橘红素预处理对过氧化氢诱导成骨细胞损伤的保护作用及机制

目的 研究橘红素预处理对过氧化氢(H₂O₂)诱导的成骨细胞氧化损伤的保护作用和机制。方法(1)酶消化法分离培养大鼠颅骨来源的原代成骨细胞,分别培养7和21 d后,采用碱性磷酸酶(AKP)染色和茜素红染色鉴定细胞。(2)橘红素5～40μmol·L^-1孵育成骨细胞48 h后,加H2O2300μmol·L^-11 h,采用CCK-8法测定细胞存活率,AKP试剂盒测定AKP活性。(3)培养的成骨细胞分为细胞对照组、模型组(H2O2300μmol·L^-1,孵育1 h)、模型+橘红素组(橘红素10μmol·L^-1预处理48 h后加H2O2300μmol·L^-1,1 h)。茜素红染色检测钙化结节数量,流式细胞术检测成骨细胞内活性氧(ROS)水平,超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒检测SOD活性,Western印迹法检测成骨细胞转录因子(OSX)和骨保护素(OPG)蛋白表达水平。结果 (1) AKP染色成骨细胞细胞胞质呈蓝色,茜素红染色可见钙化结节...