗汉松脂素与p38α激酶在三维空间上的相互作用。结果:所有化合物均以非共价键方式与靶酶活性位点结合,形成生氢键、疏水等相互作用。SB-203580与p38α激酶的对接结合能为-9.0 kcal·mol-1,BIRB-796的对接能量为-11.0 kcal·mol-1,木犀草素对接能量-8.8 kcal·mol-1,罗汉松脂素对接能量为-8.2 kcal·mol-1,木犀草素、罗汉松脂素与p38α激酶活性位点处的结合强度与SB-203580相近,两者可竞争性阻碍该靶酶活性位点与腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）的结合从而抑制该靶酶上调炎症因子水平的生物学活性。结论:木犀草素和罗汉松脂素应该是络石藤中抗风湿作用的活性代表成分,从分子间相互作用层面证实两者可抑制p38α激酶生物学活性从而起到抗炎作用,也给新型p38α激酶抑制剂的研发提供参考。     

孕酮对Aβ_(25-35)诱导的阿尔采末病模型神经元凋亡的影响

目的研究神经甾体孕酮(PROG)对Aβ25-35诱导的AD模型神经元凋亡的影响。方法将原代培养的大鼠皮质神经元分为对照组、模型组及3个浓度PROG处理组。采用四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞存活率,Hoechest 33342核染色法检测神经元凋亡,Western blot检测胞质caspase-3蛋白表达水平。结果与模型组比较,PROG能剂量依赖地对抗Aβ25-35引起的大鼠神经元存活率的降低;且细胞凋亡率及胞质caspase-3表达水平均降低,细胞凋亡率分别为(53.0±4.2)%(P>0.05)、(31.8±2.1)%(P<0.01)和(11.8±1.2)%(P<0.01),caspase-3表达水平分别为(5.80±0.27)(P>0.05)、(4.98±0.48)(P<0.01)和(3.58±0.21)(P<0.01);其中0.1μmol.L-1 PROG处理组的细胞凋亡率及胞质caspase-3表达水平均与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PROG能通过抑制神经元凋亡对抗Aβ诱导的神经元损伤,产生保护作用。     

孕酮及别孕烯醇酮对Aβ_(25-35)诱导的神经元损伤作用的影响

目的:研究孕酮及别孕烯醇酮对Aβ25-35诱导的神经元损伤作用的影响。方法:采用Aβ25-35(1μmol.L-1)处理原代培养的大鼠大脑皮质神经元建立损伤模型,另分别加入不同浓度孕酮及别孕烯醇酮与Aβ25-35共孵育24h,观察神经元的形态学变化并测定存活率(MTT法)。结果:与模型组比较,孕酮共孵育组神经元生存状况明显改善,神经元存活率浓度依赖性地升高(r=0.757,P<0.01),高剂量组的存活率为(100.7±7.9)%,与对照组比较无统计学差异(P>0.05);别孕烯醇酮共孵育组神经元生存状况与模型组比较无明显改善,神经元存活率呈浓度依赖性降低(r=-0.841,P<0.01)。结论:神经甾体孕酮能浓度依赖性地抑制Aβ25-35诱导的神经毒性作用,提高细胞存活率;孕酮的代谢物别孕烯醇酮不能对抗Aβ25-35引起的神经元损伤,并浓度依赖性地加重上述损伤任用。