丹参含药血清对肝星状细胞Hh通路中SuFu和DYRK2表达的影响

观察丹参含药血清对瘦素刺激的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSCs)丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抑制剂(SuFu)和双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶2(DYRK2)表达的影响。清洁级SD大鼠(60只)给予丹参水煎剂、生理盐水、秋水仙碱,连续灌胃10 d制备丹参含药血清。体外培养的肝星状细胞(HSCs),除空白对照组外,其余各组均予瘦素100μg·L^-1刺激24 h,各组含药血清干预后置于37℃,5% CO₂孵箱中培养。24 h后收集细胞,采用MTT法检测HSCs的增殖,分别采用RT-PCR和Western blot法测定SuFu和DYRK2的表达情况。用瘦素刺激大鼠HSCs后,DYRK2 mRNA和蛋白表达均明显升高(与空白组比较P<0.01),SuFu mRNA和蛋白表达均明显降低(与空白组比较P<0.01或P<0.05)。抑制剂组(cyclopamine)、丹参含药血清、秋水仙碱组干预后,DYRK2 mRNA和蛋白表达明显降低(与模型组比较P<0.01),SuFu mRNA蛋白表达均明显升高(与模型组比较P<0.01)。在模型组的基础上加入Hh通路激动剂(purmorphamine)充分活化后, DYRK2 mRNA和蛋白表达均明显升高(与模型组比较P<0.01),SuFu mRNA和蛋白表达均明显降低(与模型组比较P<0.01)。用丹参含药血清干预激动剂组后,DYRK2 mRNA和蛋白表达明显降低(与模型组比较P<0.01),SuFu mRNA和蛋白表达均明显升高(与模型组比较P<0.01)。丹参含药血清可通过干预瘦素诱导的HSCs中SuFu和DYRK2的表达,进而影响HSCs的活化增殖。     

锌对冬凌草产量及其有效成分含量的影响

目的:在大田条件下,考察不同浓度的锌对冬凌草产量及有效成分含量的影响,为锌的合理施用提供科学依据。方法:在冬凌草生长发育初期,叶面喷施不同浓度的锌,以冬凌草的产量、冬凌草甲素及迷迭香酸、冬凌草乙素的含量为指标,优选出锌的最佳喷施浓度。结果:与喷施清水的对照相比,叶面喷施0.10%的锌有利于提高冬凌草的产量及冬凌草甲素的含量,冬凌草的产量增加16.5%、冬凌草甲素的含量提高40.28%。结论:锌的合理施用可使冬凌草增产,同时可显著提高冬凌草甲素的含量。     

莪术含药血清抑制HSCs中Shh和Gli1表达的机制研究

研究莪术含药血清抑制活化的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)中Hedgehog(Hh)信号通路关键因子Shh(sonic hedgehog),Gli1(glioma-associated oncogene homolog-1)表达的机制。清洁级SD大鼠均分2组,分别给予莪术水煎剂、生理盐水灌胃取血制备含药血清。体外培养大鼠HSCs,分为7组:空白组、模型组、Hh通路抑制剂组、莪术组、Hh通路抑制剂+莪术组、Hh通路激动剂组、Hh通路激动剂+莪术组。除空白组外,其余各组均给予100μg·L-1瘦素诱导后,各组再予以相应药物干预24 h,经MTT法检测HSCs增殖情况,RT-PCR法检测Shh,Gli1的mRNA表达,Western blot法检测Shh,Gli1蛋白表达及免疫荧光法检测Gli1蛋白表达。经瘦素活化的大鼠HSCs中Shh,Gli1的mRNA和蛋白表达均显著上调(与空白组比较P0.01)。Hh通路抑制剂、莪术含药血清分别干预后,Shh,Gli1的mRNA和蛋白表达显著下调(与模型组比较P0.01);莪术含药血清与Hh通路抑制剂协同干预后,Shh,Gli1 mRNA和蛋白表达显著下调(与模型组比较P0.01);Hh通路激动剂干预后,Shh,Gli1 mRNA和蛋白表达显著上调(与模型组比较P0.01)。用莪术含药血清干预Hh通路激动剂组后,Shh,Gli1mRNA和蛋白表达显著下调(与Hh通路激动剂组比较P0.01)。莪术含药血清可通过抑制瘦素诱导活化的HSCs中Shh,Gli1的表达,参与Hh信号通路抑制HSCs的活化,发挥抗肝纤维化的作用。