RORα miRNA转染对DADS抑制胶质瘤U251细胞增殖的影响

背景与目的:维甲酸相关孤核受体α(retinoid acid receptor related orphan receptor α,ROR α)可能参与肿瘤的调控.本实验室前期研究发现,二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)可抑制人胶质瘤U251细胞增殖,其抑制增殖作用可能与诱导ROR α蛋白表达上调有关.为了明确ROR α在DADS抑制人胶质瘤细胞增殖中的作用,本研究采用miRNA干扰技术抑制ROR α表达,观察其对DADS抑制U251细胞增殖的影响.方法:首先将ROR α miRNA转染人胶质瘤U251细胞,运用Western blot检测转染前后ROR α蛋白表达情况.实验分为未转染组、脂质体转染组和ROR α miRNA转染组及分别经30 mg/L DADS处理后的3组,共6组.MTT法检测ROR α表达下调对DADS抑制胶质瘤U251细胞增殖的影响.结果:Western b1ot结果显示,转染ROR α miRNA细胞的ROR α蛋白表达(0.09±0.05)明显低于未转染组(0.81±0.11)和脂质体转染组(0.89±0.15),其蛋白表达下调了89.5%(P＜0.05).MTT结果显示,U251细胞增殖活性在RORα miRNA转染后48hA570值为(0.98±0.15),高于未转染组(0.47±0.11)和脂质体转染组(0.45±0.10)(P＜0.05),其增殖率高达108.5%.并且ROR α miRNA转染削弱了DADS对U251细胞的增殖抑制作用,转染ROR α miRNA细胞加入DADS后的细胞增殖率(A570值为0.69±0.20)明显高于DADS处理的未转染组(0.28±0.13)和脂质体转染组(0.25±0.12)(P＜0.05),其抑制率由40.4%下降为29.6%.结论:miRNA干扰ROR α表达可促进U251细胞增殖,并且削弱了DADS对U251细胞的增殖抑制作用,说明ROR α参与了DADS抗胶质瘤U251细胞增殖的作用.     

浙麦冬不同生长周期及不同采收期研究

目的：研究浙麦冬适宜种植生长周期和采收时期。方法：通过考察浙麦冬地上部农艺性状、地下部丛块根数、丛块根重和有效成分总皂苷含量等指标,确定适宜的生长周期和采收期。结果与结论：从单位面积块根产量和年单位面积效益综合考虑,浙麦冬以栽培三周年较为适宜;考虑浙麦冬块根产量和总皂苷含量情况,浙麦冬以5月中旬至6月上旬采收为适宜,比川麦冬采收期晚2个月。     

cofilin1在胃癌组织中表达的临床病理意义

目的检测胃癌组织中cofilin1蛋白的表达水平,探讨cofilin1蛋白在胃癌发生、发展中的作用。方法应用组织芯片与免疫组织化学SP法检测cofilin1在正常胃黏膜、上皮内瘤变和胃癌组织中的表达。结果cofilin1在正常组织、上皮内瘤变与胃癌中表达呈递增趋势（P<0.05）;弥漫型胃癌cofilin1阳性率显著高于肠型胃癌（P<0.05）。胃癌中瘤直径≤3.0 cm的cofilin1的表达明显低于＞3.0 cm的表达（P<0.05）。淋巴结转移组表达明显高于未转移组（P<0.05）。TNM分期Ⅲ、Ⅳ期表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期（P<0.05）。cofilin1表达与患者性别差异无统计学意义（P>0.05）。结论cofilin1与胃癌肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、临床分期密切相关,且与胃癌进展及预后密切相关,可能是胃癌侵袭转移的重要生物标志。     

Chk1/2基因沉默对人胃癌MGC803细胞增殖及周期的影响

目的:观察Chk1/2基因沉默对人胃癌MGC803细胞增殖及周期的影响.方法:采用RNAi技术在MGC803细胞中分别将Chk1和Chk2基因沉默,运用蛋白质印变法验证,然后采用MTT实验、流式细胞术分析Chk1和Chk2基因沉默对人胃癌MGC803细胞增殖及周期的影响.结果:蛋白质印迹法结果显示,转染靶向Chk1和Chk2 siRNA 24 h的Chk1、Chk2蛋白相对灰度值分别为0.09±0.04和0.12±0.01,明显弱于未转染对照组(0.39±0.09)和脂质体转染组(0.38±0.17),P均<0.05,而未转染对照组和脂质体转染组之间比较差异无统计学意义,P=0.458.转染Chk1、Chk2 siRNA的MGC803细胞Chk1和Chk2蛋白表达分别下降85.0%和83.4%.MTT实验证明,Chk1蛋白表达缺失导致MGC803细胞增殖活性下降,其增殖抑制率为38.0%(t=26.797,P<0.05);Chk2蛋白表达缺失对细胞增殖无明显抑制作用(t=6.098,P>0.05).Chk1基因沉默后细胞周期在G0/G1期发生停滞,但并不引发凋亡,而Chk2基因沉默后对细胞周期影响不明显.结论:Chk1基因沉默可明显抑制人胃癌细胞增殖,且其抑制增殖作用与诱导G0/G1期阻滞有关.     

HPV感染在尖锐湿疣及外阴和宫颈上皮内瘤变病变中的分布

目的探讨HPV感染在尖锐湿疣和上皮内瘤变(包括外阴和宫颈)病变中的分布情况。方法通过HPV基因分型检测对330例尖锐湿疣和250例上皮内瘤变病变进行了HPV6、11、42等低危型及16、18、31、33、39、45、52、56、58等高危型DNA检测。结果 330例的尖锐湿疣组织中:274例为HPV6/11型(83.0%),46例为HPV16/18型(13.9%);250例上皮内瘤变病变组织中,8例为HPV6/11型(3.2%),167例为HPV16/18型(66.8%)。结论尖锐湿疣感染的HPV类型以HPV6、11为主,上皮内瘤变病变HPV类型以HPV16、18为主。     

浙麦冬规范化种植技术标准操作规程（SOP）

目的：规范浙麦冬药材生产整个过程,使其具有可操作性;保证浙麦冬药材质量的安全性、稳定性、有效性及可控性。方法通过建立浙麦冬规范化种植基地,运用科学试验结果进行培训示范,推广浙麦冬的标准化种植。结果浙麦冬长势良好,生产各个环节可控,浙麦冬药材质量安全、有效。结论浙麦冬规范化种植标准操作规程可操作性强,示范效应好,带动药农规范化种植浙麦冬,增加了经济收益。     

HIF-1α、VEGF-C及D2-40在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的探讨甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）HIF-1α、VEGF-C、D2-40表达及其相关性与临床病理意义。方法应用免疫组化SP法检测62例PTC组织中HIF-1α、VEGF-C、D2-40的表达,计数淋巴管密度（lymphatic vessel density,LVD）,结合临床资料进行分析。结果 PTC组织内存在HIF-1α、VEGF-C的表达,与癌旁组织及腺瘤比较有显著性差异（P〈0.05）,淋巴结转移组表达率高于无淋巴结转移组,高分期组（Ⅲ期/Ⅳ期）瘤内HIF-1α、VEGF-C较低分期组（Ⅰ期/Ⅱ期）为高,两组比较有统计学差异（P〈0.05）。HIF-1α表达与VEGF-C表达呈正相关（r=0.555,P〈0.05）。PTC瘤周LVD较瘤内为高;瘤周LVD与临床病理特征有关,高分期组（Ⅲ期/Ⅳ期）的瘤周LVD较低分期组（Ⅰ期/Ⅱ期）为高,淋巴结转移组较无转移组为高,两组比较有统计学差异（P〈0.05）。HIF-1α、VEGF-C表达与LVD成正相关（P〈0.05）。结论 HIF-1α、VEGF-C在PTC癌组织中表达上调,二者表达呈正相关,与LVD也呈正相关,其异常表达参与了PTC的发生、发展,联合检测上述指标可能为甲状腺癌诊断、治疗、预后判断提供有力的临床指导。     

MMP13的表达及其与原发性甲状腺癌的关系

目的 从mRNA和蛋白水平检测原发性甲状腺癌中基质金属蛋白酶13(MMP13)基因的表达及其与病变的关系.方法 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、蛋白印迹(Western blotting)和免疫组织化学技术检测62对配对甲状腺癌组织和癌旁正常组织中MMP13的表达情况.结果 ①PT-PCP显示,62例甲状腺癌组织中MMP13mRNA的表达水平高于癌旁正常组织(P＜0.05).②Western blotting检测结果显示,MMP13在甲状腺未分化癌与分化型癌组织中的表达率高于其相对应的癌旁正常组织(P＜0.05).③免疫组织化学检测结果显示,62例甲状腺癌患者中的MMP-13总阳性率大于正常组织(P＜0.05);未分化癌患者中的MMP13表达阳性率高于分化型癌,差异有显著性(P＜0.05).淋巴结转移阳性组的癌组织中MMP13的阳性表达率高于淋巴结转移阴性组(P＜0.05).TNM分期中,高分期组(Ⅲ、Ⅳ期)的癌组织中MMP13的阳性表达率较低分期组(Ⅰ、Ⅱ期)高,组间差异有显著性(P ＜0.05).不同性别和年龄患者的MMP13阳性表达率差异无显著性(P＞0.05).结论 MMP13与甲状腺癌的组织类型和淋巴结转移密切相关,且与甲状腺癌进展密切相关,其可作为甲状腺癌病理改变参考因子和诊断的参考指标.     

肝细胞肝癌伴发肝内胆管癌1例

患者男性,42岁。发现HBsAg阳性13年,间断上腹部疼痛5月余。查体:体重无明显变化,血压150/110 mmHg。皮肤巩膜无黄染,腹壁未见静脉曲张,全腹无压痛、未扪及包块,肝脾肋下未触及。余脏器未见异常。腹部B超示肝硬     

二烯丙基二硫对人胃癌SGC7901细胞Aurora-A、Aurora-B表达的影响

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)对人胃癌SGC7901细胞中Aurora-A、Aurora-B表达的影响。方法体外培养SGC7901细胞,采用RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学分析DADS 对SGC7901细胞中Aurora-A、Aurora-B表达的影响。结果RT-PCR显示用15 mg/L DADS处理SGC7901细胞24、48 h后,Aurora-A、Aurora-B mRNA表达明显下调(P<0.05);Western blot显示用15 mg/L DADS处理SGC7901细胞24、48 h后,Aurora-A、Aurora-B蛋白表达水平呈时间依赖性下降(P<0.05);免疫细胞化学显示用15 mg/L DADS处理SGC7901细胞24、48 h后,Aurora-A和Aurora-B蛋白表达明显降低。结论DADS可从基因和蛋白水平抑制SGC7901细胞Aurora-A、Aurora-B的表达。