缺氧条件下白花丹醌对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡与侵袭及HIF-1α表达的影响

目的 研究白花丹醌在缺氧条件下对人肝癌细胞HepG2增殖、凋亡、侵袭和低氧诱导因子1α(hypoxia induced factor1α，HIF-1α)及其下游基因表达的影响。方法 采用二氯化钴(CoCl₂)化学诱导法建立HepG2细胞体外缺氧模型，经不同浓度(2，4，8 μmol·L^–1)白花丹醌处理24 h后，MTT、平板克隆形成试验观察HepG2细胞增殖水平变化；使用Annexin V/PI双染流式细胞术检测HepG2细胞凋亡情况；使用Transwell试验观察HepG2细胞侵袭能力的变化；使用qRT-PCR检测HepG2细胞内HIF-1A mRNA转录水平变化；使用Western blotting检测细胞内HIF-1α及其下游基因c-Myc、VEGFA、MMP9和TWIST1的蛋白表达水平。结果 当CoCl₂处理浓度为150 μmol·L^–1时，HepG2细胞增殖水平未见显著变化，而HIF-1α蛋白表达水平显著升高(P<0.01)，提示体外缺氧模型建立成功。与常氧对照组相比，MTT、平板克隆形成试验结果显示不同浓度白花丹醌作用HepG2细胞后，其增殖水平受到显著抑制(P<0.05或P<0.01)； Transwell试验结果显示白花丹醌可显著抑制HepG2细胞侵袭(P<0.05或P<0.01)；流式细胞术结果表明白花丹醌能显著诱导HepG2细胞凋亡(P<0.05或P<0.01)；Western blotting及qRT-PCR检测结果显示，白花丹醌能显著下调HIF-1α蛋白及HIF-1A mRNA表达水平(P<0.05或P<0.01)。Western blotting检测结果显示HIF-1α及其下游基因c-Myc、VEGFA、MMP9和TWIST1的蛋白表达水平均显著下调(P<0.05或P<0.01)。结论 CoCl₂体外模拟肝癌HepG2细胞缺氧的适宜浓度为150 μmol·L^–1；在缺氧条件下，白花丹醌可显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖与侵袭，同时诱导细胞凋亡，其作用机制可能与下调HIF-1α蛋白及其下游靶基因蛋白表达有关。     

大鼠在体肠循环结合颈动脉取血研究非诺贝特纳米混悬剂的体内吸收

目的考察非诺贝特纳米混悬剂在大鼠小肠内的吸收动力学及药动学过程。方法采用大鼠在体肠道灌流结合颈动脉取血实验考察非诺贝特纳米混悬剂的体内吸收情况。结果非诺贝特纳米混悬剂在大鼠体内的血药质量浓度y与肠腔中药物累计减少量x的关系为:y=7×10-5 x+0.521 9,r=0.993 6。结论非诺贝特纳米混悬剂在体肠吸收较好,动物实验体内药动学特性符合一室模型。血药质量浓度和肠腔内药物减少量的相关性良好。     

HIF-1在肝癌中作用的研究进展

缺氧是包括肝癌在内的许多实体肿瘤微环境的特点,其导致一系列转录诱导因子的表达。由HIF-1α和HIF-1β两个亚基组成的低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1),是参与缺氧调节的核心因子,能通过激活众多下游靶基因的转录,影响肿瘤细胞恶性生物学行为的产生。研究表明,HIF-1α的过表达参与了肝癌的发生发展,并与肝癌的预后有着密切联系,以HIF-1为靶点的抗肿瘤药物的研制已成为肿瘤治疗研究的热点,因此,文章就HIF-1及其在肝癌领域的作用进展做一综述,为日后研发肝癌的辅助治疗提供新思路。     

共研磨法改善枸橼酸莫沙必利的体外溶出度

目的 改善枸橼酸莫沙必利的体外溶出度.方法 采用共研磨法,分别制备枸橼酸莫沙必利与低取代羟丙基纤维素(L-HPC)、羟丙甲纤维素(HPMC)、聚维酮(PVP)或聚乙二醇6000(PEG 6000)(1∶2)的共研磨物,测定原料药、物理混合物和共研磨物的溶出度;运用X射线衍射法和差示扫描量热法鉴别药物在共研磨物中的存在状态,并考察其稳定性.结果 枸橼酸莫沙必利与L-HPC和HPMC共研磨物的溶出度较原料药的显著提高,且稳定性较好.结论 共研磨法能够改善枸橼酸莫沙必利的体外溶出度.     

白花丹醌对人结肠腺癌Caco-2细胞凋亡、自噬及PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的:探讨白花丹醌是否诱导人结肠腺癌Caco-2细胞凋亡和自噬及其对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法:体外培养Caco-2细胞,分别加入2.5、5、7.5、10、12.5和15μmol/L的白花丹醌作用12、24和36 h后,采用MTT比色法检测细胞活力的变化;将细胞分为对照组和白花丹醌处理组(处理浓度分别为5、10和15μmol/L),采用annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术检测细胞凋亡情况;将微管相关蛋白1轻链3(LC3)双荧光标记腺病毒感染细胞后,观察白花丹醌对细胞自噬流的影响;使用间接免疫荧光法检测细胞内LC3的表达情况;透射电镜观察细胞及自噬体的形态;RT-qPCR和Western blot检测mTOR、PI3K和Akt以及细胞凋亡和自噬相关蛋白Bcl-2、cleaved caspase-3、剪切的多腺苷二磷酸核糖聚合酶1(cleaved PARP1)、LC3-Ⅱ/Ⅰ、beclin-1和p62的表达水平。结果:白花丹醌对Caco-2细胞活力有显著抑制作用(P<0.05);流式细胞术结果显示,处理组细胞凋亡率显著上升(P<0.05);荧光检测结果显示,细胞自噬流和LC3-Ⅱ表达水平升高;电镜下细胞呈典型的凋亡样形态,细胞质出现自噬体;RT-qPCR和Western blot检测结果显示白花丹醌可显著下调PI3K、Akt及mTOR的mRNA及蛋白表达水平(P<0.05),同时细胞内BECN1和Map1lc3b mRNA及cleaved caspase-3、cleaved PARP1、beclin-1、p62和LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:白花丹醌可抑制结肠癌细胞活力,并诱导细胞凋亡与自噬,其机制可能与下调PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。     

中西医治疗慢性乙型病毒性肝炎研究新进展

慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B virus,CHB)在我国感染率高,若治疗不当或治疗不及时,都会导致病情恶化,危害患者身体健康和生命安全,影响社会经济和卫生事业发展。然而现有的医疗水平尚不能将CHB完全治愈。为此,文章收集和整理了近几年的中外文献,比较西医、中医或中西医结合治疗CHB的各自优劣。并对中西医治疗CHB研究新进展进行系统综述,为其治疗发展提供借鉴。     

莪术油对血瘀证肝纤维化小鼠 TGF-β1、Smad 2、Smad 3表达的影响

目的 观察莪术油对血瘀证肝纤维化小鼠TGF-β1、Smad 2、Smad 3表达的影响。方法 72只KM小鼠随机分为7组,即A正常组,B模型组,C莪术油治疗组[分高(C1)、中(C2)、低(C3)剂量组],D秋水仙碱组,E丹酚酸B组。除B组12只外,其余每组10只。除A组常规饲养外,其余组予"四氯化碳+去甲肾上腺素+胎牛血清白蛋白+乙醇+高脂低蛋白饮食"12周制造血瘀证肝纤维化小鼠模型。造模成功后,除A、B组外分别予相应药物灌胃5周,同时继续予40%四氯化碳维持小鼠肝纤维化;予A、B组灌胃与C1组同等剂量的生理盐水5周。末次灌胃24 h后取材,HE、Masson染色观察肝组织病理变化;免疫组化、 RT-PCR分别检测TGF-β1、Smad 2、 Smad 3蛋白和mRNA表达。结果 ①病理改变:B组与A组比较,肝纤维化程度明显加重(P0. 01);C(1～3)、D、E组分别与B组比较,肝纤维化程度均有明显不同程度减轻(P0. 01或P0. 05);尤其C1组最为显著(P0. 001)。②免疫组化和RT-PCR结果:B组与A组比较,TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达半定量分析和mRNA表达均显著升高(P0. 01);C(1～3)、D、E组分别与B组比较,TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达半定量分析和mRNA表达均显著有不同程度降低(P0. 01或P0.05)。结论 莪术油可通过下调TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白和mRNA表达来减轻血瘀证肝纤维化小鼠的肝纤维化程度。     

急性主动脉夹层并心包填塞12例急诊护理

目的:探讨急性主动脉夹层并心包填塞患者的急诊护理。方法:对12例急性主动脉夹层并心包填塞患者进行回顾性分析。结果:12例患者通过稳定血压、控制心率及急诊心包穿刺等治疗和一系列观察护理后,病情稳定收住入院或转上级医院10例,死亡2例。结论:对急性主动脉夹层并心包填塞患者,通过严密的观察护理及合理的治疗,可以在急性期控制夹层的进一步扩展。