雷公藤多苷对结肠炎小鼠结肠上皮细胞周期及Fas/Fas L表达的影响

目的 考察雷公藤多苷对结肠炎小鼠结肠Fas/FasL表达及细胞周期的干预作用.方法 三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法复制溃疡性结肠炎动物模型,雷公藤多苷灌肠或灌胃给药10 d后,采用流式细胞术观察结肠上皮细胞周期及Fas/FasL表达.结果 灌胃组小鼠结肠上皮细胞处于G0/G1期细胞数量明显下降,S期细胞数量明显增加(P＜0.05或P＜0.01),作用趋势上优于灌肠组.同时,两组小鼠结肠粘膜上皮表达Fas水平明显下降(P＜0.05或P＜0.01),而FasL水平显著性升高(P＜0.05).结论 雷公藤多苷可能通过干预结肠上皮细胞Fas/FasL表达及细胞周期而治疗实验性结肠炎.     

四神丸不同途径给药对溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞周期及脂质过氧化损伤的改善作用

目的:观察四神丸不同途径给药抗脂质过氧化损伤治疗实验性结肠炎的疗效。方法:采用三硝基苯磺酸/乙醇复合法复制大鼠结肠炎模型,观察各大鼠体质量、结肠湿重、结肠重量指数、肉眼下结肠形态变化,光镜下病理变化及病理损伤评分,同时采用化学比色法检测髓过氧化物酶(MPO)活性,硫代巴比妥酸比色法(TBA),显色法检测丙二醛(MDA)活性,DTNB直接法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及流式细胞术检测结肠上皮细胞周期变化。结果:四神丸灌肠组可明显降低结肠炎大鼠结肠湿重、结肠重量指数、病理损伤评分,MPO活性、MDA含量及G0-G1期细胞数(P<0.05或P<0.01),而灌胃组则可降低结肠黏膜G0-G1期细胞数及MPO活性、MDA含量(P<0.05或P<0.01),其它则仅有下降趋势,但可显著性升高SOD水平(P<0.05)。灌胃与灌肠组间比较未见明显差异。各治疗组镜下均可见溃疡缩小、炎细胞浸润减少等修复表现。结论:四神丸可有效缓解实验性结肠炎结肠黏膜损伤,其可能的途径是抑制脂质氧化损伤,降低MPO活性和MDA含量,提高SOD水平,促进结肠上皮细胞修复,且灌肠给药略优于灌胃给药。     

雷公藤甲素叶酸-壳聚糖纳米粒的制备及其释药性能考察

目的:制备具有靶向性的雷公藤甲素叶酸-壳聚糖纳米粒,并考察其体外释药性能。方法:以粒径和PDI为指标,采用单因素试验和正交试验法,考察溶液pH值、反应温度、壳聚糖和多聚磷酸钠的比例及质量浓度对壳聚糖纳米粒的制备工艺的影响;通过雷公藤甲素与壳聚糖的偶联比及雷公藤甲素、叶酸活性酯和壳聚糖上的氨基反应确定最佳制备工艺,采用离子交联法制备雷公藤甲素叶酸-壳聚糖纳米粒。采用HPLC考察其体外释药特性。结果:最佳制备工艺为反应温度25℃,溶液pH 3.5,壳聚糖-多聚磷酸3∶1,壳聚糖与多聚磷酸钠的质量分数均为0.3%,制得的纳米粒平均粒径约170 nm,粒子分散指数(PDI)约0.21。载药纳米粒的释放率于4 h后达平衡,最大释药率约68%。结论:按优选工艺制备的雷公藤甲素叶酸-壳聚糖纳米粒质量稳定可靠,优选的工艺简便易行。     

崔学教教授治疗2型糖尿病型阳痿的方药规律研究

目的探讨崔学教教授治疗2型糖尿病型阳痿的临床经验。方法选取2016年1月1日至2018年12月31日崔学教教授在广州中医药大学第一附属医院门诊收治的214例符合纳入标准的2型糖尿病型阳痿患者病案资料作为研究对象。应用数据挖掘技术分别从中医证候、药物药性、药物归经、药物频次、关联规则以及复杂系统熵聚类等方面对筛选符合标准的处方进行回顾性分析。结果各个年龄组证候表现出特异性分布,实证和虚证所占比例相当;四气属性分析发现,药物以温补为主;五味属性频次分析发现,药物以辛、甘为主。归经则以心、肝、脾、肾经为主;淫羊藿、肉苁蓉出现的频次最多;层次聚类分析,得出核心用药组合6个。结论崔学教教授治疗2型糖尿病型阳痿以温、补药为主,佐以辛甘化阳之品,取得较好临床疗效。并且根据数据挖掘进行方药规律研究,可以较好地总结名老中医的学术经验。     

四神丸对实验性结肠炎结肠组织Bax/Bcl-2 mRNA, Fas/FasL的调控作用

目的:评价四神丸灌肠给药治疗实验性结肠炎疗效的同时,探讨其对结肠炎结肠黏膜Fas/FasL,Bax/Bcl-2 mRNA的调控作用.方法:三硝基苯磺酸(trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)/乙醇法复制实验性结肠炎,实验动物随机分成正常组、模型组、四神丸高、中、低剂量组(10,5,2.5 g· kg-1)及柳氮磺吡啶(salicylazosulfapyridine,SASP,30 mg·kg-1)组,灌肠给药10d后,通过体重、结肠湿重、结肠质量指数、病理损伤评分及形态学分析评价其疗效,同时分别采用流式细胞术和RT-PCT技术检测大鼠结肠组织Fas/FasL水平和Bax/Bcl-2 mRNA表达.结果:与模型组比较,四神丸中剂量组可明显降低结肠湿重及结肠指数(P＜0.05),且3个剂量组均可明显降低病理损伤评分(P＜0.05),同时典型治疗组病理切片分析可见上皮修复,黏膜下纤维结缔组织增生,溃疡浅而小,少量淋巴滤泡增生和炎细胞浸润,而且3个剂量组均可显著降低Fas在结肠黏膜表达(P＜0.05),升高Bcl-2/Bax(P ＜0.05).结论:四神丸灌肠给药有效治疗溃疡性结肠炎的作用机制之一可能是通过调控结肠组织Fas/FasL,Bax/Bcl-2 mRNA表达,延缓结肠上皮细胞凋亡或促进炎细胞凋亡实现的.     

四神丸对溃疡性结肠炎小鼠外周血CD40,CD40L的调节作用

目的评价四神丸治疗小鼠结肠炎的疗效并探讨其对外周血CD40/CD40L的调节作用。方法昆明种小鼠60只,TNBS/乙醇法复制溃疡性结肠炎动物模型,随机分成正常组、四神丸高、中、低剂量组,柳氮磺吡啶(SASP)对照组,给药10d,观察小鼠结肠重量指数、病理变化及病理损伤评分以评价四神丸疗效,同时采用流式细胞术法检测结肠炎小鼠外周血CD40/CD40L的表达情况。结果模型组小鼠结肠重量指数明显高于正常组,并具有统计学意义(P<0.05),同时,各治疗小鼠结肠重量指数明显降低(P<0.05或P<0.01),而且模型组小鼠结肠病理损伤评分明显高于正常组(P<0.01),同时除高剂量组外,各治疗组小鼠结肠病理损伤评分明显低于模型组,且均有显著性统计学意义(P<0.05或P<0.01),治疗组镜下可见黏膜上皮完整或少量受损,炎细胞散在性分布,淋巴滤泡增生,基底层可见纤维结缔组织增生,溃疡修复。在CD40/CD40L表达方面,与正常组比较,模型组小鼠外周血细胞CD40分子表达明显偏高(P<0.05),而CD40L分子表达明显偏低(P<0.01),并具有统计学意义。各治疗组可见CD40分子表达较模型组明显降低(P<0.05或P<0.01),而CD40L分子表达则明显偏高并具有统计学意义(P<0.01)。结论四神丸可有效缓解结肠炎小鼠结肠损伤其作用途径可能与调节外周血CD40/CD40L信号有关。     

T-SPOT TB联合IL-10、IL-27对结核性胸膜炎的诊断价值

目的 评价T-SPOT TB联合IL-10、IL-27检测对结核性胸膜炎的诊断价值。方法 纳入结核性胸膜炎患者42例和恶性胸腔积液患者44例,抽取患者胸腔积液进行T-SPOT TB检测,并用ELISA法检测IL-10和IL-27的表达水平。结果 结核性胸膜炎组患者中T-SPOT TB阳性39例,阴性3例,阳性率92.86%;恶性胸腔积液组患者中T-SPOT TB阳性2例,阴性42例,阳性率4.55%。与后者相比,结核性胸膜炎组患者T-SPOT TB检测阳性率较高,且二者差异有统计学意义(P<0.01)。结核性胸膜炎患者胸腔积液IL-10(142.86±33.12)和IL-27(418.20±63.4)表达水平,显著高于恶性胸腔积液组IL-10(96.18±13.41)和IL-27(127.33±32.86),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 T-SPOT TB联合测定IL-10、IL-27表达水平在结核性胸膜炎的诊断和鉴别诊断中具有重要价值。     

雷公藤多苷对结肠炎小鼠外周血CD40/CD40L表达的影响

目的:观察雷公藤多苷对结肠炎小鼠外周血CD40/CD40L表达的影响。方法:小鼠随机分成正常组、模型组、雷公藤多苷灌肠、灌胃组及柳氮磺吡啶组,除正常组外,其它动物予TNBS/乙醇法复制溃疡性结肠炎动物模型,雷公藤多苷灌肠、灌胃组均给予20mg/kg,柳氮磺吡啶60mg/kg,正常组及模型对照组均予等容量生理盐水灌肠。通过观察小鼠体重、结肠湿重、结肠重量指数及病理变化和病理损伤评分评价雷公藤多苷治疗小鼠结肠炎的疗效,同时采用流式细胞术检测其外周血CD40/CD40L表达,酶联免疫法检测结肠组织匀浆IL-1β和IL-4水平。结果:与模型组比较,20mg/kg雷公藤多苷灌肠、灌胃组小鼠结肠湿重和结肠重量指数结肠病理损伤评分明显低于模型组,且均有显著性统计学意义(P<0.05或P<0.01)。而且治疗组形态学可见黏膜上皮完整或少量受损,炎细胞散在性分布,基底层可见少量纤维结缔组织增生,溃疡修复。灌肠、灌胃及柳氮磺吡啶组则明显降低外周血CD40,升高CD40L表达(P<0.01),同时降低结肠组织匀浆中IL-1β表达、和升高IL-4表达水平(P<0.05或P<0.01),但灌胃、灌肠组间比较未见明显差异。结论:雷公藤多苷可能通过调节CD40/CD40L表达水平,抑制促炎因子表达,升高抗炎因子水平而有效缓解溃疡性结肠炎结肠粘膜损伤。     

四申丸对溃疡性结肠炎小鼠外周血CD40,CD40L的调节作用

目的 评价四神丸治疗小鼠结肠炎的疗效并探讨其对外周血CD40/CD40L的调节作用.方法 昆明种小鼠60只,TNBS/乙醇法复制溃疡性结肠炎动物模型,随机分成正常组、四神丸高、中、低剂量组,柳氮磺吡啶(SASP)对照组,给药10d,观察小鼠结肠重量指数、病理变化及病理损伤评分以评价四神丸疗效,同时采用流式细胞术法检测结肠炎小鼠外周血CD40/CD40L的表达情况.结果 模型组小鼠结肠重量指数明显高于正常组,并具有统计学意义(P＜0.05),同时,各治疗小鼠结肠重量指数明显降低(P 0.05或P＜0.01),而且模型组小鼠结肠病理损伤评分明显高于正常组(P＜0.01),同时除高剂量组外,各治疗组小鼠结肠病理损伤评分明显低于模型组,且均有显著性统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),治疗组镜下可见黏膜上皮完整或少量受损,炎细胞散在性分布,淋巴滤泡增生,基底层可见纤维结缔组织增生,溃疡修复.在CD40/CD40L表达方面,与正常组比较,模型组小鼠外周血细胞CD40分子表达明显偏高(P＜0.05),而CD40L分子表达明显偏低(P＜0.01),并具有统计学意义.各治疗组可见CD40分子表达较模型组明显降低(P＜0.05或P＜0.01),而CD40L分子表达则明显偏高并具有统计学意义(P＜0.01).结论 四神丸可有效缓解结肠炎小鼠结肠损伤其作用途径可能与调节外周血CD40/CD40L信号有关.     

雷公藤甲素叶酸-壳聚糖纳米粒的制备和释药性能

目的：为提高雷公藤甲素临床抗肿瘤的应用,制备具有靶向性的雷公藤甲素叶酸-壳聚糖纳米粒,考察其性质和体外释药性能。方法：采用单因素和正交设计方法,依据壳聚糖和多聚磷酸钠的比例、浓度、pH值、温度等四方面考察纳米粒的制备,并通过雷公藤甲素与壳聚糖的偶联比及雷公藤甲素、叶酸活性酯和壳聚糖上的氨基反应等的优化最佳工艺,采用离子交联法制备雷公藤甲素叶酸-壳聚糖纳米粒,应用高效液相法考察其体外释药特性。结果：通过优化获得平均粒径约170nm,粒子分散指数(PDI)约0.21的雷公藤甲素叶酸-壳聚糖纳米粒,体外释放实验表明载药纳米粒释放速率8h后达到平衡。结论：以单因素和正交设计方法优化制备雷公藤甲素叶酸-壳聚糖纳米粒,方法简便,质量可靠、稳定。