白花败酱草抗氧化成分研究

目的研究白花败酱草Patrinia villosa的化学成分及其抗氧化活性。方法利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱法进行分离,应用半制备高效液相色谱进行进一步的分离纯化,通过核磁共振技术等波谱数据鉴定化合物结构。采用DPPH法和ABTS法评价各化合物的体外抗氧化活性。结果从白花败酱草70%乙醇提物中分离得到10个化合物,分别为绿原酸丁酯(1)、3,4-O-双咖啡酰奎尼酸甲酯(2)、木犀草素-7-O-芸香苷(3)、1β-O-β-D-glucopyranosy-15-O-(p-hydroxylphenylacetate)-5α,6βH-eudesma-3,11(13)-dien-12,6α-olide(4)、3,4-O-双咖啡酰奎尼酸乙酯(5)、4,5-O-双咖啡酰奎尼酸甲酯(6)、4,5-O-双咖啡酰奎尼酸正丁酯(7)、木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷甲酯(8)、木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷乙酯(9)、芹菜素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷甲酯(10)。化合物3、8、9的清除DPPH自由基IC50分别为(23.95±0.71)、(73.09±0.33)、(25.06±0.65)μmol/L,其清除ABTS自由基IC50分别为(7.13±0.07)、(11.48±0.21)、(5.15±0.08)μmol/L。结论除化合物3、8外,其余化合物均为首次从白花败酱草中分离得到。化合物3、8、9具有明确的体外抗氧化活性。     

果蝇硒蛋白D-SelK原核表达及多克隆抗体制备

目的:克隆编码果蝇硒蛋白D-SelK结构基因并在大肠杆菌中表达,纯化后制备兔抗D-SelK的抗体。方法:利用PCR从pGM-T-D-SelK质粒中扩增D-SelK基因,构建重组表达质粒pGEX-6p-1-D-SelK,以重组质粒转化E.coli BL21(DE3),筛选阳性重组菌株,IPTG诱导目的蛋白表达,通过变性、电泳纯化D-SelK蛋白,SDS-PAGE和Westem blot方法鉴定目的蛋白的表达;以表达的D-SelK蛋白免疫家兔,制备抗D-SelK的多克隆抗体并进行效价及特异性鉴定。结果:扩增了D-SelK基因,克隆于表达载体pGEX-6p-1中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确。经诱导在大肠杆菌中表达出目的蛋白,纯化后免疫家兔,能有效地刺激特异性抗体的产生,抗血清的效价达到1∶51 200以上,且具有良好的特异性。结论:已成功构建D-SelK基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达;制备出兔抗D-SelK抗体,效价及特异性均良好,这为进一步研究功能特异性的D-SelK提供了有效的手段。     

莲子心化学成分研究

目的研究莲Nelumbo nucifera Gaertn.的成熟种子中间绿色胚根(莲子心)的化学成分。方法利用ODS、Sephadex LH-20、聚酰胺柱色谱及半制备高效液相色谱等方法分离纯化;通过NMR、MS等波谱方法鉴定其结构。结果从莲子心的乙醇提取物中分离得到8个化合物,分别鉴定为莲心碱(Liensinine,1)、异莲心碱(Isoliensinine,2)、甲基莲心碱(Neferine,3)、荷叶碱(Nuciferine、4)、去甲乌药碱(Higenamine,5)、3个黄酮类:芦丁(Rutin,6)、金丝桃苷(Hyperoside,7)、木樨草素-β-D-葡萄糖苷(Luteolin-β-D-glycoside,8)。结论化合物8为首次从莲属植物中分离得到。     

超声波催化TiO2系列催化剂对大肠杆菌的杀菌作用

目的探讨超声波催化TiO2系列催化剂的杀菌效果.方法将普通TiO2、纳米TiO2和WO3掺杂纳米TiO2催化剂分别加入大肠杆菌菌液(菌体密度106 cfu/ml)中,采用25 kHz 50 W超声波照射催化75 min,并观察了照射时间、菌液酸度、TiO2催化剂的粒径和用量对杀菌效果的影响.结果当催化剂浓度为1.0 mg/ml,pH=3.0,超声波照射时间60 min时,杀菌率接近100%.超声波照射75 min时杀菌效果排序为WO3掺杂纳米TiO2＞纳米TiO2＞普通TiO2.结论TiO2系列催化剂在超声波的照射下对大肠杆菌有明显的杀灭作用.