补肾活血方调节在位内膜蛋白质表达 治疗子宫内膜异位症不孕机制研究

目的: 比较观察子宫内膜异位症(endometriosis,Ems)相关不孕患者与正常育龄期妇女在位子宫内膜的蛋白质表达差异及中药补肾活血方对其调节作用。方法: 提取正常育龄期妇女、EMs不孕患者服用补肾活血方治疗3个月前后的分泌中期子宫内膜各4例,利用差速离心和密度梯度离心方法来提取纯化内膜蛋白质,采用荧光差异凝胶电泳(2D-DIGE)标记、分离蛋白质,Decyder差异分析软件进行分析、识别差异表达蛋白质,并应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)得到相应差异蛋白的肽质量指纹图谱,然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果: 分析得到35个差异蛋白点,质谱鉴定出28种差异蛋白。结论: 分析预测Ems不孕发生的5种可能机制,涉及10种蛋白;补肾活血方作用于26种蛋白从4种可能机制修复Ems不孕患者在位内膜缺陷。     

范冠杰运用“三仁汤”治疗湿温病的临床辨治思路

总结范冠杰教授运用“三仁汤”治疗湿温病的临床经验。范冠杰教授在运用“三仁汤”辨治湿温病时,提出分析核心病机以确定核心证素,灵活遣方用药、动态因“候”辨治的临床辨治思路。“三仁汤”治疗湿温病的核心病机是“太阴脾虚,湿热蕴结,外感湿热邪气”,其对应的核心证素为“口干不欲多饮,纳食不多,头重如裹,昏蒙眩晕,脘腹胀满,身体困重,大便黏腻不爽,舌苔白腻或黄腻”。临证时若疾病存在湿热邪实内蕴的核心证素,均可灵活使用“三仁汤”,只要动态辨别“湿”与“热”的孰轻孰重,做到因“候”施药,则可提高临床疗效。     

肾虚胚胎着床障碍小鼠病证结合模型的建立与评价

目的复制肾虚胚胎着床障碍小鼠病证结合模型并对其进行评价。方法应用羟基脲、米非司酮造模,选择L9(34)表安排实验,根据羟基脲及米非司酮不同剂量配比组合及对照组共10组,检测各组模型的超氧化物歧化酶(SOD)、雌二醇(E2)、孕激素(PRG)及体质量等指标,并观察小鼠精神状态、行为、大小便、毛发色泽、反应情况等肾虚症状。结果研究范围内,当羟基脲取一水平、米非司酮取一水平时,妊娠第5天时血清中SOD、E2、PRG均是最少的,妊娠第8天时血清中E2及PRG是最少的。随着药物的代谢和怀孕动物自身机制调节,羟基脲和米非司酮各自对怀孕动物血清中雌二醇水平、孕激素的抑制力大为减弱。在肾虚胚胎着床障碍小鼠模型的复制中,羟基脲的贡献度最大,米非司酮的贡献度次之,一定程度上,SOD、E2、PRG与羟基脲和米非司酮的用量成反比。结论综合多项指标,在研究范围内,AⅠBⅠ较为合适作为肾虚胚胎着床障碍小鼠病证结合模型,既能反应胚胎着床障碍西医病的特点,又能反映中医肾虚证候特征。     

莪术醇通过上调miR-214抑制TGF-β诱导的RL-95细胞生长及纤维化相关蛋白表达

目的:探讨莪术醇对转化生长因子β(TGF-β)诱导的子宫内膜癌RL-95细胞生长及纤维化相关蛋白表达的影响,并探讨其机制是否与调控微小RNA-214(miR-214)表达有关。方法:以TGF-β诱导RL-95细胞纤维化作为子宫内膜异位症细胞模型。设置对照(control)组、TGF-β组、TGF-β+低剂量莪术醇组、TGF-β+中剂量莪术醇组、TGF-β+高剂量莪术醇组、TGF-β+高剂量莪术醇+anti-miR-NC组和TGF-β+高剂量莪术醇+anti-miR-214组。运用CCK-8法、流式细胞术、RT-qPCR和Western blot检测细胞活力、细胞周期分布、miR-214表达以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(Col I)蛋白表达。结果:与control组比较,TGF-β组RL-95细胞活力、S期细胞比例及α-SMA和Col I蛋白表达显著升高,G₀-G₁期细胞比例和miR-214表达显著降低(P<0.05)。与TGF-β组比较,TGF-β+中剂量莪术醇组和TGF-β+高剂量莪术醇组RL-95细胞活力、S期细胞比例及α-SMA和Col I蛋白表达显著降低,G₀-G₁期细胞比例和miR-214表达显著升高(P<0.05)。与TGF-β+高剂量莪术醇+anti-miR-NC组比较,TGF-β+高剂量莪术醇+anti-miR-214组RL-95细胞活力、S期细胞比例及α-SMA和Col I蛋白表达显著升高,G₀-G₁期细胞比例显著降低(P<0.05)。结论:莪术醇通过上调miR-214表达抑制TGF-β诱导的RL-95细胞生长和纤维化相关蛋白表达,进而对子宫内膜异位症纤维化具有潜在治疗作用。     

梅花针与西药治疗卵泡发育不良的比较研究

目的:观察梅花针治疗卵泡发育不良的临床疗效.方法:将50例卵泡发育不良的患者随机分为梅花针组和药物组,每组25例.梅花针组在卵泡生长期采用梅花针循经叩刺任、督、带脉,以及脾俞、胃俞、肾俞和卵巢、子宫穴,隔日治疗1次;药物组采用口服氯米芬(CC)及肌内注射人绒膜促性腺激素(HCG)进行治疗,每天1次.两组均以1个月经周期为一疗程,治疗2个疗程后,比较两组的卵泡发育情况、子宫内膜厚度及形态变化、卵巢动脉血流阻力指数(RI)和搏动指数(PI)、排卵率和妊娠率.结果:治疗后,两组患者最大卵泡平均直径均有所增加,且梅花针组子宫内膜形态及厚度改变优于药物组(均P＜0.05).成熟卵泡期梅花针组卵巢动脉血流阻力指数、搏动指数均低于药物组(均P＜0.05).两组治疗后的排卵率和妊娠率差异无统计学意义(均P＞0.05).结论:梅花针治疗卵泡发育不良能增强患者的卵巢血流灌注,促进卵泡生长发育,提高成熟卵泡排卵率,疗效优于西药,并能避免西药治疗中卵泡生长与子宫内膜生长不同步的缺点.     

莪术醇通过调控巨噬细胞功能治疗小鼠子宫内膜异位症的机制研究

目的探究莪术醇治疗小鼠子宫内膜异位症的效果和作用机制。方法通过腹腔移植法构建小鼠子宫内膜异位症模型,随机分成模型组和治疗组各6只,正常小鼠作为对照组(6只)。分别灌胃给相应药物,每天1次。每天监测小鼠状态,并测量体重。4周后,观察腹腔粘连情况,异位病灶体积,腹腔灌洗液中IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1含量。流式细胞术检测CD36、MMP9、CD206、IkB-α、NF-κB、p65的表达水平。结果莪术醇、减轻腹腔粘连情况、减少异位病灶的体积(P 0.001)。莪术醇下调炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1的分泌水平(P 0.01),上调CD36和MMP9的表达(P 0.01),减少CD206的表达(P 0.001)。莪术醇导致IkB-α表达量显著升高(P 0.001),p65表达量受到抑制(P 0.01)。结论莪术醇缓解子宫内膜异位症的病程,可能是通过抑制NF-κB的活化来调控巨噬细胞功能。