利用转录组测序分析与华重楼种子休眠解除相关差异基因

为探究华重楼种子休眠解除过程中差异基因的表达情况及相关代谢通路,以华重楼休眠解除前后种胚为材料,利用新一代高通量测序手段对供试样品进行转录组测序并进行系统生物信息学分析。从cDNA文库中分别获得62 882 650,62 263 366个clean reads,共得到69 248个差异表达基因,上调的表达基因有56 426个,下调的表达基因有12 822个。共有138 267个差异表达基因被GO功能注释到生物进程、分子功能和细胞组分3个大类58个亚类,注释的差异表达基因与代谢过程、生物调控、细胞组分合成和酶催化活性等密切相关。对58 722个差异表达基因进行pathway显著性富集分析,共发现139个代谢通路,休眠前后的DEGs主要富集在碳代谢、次生代谢产物生物合成和多糖代谢等途径。基于KEGG数据库中注释结果,共发现16条与华重楼休眠解除相关的代谢通路。华重楼种子发育与休眠解除过程中大量与种胚形态建成、多糖分解及蛋白质合成的差异基因参与表达,涉及到多个代谢途径的相互作用,构成复杂的休眠解除调控网络。     

HPLC指纹图谱在金银花药材真伪鉴别中的应用研究

目的:研究金银花药材的指纹图谱测定方法,用指纹图谱的方法区别金银花道地和非道地药材。方法:色谱柱Hypersil ODS2(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温20℃,流动相甲醇-0.05%磷酸溶液梯度洗脱,流速1 mL.min^-1,检测波长238 nm。结果:道地药材共有18个共有峰,非道地产区药材共有9个共有峰。结论:HPLC指纹图谱能很好的区分道地和非道地金银花药材,为更好的控制金银花药材内在质量提供了科学依据。     

金银花中18种有机磷农药残留量分析方法的研究

目的：一次性检测金银花中18种有机磷农药的残留量。方法：以丙酮为提取溶剂,超声提取10 min,固相萃取为前处理方法,配有脉冲式硫磷检测器（PFPD）,HP-1701毛细管柱的气相色谱仪检测。结果与结论：18种农药能够在30 min内完全分离,最低检测限为4.0～18.0 μg·kg^-1；对18种有机磷农药在金银花中的添加回收率在83.64%～88.65%,RSD 2.8%～6.0%,符合多种农药残留的分析要求。     

不同产地金银花的绿原酸含量比较

目的:比较不同产地金银花种质绿原酸含量。方法:采用高效液相法测定不同产地和种质金银花绿原酸峰面积。结果:产地和种质的样品绿原酸含量存在很大差异。结论:灰毡毛忍冬绿原酸含量高于忍冬,而环境因素对不同产地忍冬样品的绿原酸含量影响不明显。     

忍冬组织培养体系的建立和优化

金银花是我国常用中药材,具清热、解毒、抗菌等功效[1]。忍冬科植物忍冬Lonicera japonicaThunb.是中药材金银花的基原植物,以干燥花蕾入药。忍冬属药用植物种类很多[2],已有关于北京忍冬[3]、灰毡毛忍冬[4,5]、金花忍冬[6]组织培养方面的报道。但经作者重复文献试验,所报道的金银花组织培养方案繁殖系数不高或试管苗生长不旺盛。本研究对2005年版药典收载的金银花来源植物忍冬L.japonica进行组织培养的研究,旨在为进一步采用生....     

金银花同源四倍体的诱导和鉴定

金银花是忍冬科忍冬属植物忍冬Lonicera ja-ponicaThunb.的干燥花蕾或带初开的花,具有清热解毒,凉风散热之功效[1],是中医常用药。药用植物多倍体具有药效成分含量高,抗逆性强等特点[2]。利用生物技术进行多倍体诱导,诱导效率高,嵌合体少[3]。本研究利用生物技术,在离体组织水     

白术四倍体试管苗形态学及AFLP分析

为探明白术四倍体试管苗形态变异的遗传基础,以白术二倍体试管苗为试验材料,采用抽滤灭菌的秋水仙素浸泡0.5~1.0 cm的白术幼芽,在获得白术四倍体的基础上,比较其与二倍体在外观形态和气孔方面的差异,并采用AFLP技术探究两者基因组DNA的多态性。结果表明用0.1%的秋水仙素处理白术幼芽36 h,为获得白术同源四倍体的最适条件,四倍体诱导率高达32.0%;四倍体与二倍体植株在叶面积指数、叶长、叶宽等形态指标及保卫细胞叶绿体数、气孔大小、气孔密度等方面均存在显著差异;筛选出24对引物获得451条位于80~500 bp的DNA片段,多态性位点占总检测位点的32.59%。白术染色体加倍前后DNA碱基序列在AFLP水平上发生了改变,二倍体和四倍体试管苗在形态上的差异是DNA多态性反映的结果。     

固相萃取法测定金银花中11种有机磷农药的残留量

目的:寻找一次性快速检测金银花中11种有机磷农药残留量的方法.方法:选用脉冲式硫磷检测器(PFPD)和HP-1701毛细管柱,以丙酮为提取溶剂,超声波提取10 min,C18柱和硅胶柱固相萃取.采用气相色谱检测.结果:11种有机磷农药(敌敌畏,敌百虫,甲胺磷,甲拌磷,久效磷,乐果,马拉硫磷,倍硫磷,对硫磷,甲基对硫磷,乙酰甲胺磷)能够在30 min内完全分离,最低检测限为4.0～12.8μg/L.前处理方法的添加回收率在85.38%～91.35%之间,相对标准偏差2.8%～6.1%.结论:本方法适合于多种农药残留量的分析.     

短葶山麦冬种植基地和药材中有机氯农药及重金属残留分析

目的:对福建泉州短葶山麦冬种植基地土壤、灌溉用水及其药材中的有机氯农药与重金属残留量进行分析评价,为山麦冬安全规范化生产提供参考依据.方法:采用GC法测定有机氯农药残留量,用ICP法测定铅(Pb)、镉(Cd)、铜(Cu)、铬(Cr)、砷(As)含量.结果:泉州短葶山麦冬种植土壤、灌溉用水和药材中的有机氯农药与重金属残留存在一些差异,但均低于国家限量标准.结论:泉州短葶山麦冬种植基地土壤、灌溉用水和药材符合中药材GAP标准.     

桔梗同源四倍体诱导及其基因组DNA甲基化差异分析

为探究桔梗同源四倍体与二倍体试管苗外观形态差异的表观遗传变化,先将桔梗二倍体不定芽用不同浓度的秋水仙素(加0.02 g·m L-1二甲亚砜)混合液浸泡后进行组织培养,并通过流式细胞仪和根尖染色体鉴定相结合的方法鉴定倍性。在获得桔梗同源四倍体的基础上,采用甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)技术探究二倍体与四倍体植株之间的DNA甲基化水平及其模式变化。结果表明0.2%的秋水仙素(加0.02 g·m L-1二甲亚砜)混合液处理桔梗不定芽12 h是诱导桔梗同源四倍体的最适条件,其诱导率达到32.0%;四倍体与二倍体植株在外观形态上存在明显差异,经过DNA甲基化差异分析,20对引物扩增的1 586条带中二倍体有764条,四倍体有822条。二倍体总甲基化率、全甲基化率和半甲基化率分别为92.15%,61.52%,30.65%,而四倍体为86.13%,54.38%,31.75%,与二倍体相比,其同源四倍体总甲基化率降低6.02%,全甲基化率降低7.14%,而半甲基化率升高1.6%,说明染色体加倍后其DNA表观遗传模式发生了变化。