补肾疏肝方对人肺癌A549细胞及其相关干性因子的影响

目的:探讨补肾疏肝方对人肺癌A549细胞及其相关干性因子的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为6组,每组10只,分别为补肾疏肝方低、高剂量组(15,30 g·kg-1),顺铂组(8 g·kg-1),低剂量联合顺铂组(联合低剂量组),高剂量联合顺铂组(联合高剂量组),正常组,顺铂组ip给予相应药物,补肾疏肝方ig给予相应药物,正常组给予等体积的生理盐水,制备大鼠含药血清;分别配制10%含补肾疏肝方低、高剂量、顺铂、低剂量联合顺铂、高剂量联合顺铂,分别与肺癌A549细胞共同培养,CCK8法检测补肾疏肝方含药血清对A549增殖的影响;流式细胞术检测含药血清对A549细胞周期的影响;Annexin V/PI双染流式细胞术观察含药血清对A549细胞凋亡的影响;荧光定量PCR检测含药血清对相关m RNA表达的影响;流式细胞术检测含药血清对CD133蛋白表达的影响。结果:补肾疏肝方以时间、剂量依赖方式抑制A549细胞增殖,与顺铂联合有协同增效作用,24,48,72 h高剂量联合顺铂组的抑制率分别为45.39%,54.76%及59.94%;与正常组比较,补肾疏肝方、联合、顺铂含药血清可促进A549细胞凋亡,随着浓度增加,G2/M期细胞的百分比明显增加,明显下调CD133,SOX-2,OCT-4 m RNA的表达,明显降低CD133蛋白表达量,均具有明显统计学差异(P0.05,P0.01)。结论:补肾疏肝方可抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡,与顺铂联合可下调CD133,SOX-2,OCT-4等干性因子的表达。     

补肾疏肝方对肺腺癌A549细胞的凋亡作用及其机制研究

目的 探讨补肾疏肝方对肺腺癌A549细胞的凋亡作用,对肿瘤坏死因子（TNF）-α分泌、Survivin及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-3 mRNA表达的影响。方法 将补肾疏肝方制成低剂量（1.25 g/ml）、中剂量（2.50 g/ml）和高剂量（3.75 g/ml）药液。以随机数字表法将大鼠分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、顺铂（DDP）组、联合组（中剂量药液联合DDP）,每组10只。对照组于第1～5天给予0.9%氯化钠溶液4 ml/d灌胃;低剂量组、中剂量组、高剂量组于第1～5天给予相应剂量药液4 ml/d灌胃;DDP组分别于第1、3、5天腹腔注射2 ml DDP（20%）;联合组于第1～5天给予中剂量灌胃药液灌胃4 ml/d及第1、3、5天腹腔注射2 ml DDP（20%）。末次给药2 h后采血,分离血清。A549细胞分别加入各组血清,培养72 h,倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡情况。A549细胞分别加入各组血清,培养24、48、72 h后,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测TNF-α水平。A549细胞与各组血清共培养72 h后,采用荧光定量PCR检测Survivin mRNA、Caspase-3 mRNA的相对表达量。结果 各组血清作用于A549细胞72 h后,凋亡细胞核固缩,且随药液浓度增加凋亡细胞增多。各组血清作用于A549细胞24、48、72 h后TNF-α分泌水平比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。其中,低剂量组、中剂量组、高剂量组、DDP组和联合组作用于A549细胞24、48、72 h后TNF-α分泌水平高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。各组血清作用于A549细胞72 h后Survivin mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义（F=13.238,P＜0.05）。其中,高剂量组、DDP组和联合组血清作用于A549细胞72 h后Survivin mRNA相对表达量低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。各组血清作用于A549细胞72 h后Caspase-3 mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义（F=10.814,P＜0.05）。其中,中剂量组、高剂量组、DDP组和联合组血清作用于A549细胞72 h后Caspase-3 mRNA相对表达量高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 补肾疏肝方可促进肺腺癌A549细胞凋亡,其机制可能与抑制Survivin基因表达、促进TNF-α分泌和Caspase-3基因表达有关。     

生物免疫疗法联合放化疗治疗局限期小细胞肺癌的随机对照研究

目的 探讨自体多种细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）生物免疫疗法联合放化疗治疗局限期小细胞肺癌（SCLC）的临床疗效。方法 选取2007年1月-2010年2月于郑州大学第一附属医院收治的局限期SCLC患者60例为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组各30例。对照组采用同期放化疗方案,观察组采取与对照组相同的放化疗方案,放化疗结束后采用自体多种细胞因子诱导的CIK生物免疫疗法。评价患者近期疗效、生活质量改善情况、1年和2年生存概率及毒副作用发生情况。结果 对照组完全缓解（CR）0例、部分缓解（PR）15例、稳定（SD）1例、进展（PD）14例,观察组CR 2例、PR 19例、SD 3例、PD 6例,两组近期疗效不同（u=2.058,P＜0.05）;观察组疾病控制率为80.0%（24/30）,高于对照组的53.3%（16/30）（χ2=4.800,P=0.028）。两组患者生活质量改善程度不同（u=-4.138,P＜0.01）。观察组白细胞计数（WBC）减少发生率为50.0%（15/30）,低于对照组的80.0%（24/30）（χ2=5.934,P＜0.05）。对照组、观察组1年生存概率分别为76.7%（23/30）、83.3%（25/30）,2年生存概率分别为73.9%（17/23）、88.0%（22/25）,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 生物免疫疗法联合放化疗能有效提高局限期SCLC患者疾病控制率,改善生活质量,降低部分毒副作用的发生。