菊花脑芳樟醇合酶基因CnTPS1的克隆与原核表达分析＊

目的 克隆菊花脑芳樟醇合酶基因CnTPS1的全长编码序列，利用原核系统表达融合蛋白，为进一步研究该基因在菊花脑萜类合成中的功能提供理论依据。方法 以菊花脑基因组数据为基础，设计特异性引物，PCR扩增CnTPS1的全长编码序列，利用生物信息学分析软件分析序列特征。利用qRT-PCR技术分析CnTPS1基因在不同组织中的基因表达量。构建原核表达载体，体外诱导目的蛋白表达。结果 CnTPS1编码序列全长1749bp，编码582个氨基酸；基因表达模式分析表明该基因在茎和管状花中表达量较高；原核表达系统能诱导出67.58kDa大小的蛋白。结论 首次从菊花脑中克隆得到一个芳樟醇合酶基因CnTPS1，运用生物信息学方法对其编码蛋白的理化性质、结构特征等进行了分析预测，分析了该基因的组织表达模式，并在原核表达系统中成功诱导表达出目标蛋白，这些结果将为菊花脑萜类合酶基因的功能以及萜类物质生物合成途径的解析提供理论依据。     

宣白承气汤联合西医常规治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期系统评价

目的系统评价宣白承气汤联合西医常规治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的临床疗效及安全性。方法计算机检索中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知识资源总库(CNKI)、中国学术期刊数据库(万方数据)、中文科技期刊数据库(维普网)、Pub Med,纳入宣白承气汤及其加减联合西医常规治疗与单纯西医常规治疗比较治疗AECOPD的随机对照试验,采用Cochrane系统评价手册进行文献质量评价和数据提取,采用RevMan5.3对临床疗效指标进行Meta分析。结果纳入文献12篇,Meta分析结果显示:试验组总有效率高于对照组,差异有统计学意义[OR=4.83,95%CI(3.09,7.54),P0.000 01];试验组较对照组可显著降低中性粒细胞百分比、C反应蛋白等炎性指标和动脉血二氧化碳分压,显著提高第一秒用力呼气容积占预计值的百分比、用力肺活量占预计值的百分比、第1秒用力呼气容积/用力肺活量等肺功能指标和动脉血p H值、动脉血氧分压,差异均有统计学意义。纳入文献均未报道严重不良反应。结论宣白承气汤联合西医常规加减治疗AECOPD疗效显著,但由于纳入文献量和样本量较少,研究质量较低,其临床疗效与安全性仍需高质量的多中心、大样本、随机对照试验进一步验证。     

人参皂苷F2对过氧化氢诱导细胞损伤的保护作用

目的研究人参皂苷F2对人胚肾293(HEK-293)细胞氧化应激损伤的保护作用。方法以0.4 mmol/L过氧化氢(H_2O_2)诱导HEK-293细胞氧化应激,1.25、5和20μmol/L人参皂苷F2预处理,MTS法检测细胞活力;DCFH-DA荧光探针考察细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量;试剂盒检测丙二醛(malondialchehyche, MDA)水平和抗氧化酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性;蛋白质印迹法(Western blot)和qRT-PCR检测核因子E2相关因子2 (nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)/抑制蛋白Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1 (kelch-like ECH-associated protein 1, Keap1)信号的蛋白和mRNA表达量。结果 1.25、5和20μmol/L人参皂苷F2处理正常HEK-293细胞后对细胞无毒性或促增殖作用;人参皂苷F2预处理氧化应激细胞后,细胞活力显著高于损伤组,各组间差异均有统计学意义(P0.05);氧化损伤组的DCF荧光较对照组相比显著增强(P0.05),人参皂苷F2预处理后细胞ROS相对量呈浓度依赖性降低,各组间差异均有统计学意义(P0.05);人参皂苷F2预处理后细胞MDA水平呈浓度依赖性降低,各组间差异均有统计学意义(P0.05),SOD和GSH-Px活性显著高于损伤组(P0.05),5和20μmol/L人参皂苷F2能显著提高CAT活性(P0.05);人参皂苷F2处理后,Nrf2的mRNA和蛋白表达量均显著升高(P0.05),Keap1的mRNA和蛋白表达量显著低于损伤组(P0.05)。结论人参皂苷F2具有细胞保护作用,可降低HEK-293细胞ROS和MDA水平,提高抗氧化酶活性,其作用机制可能是通过调节Nrf2/Keap1信号通路以抵抗过氧化氢导致的细胞氧化应激损伤。     

甘草附子汤与针灸联合艾瑞昔布治疗强直性脊柱炎临床研究

目的:观察甘草附子汤与针灸联合艾瑞昔布治疗强直性脊柱炎患者预后。方法:将96例患者分为2组各48例,对照组给予艾瑞昔布片,观察组在对照组基础上给予甘草附子汤与针灸治疗。对比2组患者治疗前后疾病的总体评价(PGA)、病情活动指数(BASDAI)评分、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)、C-反应蛋白(CRP)、肠球菌表面蛋白(ESP)、脊柱痛评分、晨僵时间、枕墙距、扩胸度。结果:治疗后,2组PGA评分、BASDAI评分均较前改善(P0.05)。观察组治疗后PGA评分、BASDAI评分较对照组降低,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,2组炎症指标均较前改善(P0.05)。观察组治疗后TNF-α、IL-6、CRP、ESP与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,2组脊柱疼痛评分、晨僵时间、枕墙距均下降,扩胸度均提高(P0.05)。观察组治疗后脊柱疼痛评分、晨僵时间、枕墙距与对照组相比明显降低,而扩胸度则较对照组有所提高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:甘草附子汤与针灸联合艾瑞昔布治疗强直性脊柱炎,相比单一西医药物治疗更能有效的改善患者临床症状,明显降低炎性水平,提高关节功能,可促进患者预后。     

不同类型抗癫痫药物对开颅手术患者术后早期高氨血症发病率的影响

目的：评价开颅手术患者应用左乙拉西坦、丙戊酸钠和卡马西平等3种不同抗癫痫药（AEDs）诱发高氨血症（AHA）的发生率、发作程度，并分析患者发生AHA的危险因素。方法：纳入2014年4月至2018年9月间在某院神经外科进行开颅手术的108患者，并将其随机分为左乙拉西坦组（n=36）、丙戊酸钠组（n=36）与卡马西平组（n=36）。3组患者术后分别口服左乙拉西坦片、丙戊酸钠片与卡马西平片进行癫痫预防治疗，在术前，手术当天，术后第1，3，7天检测并比较3组患者的血氨浓度、肝功能和凝血指标，评价3组患者术后AHA发生率、血氨浓度、血氨变化趋势及AEDs对患者肝功能和凝血功能的影响。根据术后患者是否发生AHA，将患者分为术后AHA组（n=70）与术后血氨正常组（n=38），比较2组患者的临床特征，评价患者发生AHA的危险因素。结果：左乙拉西坦组、丙戊酸组与卡马西平组分别有24（66.7%）例、29（80.6%）例及17（47.2%）例患者发生AHA，丙戊酸组患者AHA发生率显著高于卡马西平组（χ²=8.669，P=0.003）。丙戊酸钠组患者术后第3天和第7天血氨浓度及术后血氨的平均浓度均显著高于卡马西平组患者（P=0.023，<0.001，0.028）。术后第7天丙戊酸组患者ALT指标显著低于左乙拉西坦组与卡马西平组（均P<0.001）。影响患者术后发生AHA的危险因素包括：较低的年龄（t=2.061，P=0.042）与较高的术前血氨浓度（t=7.986，P<0.001）。AHA组患者术后总胆红素（t=3.788，P<0.001）、直接胆红素（t=3.329，P=0.001）和血清白蛋白（t=11.624，P<0.001）较术前显著降低，血浆凝血酶原时间显著延长（t=4.109，P<0.001）。而衡量急性肝炎的指标丙氨酸转氨酶没有显著变化（t=0.956，P=0.341）。结论：卡马西平对患者术后血氨浓度影响较小，是开颅手术患者的首选AEDs药物，而丙戊酸钠更适合肝脏氨基转移酶异常的患者。     

EB 病毒Rta 优势表位抗原的克隆表达及在应用ELISA 诊断鼻咽癌中的价值

目的　制备高活性EB 病毒立即早期蛋白Rta 优势表位抗原，并初步评价该抗原在鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma, NPC）诊断中的价值。方法　分析Rta 氨基酸序列，选取抗原优势表位Rta（301~440aa），合成目的基因， 连接pBVGST-6His 载体，构建重组pBV-Rta 表达质粒，进行诱导表达获得纯化抗原。采用间接ELISA 初步评价优势表 位抗原在鼻咽癌诊断中的价值，以纯化的pBV-Rta 优势表位抗原为包被抗原，抗人IgA，IgG 和IgM 为二抗，检测由烟 台毓璜顶医院提供的50 例经临床病理确诊的NPC 患者血清样本和90 例健康体检者血清样本。结果　获得了高效原核 表达的pBV-Rta 优势表位抗原(301~440aa)，经过小样本验证，确定pBV-Rta 具有良好的抗原活性和特异度。放大样本 进行检测，基于Rta 优势表位抗原的Rta-IgG 间接ELISA 方法检测灵敏度和特异度分别为73.08% 和95.79%。Rta-IgG 检测的AUC 值为0.860。结论　Rta 优势表位抗原pBV-Rta 是优选的可以用于Rta-IgG 检测的抗原，利用该抗原所建立 的间接ELISA 检测方法可以很好地区分鼻咽癌患者和健康对照。     

精神分裂症患者及其一级亲属静息态脑功能网络的小世界属性研究

目的:探讨精神分裂症患者及其一级亲属静息态脑功能网络小世界属性特征的异同。方法:对符合DSM-IV诊断标准的33例精神分裂症患者、30例未患病一级亲属和34例健康对照进行静息态脑功能扫描,利用AAL模板将大脑划分为116个脑区并进行网络构建,比较三组被试的网络属性特征。结果:三组静息态脑功能网络均具有小世界属性,但患者组部分脑区节点属性(节点度和节点局部效率)显著异常(p<0.05, Bonferroni校正),主要位于右颞上回、左眶额皮质、左后扣带回和右小脑下叶;亲属组左后扣带回的节点度显著增加。结论:精神分裂症患者和一级亲属都存在左后扣带回节点属性异常,提示左后扣带回功能异常可能是精神分裂症的早期改变且受遗传易感性影响。     

产后可逆性后部白质脑病综合征1例报道

正可逆性后部白质脑病综合征(reversible posterior leukoencephalopathy syndrome,RPLS)是一组由多种原因引起的以头痛、意识障碍、癫痫、精神异常和视觉障碍为主要表现的临床综合征,为大脑后部白质损害,常由细胞毒性药物、子痫、败血症、肾脏或自身免疫性疾病导致。本研究报道本院