不同加工方法对贯叶连翘中黄酮类成分的影响

目的:研究不同加工方法对贯叶连翘中5种主要黄酮类成分的影响及变化规律,以寻找适宜的干燥方法和条件。方法:贯叶连翘全草洗净泥土,分别经4、-20、-80℃储存48 h后阴干,直接阴干和晒干方法进行加工后,剪切后得到5组样本。采用超高液相色谱(UPLC-PDA)测定贯叶连翘中5种主要的黄酮类成分含量。将5种不同加工方法处理样品的数据标准化处理,以主成分分析法(PCA)综合评价贯叶连翘经不同加工方法处理后其中的黄酮类成分的含量变化规律,并对不同加工方法进行多元比较。结果:经UPLC分析,贯叶连翘5种黄酮类化合物均可在10 min内出峰,且在各自的线性范围内线性关系良好(r0.999 1),检出限范围为0.020~0.107μg·mL~(-1),定量限范围为0.133~0.667μg·m L-1,平均加样回收率为95.05%~102.47%,相对标准偏差(RSD)值为0.13%~1.99%。PCA结果显示,不同处理方法对贯叶连翘成分含量影响综合评分依次为:晒干-80℃-20℃阴干4℃。结论:建立的UPLC方法快捷、灵敏、准确,适用于5种主要黄酮类成分的同时测定。PCA结果说明,不同加工方法对贯叶连翘中黄酮类活性成分有一定影响,综合主要成分的变化规律,选择-20℃冷冻48 h后晾干作为优化的加工方法。     

秦七风湿方HPLC指纹图谱研究

目的建立秦七风湿方的HPLC指纹图谱,为其质量评价及药效物质基础研究提供依据。方法采用Inert Sustain C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);以0.1%磷酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱;检测波长为203 nm;柱温为30℃;体积流量为1 m L/min;测定10批秦七风湿方样品,利用中药色谱相似度评价系统(2004A版)建立秦七风湿方HPLC指纹图谱,并通过对照品对共有峰进行指认。结果建立了秦七风湿方HPLC指纹图谱,10批样品的相似度均在0.99以上,共标定19个共有峰,8个峰来源于珠子参,8个峰来源于秦艽,5个峰来源于山茱萸(其中1号峰为珠子参、秦艽和山茱萸共有),并通过与对照品比较指认了其中8个色谱峰,分别为马钱苷酸(2号峰)、莫诺苷(3号峰)、龙胆苦苷(5号峰)、马钱苷(6号峰)、人参皂苷Ro(12号峰)、人参皂苷F1(13号峰)、竹节参皂苷IVa(14号峰)、人参皂苷F2(17号峰)。结论所建立的方法稳定、准确、重复性好,可为秦七风湿方的质量控制及药效物质基础研究提供依据。     

贯叶连翘不同部位黄酮类成分差异与抗炎活性相关性分析

目的超高效液相色谱(UPLC)法结合模式识别方法分析贯叶连翘不同生长部位成分和抗炎活性的差异,建立同时定量测定贯叶连翘5个不同生长部位中6种黄酮类活性成分的方法。方法采用ACQUITY UPLC?BEH C18(50 mm×2.1mm,1.7μm)色谱柱,0.2%甲酸-水-乙腈作为梯度洗脱系统。采集贯叶连翘花、果、叶、茎、根5个不同部位样品的色谱信息,对积分数据进行中心化、归一化等预处理,采用偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)及PLS-tree聚类分析方法,以NO活性的半数抑制浓度(IC50)作为抗炎活性的监督因子,评价贯叶连翘不同部位在黄酮成分、抗炎活性方面的相似性和差异性。结果方法学验证结果显示,5种化合物线性关系良好,r0.999,精密度、重复性和稳定性良好,平均加样回收率为97.28%~102.84%。根据不同部位的黄酮类成分含量和抗炎活性PLS分析情况,显示贯叶连翘不同部位的质量为叶花茎果根。结论说明贯叶连翘采收部位应以地面上茎干部分开始采收为宜。     

五味子水提工艺优化及液质联用测定方法研究

目的:以Plackett-Burman-Central Composite Design(PB-CCD)设计为基础,通过分析五味子的LC-MS/MS液质联用仪测出的谱图优选五味子的水提工艺。方法:以五味子醇甲及五味子酯甲的含量为指标,以浸泡时间、液固比、溶剂PH值、提取时间、提取次数、提取温度及浓缩温度为考察因素,采用PB-CCD优选水提工艺条件并进行含量测定分析。结果:选定最佳提取工艺为浸泡时间2 h,提取时间1 h,提取温度70℃,提取次数5次,溶剂pH值5.0,浓缩温度60℃。结论:PB-CCD优选五味子提取工艺方法简单,可为五味子的提取生产工艺提供参考。     

4种中药微细粉体显微特征及细胞破壁率的测定

目的:测定丹参、黄芩、苦参和秦艽4种常用中药微细粉体的细胞破壁率,比较其与常规细粉的显微特征差异。方法:采用细胞计数法,以木栓细胞、薄壁细胞作为计数指标,考察微细粉体技术对4种中药细胞破壁率的影响;同时采用显微观察法比较常规细粉与微粉体的细胞结构及后含物形态变化。结果:4种中药微细粉体的细胞破壁均在95%以上,且细胞多已破碎,偶见完整细胞和导管等碎片。结论:微细粉体技术对丹参、黄芩、苦参、秦艽4种中药具有良好的细胞破壁效果。     

GC分析不同干燥方法对麝香中麝香酮含量的影响

目的:研究不同干燥方法对麝香中麝香酮含量的影响,为确定麝香较优的干燥方法,提高麝香品质提供实验依据。方法:采用干燥器干燥、减压干燥、40℃烘箱干燥对麝香样品进行处理;采用气相色谱法测定麝香酮含量。结果:不同干燥方法处理麝香药材均能达到2015年版《中华人民共和国药典》对麝香酮含量的要求,采用干燥器干燥麝香酮含量最高;减压干燥与烘箱烘干麝香酮含量差别不大,随着时间的增加,麝香酮含量有所降低。结论:不同干燥方法对麝香中麝香酮含量有影响,干燥器干燥为最佳干燥方法。