藏药湿生扁蕾提取物通过NF-κB通路诱导结肠癌细胞凋亡的机制研究

目的：探讨藏药湿生扁蕾提取物通过 NF －κB 信号通路诱导结肠癌 SW480细胞凋亡的作用及其机制。方法本研究用不同浓度的藏药湿生扁蕾提取物处理结肠癌 SW480细胞,通过 JC －1染色检测 SW480细胞线粒体膜电位的变化,通过 Hoechst 染色以判断藏药湿生扁蕾提取物是否具有诱导结肠癌细胞 SW480细胞凋亡效应。同时检测 NF －κB 蛋白的表达,用以明确 NF －κB 信号通路在结肠癌发生中的作用机制。结果经一定浓度的湿生扁蕾提取物处理后的 SW480细胞内,NF －κB 的表达明显下调,染色现象揭示湿生扁蕾提取物具有促进肿瘤细胞凋亡的作用。结论湿生扁蕾提取物可以在体外诱导肿瘤细胞凋亡,其抗肿瘤机制是通过 NF －κB 信号通路介导的。     

湿生扁蕾对结肠癌微环境中HMSCs恶性增殖以及CD34、CD90的影响

目的:探究湿生扁蕾乙酸乙酯部位对结肠癌微环境中人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,HMSCs)恶性增殖及表面标志分子CD34、CD90表达的影响。方法:通过MTT法筛选湿生扁蕾乙酸乙酯部位作用于SW480细胞和HMSCs的最佳给药剂量。建立SW480和HMSCs细胞Transwell非接触共培养模型,将试验分为正常对照组、肿瘤细胞对照组、共培养组和湿生扁蕾给药组,分别采用细胞计数试验、流式细胞术FCM观察各组细胞的增殖、周期及HMSCs表面标志分子CD34和CD90的表达情况。结果:湿生扁蕾乙酸乙酯部位最佳给药剂量为200μg/ml,100μl。与正常对照组相比,共培养组HMSCs增殖能力增强,G1期细胞比例明显降低,S期和G2/M期细胞比例明显升高,且HMSCs表面标志分子CD34阳性表达率升高,CD90阳性表达率降低。与共培养组相比,湿生扁蕾给药组HMSCs增殖能力降低,G1期细胞比例明显升高,S期和G2/M期细胞比例明显降低,且HMSCs表面标志分子CD34阳性表达率降低,CD90阳性表达率升高。结论:结肠癌微环境中HMSCs增殖能力增强,且HMSCs表面标志分子阳性表达率发生显著改变,提示HMSCs发生恶性增殖,且湿生扁蕾乙酸乙酯部位可抑制结肠癌微环境中HMSCs的恶性转变。     

仙鹤草治疗肠道疾病的研究进展

通过对近年来有关仙鹤草化学成分、肠道疾病潜在有效成分以及仙鹤草在临床上的应用等文献的整理 研究,发现仙鹤草既可用于咯血、吐血、崩漏下血等各种出血症,又被广泛应用于治疗炎症性肠炎、肠易激综合 征、细菌性痢疾等各类肠道疾病中。该文在此研究基础上开展综述,以期为仙鹤草治疗肠道疾病提供更多研究理 论依据。     

基于Qrt-RNA技术筛选藏药湿生扁蕾抗溃疡性结肠炎肠纤维化活性成分的研究

目的：研究藏药湿生扁蕾抗溃疡性结肠炎肠纤维化的药效物质基础。方法采用2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的大鼠溃疡性结肠炎肠纤维化模型,灌胃给予藏药湿生扁蕾用乙酸乙酯萃取的活性提取物,以硅胶色谱分离、薄层定性得到的活性部位,采用荧光定量 RT-PCR 法检测大鼠结肠组织胶原ⅠmRNA、胶原Ⅲ mRNA、α-SMA mRNA、E-cad mRNA 的表达,筛选其活性成分。结果湿生扁蕾乙酸乙酯萃取物分离得到的活性部位经纯化得到4个单体化合物,用光谱分析等鉴定为1-hydroxy-3,7,8-Trimethoxyxanthones、1,8-Dihydroxy-3,7-Dimethoxyx-anthones、1-hydroxy-3,7-Dimethoxyxanthones 和1,7-Dihydroxy-3,8-Dimethoxyxanthones,4种单体化合物对溃疡性结肠炎肠纤维化大鼠模型均有明显的活性。结论湿生扁蕾抗溃疡性结肠炎肠纤维化的物质基础集中在乙酸乙酯部位,活性成分主要体现为4种酮类化合物。     

基于药效学和化学方法的金蕾复方醇提工艺优选

目的优选金蕾复方醇提工艺条件。方法以金蕾复方药液对胆汁淤积小鼠模型的干预效果为指标筛选最佳提取溶媒,以当药黄素、当药醇苷含量及干膏率为综合考察指标,采用L_9(3~4)正交试验对料液比、提取时间、提取次数进行优化,筛选最佳提取工艺参数。结果金蕾复方醇提最佳工艺条件为:以70%乙醇为提取溶剂,料液比为1∶8,提取时间为1 h,提取次数为2次。结论本试验优选的提取工艺保证了金蕾复方的药效,简单合理、稳定可行,可用于该制剂的工业化生产。     

藏药湿生扁蕾及扁蕾的相关本草考证

就扁蕾和藏药湿生扁蕾两药从文献记载、植物形态、生境分布、化学成分等方面进行考释,以期今后更好地开发应用本种或本属植物资源。     

藏药湿生扁蕾对人结肠癌细胞SW480增殖调控因子CyclinD_1、CDK4、PCNA和p21~(kip1)·mRNA表达的影响

目的:探讨藏药湿生扁蕾对人结肠癌细胞SW480增殖调控因子CyclinD1、CDK4、PCNA和p21kip1·mRNA表达的影响。方法:将SW480细胞接种于6孔培养板,24h后分别用不同浓度(0.25、0.50、1.00 mg/ml)的湿生扁蕾干预,继续培养24h,提取每组总RNA,以GAPDH基因为内参,采用RT-PCR法检测CyclinD1、CDK4、PCNA及p21kip1的mRNA表达水平。结果:PCNA、CyclinD1及CDK4的mRNA表达随湿生扁蕾浓度增加而减少,而p21kip1mRNA的表达随湿生扁蕾浓度增加而增加,并呈现明显的剂量依赖关系。结论:藏药湿生扁蕾干预SW480细胞的增殖与其抑制CyclinD1、CDK4、PCNA的表达和促进p21kip1的表达作用有关。     

湿生扁蕾口山酮对UC肠纤维化大鼠肠上皮细胞间质转化的影响

目的 探讨湿生扁蕾口山酮对溃疡性结肠炎（UC）肠纤维化大鼠肠上皮细胞间质转化的影响。方法 通过2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠溃疡性结肠炎肠纤维化模型,利用湿生扁蕾口 山酮干预溃疡性结肠炎肠纤维化模型大鼠,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（S-P）法检测上皮表型标记蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和间质表型标记蛋白α-SMA的表达情况,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测E-钙黏蛋白、α-SMA mRNA的表达情况。结果 与模型组相比,湿生扁蕾口山酮显著增加溃疡性结肠炎肠纤维化大鼠肠上皮细胞E-cadherin的表达,抑制α-SMA的表达。结论 湿生扁蕾口山酮可通过抑制结肠上皮细胞间质转化作用,明显改善2,4,6-三硝基苯磺酸诱导的大鼠溃疡性结肠炎肠纤维化。