正交设计法优选六月青多糖胶囊提取工艺

[摘要] 目的：优选六月青多糖胶囊提取工艺的最佳条件。方法：选用L9(34)正交试验设计方法,分别对水煎煮及醇沉两个步骤进行优选,以多糖含量为水煎煮工艺评价指标;采用苯酚-浓硫酸法测定总多糖含量,以多糖含量和收率为醇沉工艺综合评价指标,确定最佳提取工艺参数。结果：六月青多糖胶囊最佳提取工艺为生药材加10倍量水,每次煎煮2 h,煎煮3次。水提液过滤、合并、浓缩至含生药0.5 g•mL-1,7倍量95%乙醇沉淀12 h,沉淀1次。结论：优选出的工艺条件,经验证其结果稳定、合理,可作为六月青多糖胶囊的最佳提取工艺。     

正交设计法优选六月青多糖胶囊提取及醇沉工艺

目的:优选六月青多糖胶囊提取、醇沉工艺条件。方法:以多糖含量为指标,采用正交试验考察料液比、煎煮次数及煎煮时间对六月青多糖胶囊提取工艺的影响;以多糖含量及多糖收率为综合评价指标,选取醇沉时间、醇沉次数、加醇量及醇沉浓度为考察因素,通过正交试验优选醇沉工艺;采用苯酚-浓硫酸法测定总多糖含量。结果:六月青多糖胶囊最佳提取工艺为加10倍量水煎煮3次,每次煎煮2 h。最佳醇沉条件为水提液过滤后浓缩至0.5 g.mL-1,加7倍量95%乙醇沉淀12h,沉淀1次。醇沉后多糖纯度达71.05%,收率6.83%。结论:优选的提取及醇沉工艺条件稳定合理,可为六月青多糖胶囊的生产提供实验依据。     

玉郎伞多糖抗鸭乙型肝炎病毒及保护肝细胞作用

目的: 观察玉郎伞多糖(YLSP) 在鸭乙型肝炎病毒(DHBV)持续性感染模型中对鸭血清乙型肝炎病毒DNA的抑制作用及保护肝细胞的作用。 方法: 将DHBV-DNA强阳性麻鸭随机分为YLSP高、中、低剂量组(10,5,2.5 g·kg^-1)、拉米夫定(3TC,0.05 g·kg^-1) 组和模型组,以上各组每日上午灌胃给药 l 次,连续 14 d。于用药前(T₀) 、用药7 d (T₇)和14 d (T₁₄)及停药后3 d (P₃)取静脉血用实时荧光定量PCR检测DHBV-DNA含量,同时采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定上清液鸭乙型肝炎病毒表面抗原(DHBsAg)和e抗原(DHBeAg)的滴度;在停药3 d后,取肝脏匀浆,检测肝匀浆液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的含量。 结果: 与模型组相比,YLSP高、中剂量治疗组给药7 d (T₇)和14 d (T₁₄)即能明显抑制DHBV-DNA复制及血清DHBsAg,DHBeAg的滴度显著降低(P<0.05或P<0.01),停药后3 d (P₃),YLSP高剂量组仍能显示出持续有效,血清DHBV-DNA水平及血清DHBsAg,DHBeAg的滴度均无反跳现象 (P<0.05或P<0.01);在停药3d后,肝匀浆液中SOD,GSH-Px活性以及MDA,GSH的含量,YLSP高、中剂量组仍能显示出持续有效,没有出现反跳现象(P<0.05或P<0.01)。 结论: YLSP具有有效抑制DHBV-DNA和保护肝细胞的作用。     

六月青皂苷对四氯化碳诱导大鼠肝损伤的影响

目的:研究六月青皂苷(LYQS)对四氯化碳诱导大鼠肝损伤的保护作用。方法:66只SD大鼠,分为两组,正常组(10只)和造模组(56只),造模组大鼠,采用50%CCl4花生油溶液1 mL·kg-1,ig造模,每周2次,连续6周,正常组用生理盐水代替。随机抽取造模组6只大鼠进行肝脏病理检查,确认肝损伤形成后,将50只SD大鼠随机分为:模型组、秋水仙碱组、LYQS低、中、高剂量组。ig六月青皂苷20,40,80 mg·kg-1,秋水仙碱0.2 mg·kg-1,正常组及模型组给予等量生理盐水,每天ig给药1次,连续ig 30 d。末次给药24 h后取材,检测大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的含量。同时Western blot法测定肝组织中环加氧酶2(COX-2)的表达,并观察肝组织病理学变化。结果:与模型组ALT,AST,TNF-α,IL-6依次为(91.62±4.84)U.L-1,(98.56±9.37)U.L-1,(135.64±5.38)ng·L-1,(147.38±6.34)ng·L-1比较,六月青皂苷低、中、高给药组均有效降低模型大鼠血清中ALT(80.94±4.68),(69.51±4.07),(65.89±3.85)U.L-1,AST(90.87±8.76),(81.53±6.62),(73.64±5.71)U.L-1,TNF-α(98.57±3.09),(81.74±4.33),(65.93±3.20)ng·L-1,IL-6(115.78±4.81),(95.83±5.34),(74.29±4.76)ng·L-1水平(P<0.05);治疗后,与模型组(1.18±0.17)比较,六月青皂苷低、中、高给药组的肝组织中COX-2蛋白水平(0.91±0.03),(0.79±0.06),(0.67±0.04)均有所降低(P<0.05),并缓解肝损伤病情。结论:六月青皂苷对CCl4诱导的大鼠肝损伤具有一定保护作用,其机制可能与其抗炎作用有关。