延胡索乙素对乳鼠海马神经元缺氧缺糖损伤保护作用的研究

目的:探讨延胡索乙素对乳鼠海马神经元细胞因缺糖缺氧所致损伤的保护作用。方法:建立乳鼠海马神经元细胞缺糖缺氧损伤模型。利用CCK法和预实验确定加药浓度后,将培养的细胞随机分成6组:正常组、模型组、延胡索乙素低、中、高治疗组(2、4、8μg/mL)和阳性药物对照组尼莫地平(8μg/mL)。观察延胡索乙素对乳鼠海马神经元乳酸脱氢酶(LDH)的释放量,细胞一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)含量,一氧化氮合酶(NOS)、超氧化歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的影响;采用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率。结果:与模型组相比,延胡索乙素中、高剂量组均能显著增加细胞内SOD以及GSH-PX的活性(P0.01);能够显著减少细胞内LDH外漏以及抑制NOS的活性(P0.01);能够显著减少细胞内NO以及MDA的生成量(P0.01)。结论:延胡索乙素对乳鼠海马神经元细胞的缺糖缺氧损伤显示出良好的保护作用,其机制可能与抗氧化、抑制细胞凋亡有关。     

miR-30a-5p在人乳腺癌MCF-7细胞对他莫昔芬耐药性中的作用研究

目的 探究miR-30a-5p在人乳腺癌MCF-7细胞对他莫昔芬(tamoxifen,TAM)耐药性中的作用,并阐明相关作用机制。方法 通过短时间高浓度TAM刺激MCF-7细胞诱导耐药株,MTT法检测细胞耐药性的改变;qRT-PCR法检测MCF-7细胞及其耐药细胞株MCF-7/TAM中miR-30a-5p的表达情况;吖啶橙染色及Western blotting检测MCF-7/TAM细胞相对于MCF-7细胞自噬的变化;转染miR-30a-5p模拟物后,采用MTT法检测MCF-7/TAM细胞对TAM敏感性的变化,并通过吖啶橙染色和Western blotting观察miR-30a-5p对MCF-7/TAM细胞自噬的影响;采用生物信息学方法对miR-30a-5p进行靶基因预测,荧光素酶报告基因试验验证miR-30a-5p对ATG5的靶向调控作用;Western blotting检测miR-30a-5p对ATG5表达的影响。结果 TAM对MCF-7/TAM细胞的抑制作用明显弱于对MCF-7细胞;miR-30a-5p在MCF-7/TAM细胞中的表达水平明显低于在MCF-7细胞中;相对于MCF-7细胞,MCF-7/TAM细胞的自噬水平明显升高;过表达miR-30a-5p后,MCF-7/TAM细胞对TAM敏感性显著增加,自噬水平显著降低;Targetscan软件分析表明ATG5是miR-30a-5p的下游靶基因,通过荧光素酶报告基因试验进一步证明miR-30a-5p靶向调控ATG5;MCF-7/TAM细胞中上调miR-30a-5p能够抑制ATG5的表达。结论 miR-30a-5p靶向调控ATG5,并能够抑制细胞的自噬,进而增强乳腺癌细胞对TAM的敏感性。     

藤梨根化学成分及其体外抗肿瘤转移活性

目的研究藤梨根Actinidia chinensis Planch的化学成分及其体外抗肿瘤转移活性。方法藤梨根95%乙醇提取物采用硅胶、Toyopearl HW?40、制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。通过划痕实验和Transwell实验来评价其体外抗肿瘤转移活性。结果从中分离得到8个化合物,分别鉴定为β?谷甾醇(1)、3?氧代?12?烯?28?乌苏酸(2)、乌苏酸(3)、2α,3α,24?三羟基乌苏烷?12?烯?28酸(4)、2α,3α,23?三羟基乌苏烷?12?烯?28酸(5)、2α,3β?二羟基齐墩果烷?12?烯?28酸(6)、2α,3β,23,24?四羟基乌苏烷?12?烯?28酸(7)、胡萝卜苷(8)。化合物7能明显抑制肿瘤细胞转移,并呈一定剂量依赖性。结论化合物2、7为首次从该植物中分离得到,化合物7具有较强的体外抗肿瘤转移活性。