PTEN核转位的研究进展

PTEN是1997年发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,其缺失、突变和表达减少广泛存在于多种进展期肿瘤中,核内外的PTEN通过细胞凋亡和诱导细胞周期停滞抑制肿瘤的发生发展.最近研究发现,PTEN可以通过泛素化进入细胞核内,并通过诱导细胞周期停滞和维持染色体完整性在核内起到肿瘤抑制作用.本文就PTEN的核转位及其在核内的多种功能作一综述.     

Nestin和HIF-1α在人脑胶质瘤组织的表达及作用

目的 探讨nestin和HIF-1α在人脑胶质瘤组织中的表达及其在胶质瘤血管生成中所起的作用。方法 应用免疫组化两步法检测53例不同级别胶质瘤和5例正常胎脑组织中nestin和HIF-1α的表达。结果 nestin在低级别和高级别胶质瘤的平均光密度值(A)分别0.2463±0.0602、0.6438±0.0901,两组间差异有显著性(P < 0.05);HIF-1α在低级别和高级别胶质瘤的平均光密度值(A)分别为0.1334±0.0298、0.2746±0.0904,两组间差异有显著性(P < 0.05)。结论 胶质瘤中,nestin在新生微血管内皮细胞和HIF-1α在肿瘤细胞的表达与胶质瘤的病理分级有关,级别越高表达越强,而且两者呈正相关,提示可将nestin和HIF-1α作为一种判断胶质瘤新生血管增生、恶性程度的参考依据。     

“钉钉”辅助教学在骨科临床教学中的应用

目的本文介绍智能软件“钉钉”在骨科规培医师中的应用,描述其作为骨科教学辅助工具的可行性。方法选取本院2018年10月—2020年8月期间骨科住院医师规范化培训学员76名,随机分为两组,即对照组和试验组,每组各38名。对照组采用常规线下方式完成传统带教方法,以讲课的形式介绍骨科专业基础知识要点,试验组实施后应用智能软件“钉钉”作为视听工具完成培训,比较两组学员的理论考核成绩及学员评价教学效果的调查问卷。结果试验组学员的理论考核成绩优于对照组,试验组的各项教学效果评分优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论明确了新型智能软件“钉钉”在临床带教中的效果,可以以高速、高质量、高效的方式传播,而且有效地提高规培医师和带教教师的互动,逐步形成多样化的新型临床带教方法,极大的提高骨科教学效率与质量。     

弓形虫微线体蛋白MIC2和M2AP真核表达载体的构建

目的构建弓形虫RH株微线体蛋白M2AP和MIC2的真核表达载pGAPZαA-mic2和pGAPZαA-m2ap,为建立同时表达MIC2和M2AP蛋白的重组毕赤酵母表达系统,制备重组粘附蛋白复合体MIC2-M2AP奠定基础。方法提取弓形虫RH株速殖子总RNA,用Oligo dT-Adaptor引物逆转录合成cDNA。根据已知的弓形虫mic2和m2ap基因序列,采用引物设计软件Primer premier5.0自行设计并合成引物,以cDNA为模板,PCR扩增mic2和m2ap基因,克隆入pMD-19-simple-T载体,经酶切和测序鉴定后回收目的片段,分别插入至pGAPZαA内,构建重组毕赤酵母表达载体pGAPZαA-mic2和pGAPZαA-m2ap,转化入E.coli DH5α。提取转化菌质粒,进行酶切和测序鉴定。结果 PCR扩增得到的mic2和m2ap基因分别为2 200bp和1 000bp,与预期大小一致。T-A克隆重组质粒pMD19-T-mic2、pMD19-T-m2ap和重组酵母表达质粒pGAPZαA-mic2、pGAPZαA-m2ap经测序鉴定,与GenBank收录的弓形虫mic2基因和m2ap基因序列同源性为100%,重组毕赤酵母表达载体pGAPZαA-mic2和pGAPZαA-m2ap构建成功。结论成功构建弓形虫重组毕赤酵母表达载体pGAPZαA-mic2和pGAPZαA-m2ap,为进一步研究MIC2和M2AP相互作用机制及其免疫保护效应奠定了基础。     

弓形虫重组粘附蛋白复合体MIC2-M2AP的制备、鉴定及免疫保护效应

【立论依据】 弓形虫微线体分泌的粘附蛋白MIC2与M2AP(MIC2相关蛋白)以1∶1的比例形成MIC2-M2AP六聚复合体,转移到弓形虫顶端与宿主细胞膜之间形成的连接区域,协助虫体进入宿主细胞。 【设计思路】 制备弓形虫重组粘附蛋白复合体MIC2-M2AP,鉴定其免疫原性和免疫反应性及其在抗弓形虫入侵宿主细胞中的作用,为筛选MIC2-M2AP作为弓形虫疫苗候选抗原的研究奠定基础。 【实验内容】 RT-PCR扩增弓形虫MIC2和M2AP基因,克隆至组成型表达的毕赤酵母表达载体pGAPZαA中,构建重组真核表达质粒 pGAPZαA-MIC2和pGAPZαA-M2AP,利用同源重组的方法将MIC2和M2AP基因整合到同一毕赤酵母细胞X33的基因组中进行发酵表达获得重组MIC2-M2AP复合体,His标签Ni-NTA柱亲和层析纯化后免疫小鼠,采用免疫小鼠血清和弓形虫感染鼠血清进行蛋白质印迹鉴定重组MIC2-M2AP复合体的免疫原性和免疫反应性,免疫小鼠抗重组MIC2-M2AP复合体多抗血清体外中和实验观察阻断弓形虫入侵宿主细胞效应,重组MIC2-M2AP复合体免疫小鼠的抗弓形虫感染效应。 【材料】 弓形虫RH株速殖子,毕赤酵母表达载体pGAPZαA。 【可行性】 国外文献已经证实MIC2-M2AP复合体在协助虫体的滑移运动和侵入细胞中发挥重要的作用,敲除MIC1基因后,弓形虫株对宿主细胞的入侵率下降50%,敲除MIC2的结合蛋白M2AP后,弓形虫株对宿主细胞的入侵率下降80%以上,因此重组MIC2-M2AP复合体有可能作为弓形虫疫苗候选抗原。目前我们已成功构建了重组真核表达载体 pGAPZαA-MIC2和pGAPZαA-M2AP,其核苷酸序列与GenBank中的序列同源性为100%。 【创新性】 国内外在弓形虫疫苗候选抗原筛选研究中,目前报道较多的是弓形虫表面抗原(SAG)、棒状体蛋白(ROP)、致密颗粒抗原(GRA)等可能作为弓形虫疫苗候选抗原的研究,而关于微线体蛋白(MIC)尤其是MIC2-M2AP复合体可作为弓形虫疫苗候选抗原的研究未见报道,而根据已报道的微线体蛋白相关研究成果,我们推测重组MIC2-M2AP复合体免疫会产生较强的免疫保护效果。     

扭动模式下旋转碎核与快速劈核的比较

目的 比较扭动模式下超声乳化白内障摘除术分别采用旋转碎核与快速劈核技术的效果.方法 全部患者168例(180只眼)行扭动模式下超声乳化白内障摘除联合人工晶状体植入术,根据术中碎核方式,分为快速劈核组82例(90只眼)及旋转碎核组86例(90只眼).记录超声时间和超声能量,术后视力、角膜厚度和角膜内皮细胞计数.结果 对于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级核,平均超声时间快速劈核组为23.24、38.74和63.89s,旋转碎核组为6.94、28.15和50.47s,差异有统计学意义;平均超声能量快速劈核组为11.87、16.26和28.86,旋转碎核为6.85、10.91和19.00,差异有统计学意义.术后角膜厚度:各级核术后1d旋转碎核组均低于快速劈核组,术后7d,Ⅱ、Ⅲ级核两组间差异无统计学意义,Ⅳ级核旋转碎核低于快速劈核组,术后30d差异无统计学意义.术后平均最佳矫正视力:各级核术后1d旋转碎核组较快速劈核组高;术后7d,Ⅱ、Ⅲ级核两组间差异无统计学意义,Ⅳ级核旋转碎核组高于快速劈核组.术后30d差异无统计学意义.术后角膜内皮丢失:术后7d及30d,各级核旋转碎核组低于快速劈核组.结论 扭动模式下超声乳化白内障摘除术中运用旋转碎核技术是安全且有效的方法.

Abstract：

Objective To compare the quick chop with non-chopping rotation phacoemulsification techniques in terms of efficacy and safety.Methods According to the phacoemulsification technique,180 eyes of 168 patients with age-related cataract were randomly assigned to either phacoemulsification using quick chop technique or non-chopping rotation technique.The intraoperative outcomes of ultrasound time(UST)and cumulative dissipated energy(CDE)were recorded.Postoperative outcomes of best corrected visual acuity,corneal thickness and endothelial ce11 count were measured.Results For the grade 2,3 and 4 nuclear density,the mean USTs recorded in quick chop group were 23.24,38.74 and 63.89 seconds and in non-chopping group were 6.94,28.15 and 50.47 seconds,respectively.The mean CDEs were 11.87,16.26 and 28.86 in quic chop group and 6.85,10.91and 19.00 in non-chopping groups,respectively.The corneal thickness showed significantly less corneal edema in non-chopping group at 1 day after surgery.At 7 days after surgery,there were no significant differences between the two groups for grade 2,3 nuclear density,for grade 4 nuclear density,the corneal was thicker in quick chop group.At 30 days after surgery,those differences were not significant.The best corrected visual acuity of non-chopping group was better than quick chop group at lday after surgery.There were no significant differences between the two groups at 7 days after surgery for grade 2,3 nuclear density,for grade 4 nuclear density,the best corrected visual acuity of non-chopping group was better.At 30 days after surgery,there were no statistical differences between these two groups.At 7 and 30 days after surgery,the endothelial cells in quick chop group were statistically lower than non-chopping group.Conclusions The non-chopping technique is advisable and effective for lens removal in the torsional mode phacoemulsification.     

巢蛋白和缺氧诱导因子-1α在人脑胶质瘤组织的表达及作用

目的 探讨巢蛋白(nestin)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在人脑胶质瘤组织中的表达及其在胶质瘤血管生成中所起的作用.方法 应用免疫组化两步法检测53例不同级别胶质瘤和5例正常胎脑组织中nestin和HIF-1α的表达.结果 nestin在低级别和高级别胶质瘤的平均光密度值(A)分别为0.246 3±0.060 2和0.643 8±0.090 1,差异有显著性(P<0.05);HIF-1α在低级别和高级别胶质瘤的平均光密度值(A)分别为0.133 4±0.029 8和0.274 6±0.090 4,差异有显著性(P<0.05).结论 胶质瘤中,nestin在新生微血管内皮细胞和HIF-1α在肿瘤细胞的表达与胶质瘤的病理分级有关,级别越高表达越强,而且两者呈正相关,提示可将nestin和HIF-1α作为一种判断胶质瘤新生血管增生、恶性程度的参考依据.     

透明角膜切口超声乳化白内障吸除术切口大小对术后角膜散光的影响

目的 比较不同大小透明角膜切口超声乳化白内障吸除手术后角膜屈光变化的差异.方法 选取160例(160只眼)超声乳化白内障手术患者.随机分成A组(2.2mm透明角膜切口)78例(78只眼),B组(3.0mm透明角膜切口)82例(82只眼),在术前、术后1周、1个月、3个月行角膜地形图检查,比较角膜散光度的变化.结果 术后1周,A组的散光度高于B组(P＜0.05);术后1个月,A组的散光度与B组相比,差异有统计学意义(P＜0.05),A组的散光度仍高于B组;术后3个月,A组与B组比较,两组的散光度差异无统计学意义(P＞0.05).结论 对于较硬核的白内障双手3.0mm透明角膜切口超声乳化手术比2.2mm透明角膜切口术后早期角膜屈光改变更小.     

应用电子图谱指导组织胚胎学实验教学的尝试

组织学与胚胎学是以观察人体微细结构特点为主的形态学科,是医学领域里较早接触的一门重要基础课程,以往利用传统的教学方法授课时,需要大量的教具(挂图、模型、切片、标本、投影片、幻灯片、录像带、影片资料等)和辅助设备(光学显微镜、电子显微镜、投影仪、幻灯机、录像机、电视机等),这给教学工作带来一定困难,教师感到教学准备工作量很大,学生也感到学习内容抽象复杂、枯燥难学.     

制作《电子图谱》指导中医院校实验教学的体会

优化教学媒体是促进教学改革。提高教学质量和教学效果的有效途径。我们利用PowerPoint2000将组织学图片制成便于浏览和查阅的电子图谱,用于指导中医院校实验教学。有结构展示立体化。信息存储量大。节省板书时间。形式活泼多样。图文并茂。形象生动。便于复习查询等优点。