流式细胞仪分选非染色S期CHO细胞有助于提高聚乙烯亚胺的转染效率

目的利用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)分选获得非染色、同步化的中国仓鼠卵巢(Chinese hamsterovary,CHO)细胞,观察聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)在不同周期CHO细胞的瞬时转染和稳定转染效率。方法悬浮培养CHODG44细胞,应用流式细胞仪的光学参数-前向角和侧向角,在细胞主群中设置12个门,然后进行分选。分选出的各门内细胞经碘化丙啶(PI)染色进行细胞周期检测。以PEI为载体分别向含G0/G1、S、G2/M比例较高的细胞亚群和未经分选的细胞转染含绿荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,GFP)质粒,利用流式细胞仪检测瞬时转染、稳定转染效率。结果细胞DNA含量与侧向角相关,各细胞亚群G0/G1期细胞所占比例总体上随着侧向角的增大而减小,G2/M细胞所占比例随着侧向角的增大而增多。低侧向角的细胞亚群P2内G0/G1期细胞比例可达80.49%,中侧向角的细胞亚群P7内S期细胞比例可达61.14%,高侧向角的细胞亚群P13内G2/M期细胞比例可达49.88%。转染48h,GFP阳性细胞在G2/M期细胞比例较高的细胞亚群所占比例最高,但瞬时转染效率,S期细胞比例较高的细胞群大于G2/M期细胞比例较高的细胞群。转染2w,稳定转染效率仍为S期细胞比例较高的细胞亚群大于其它细胞亚群及未分选的混合细胞群。结论应用流式细胞仪的光学参数可以有效分选非诱导、无染色分别含有较高比例各周期时相的CHO细胞;PEI的转染效率与转染时细胞所处的细胞周期时相相关,且S期细胞亚群的瞬时和稳定转染效率均高于其它细胞周期亚群。     

注射用去甲万古霉素(万迅)治疗急性细菌性感染不良反应调查研究

目的 :评价国产去甲万古霉素 (万迅 )上市后的不良反应。方法 采用多中心、开放试验设计 ,对去甲万古霉素治疗临床革兰阳性菌感染中的临床与实验室不良事件进行观察记录与评价。结果 :本中心入选病例共 2 6 4例 ,合格病例 2 5 7例 ,其中临床不良事件发生 7例 ,与去甲万古霉素有关者 5例 ,主要表现为消化道症状与皮疹 ,其临床不良反应发生率在入选病例中为 1 .89% ,在合格病例中为 1 .95 % ,临床不良反应多较轻微且为一过性 ;实验室不良事件发生 4 5例 ,其中与去甲万古霉素有关者 1 1例 ,主要表现为肾功能、肝功能异常及蛋白尿 ,其实验室不…     

分娩方式与产后抑郁症相关性Meta分析

目的了解新生儿分娩方式与产后抑郁症之间的相关性。方法将2006~2013年公开发表的关于分娩方式与产后抑郁症相关性的研究文献进行Meta分析。结果剖宫产与阴道产的产妇罹患产后抑郁症的总体效应检验Z=2.00,P=0.05;剖宫产与自然分娩的产妇罹患产后抑郁症的Z=0.08,P>0.05;剖宫产与阴道助产的产妇罹患产后抑郁症的Z=3.46,P<0.05;阴道助产和自然分娩的产妇罹患产后抑郁症的Z=3.25,P<0.05。结论相对于产后抑郁症的发生率,剖宫产与自然分娩明显优于阴道助产,差异有极显著性意义。而剖宫产与自然分娩的产妇罹患产后抑郁症的发生率差异无显著性意义。     

高效液相色谱法拆分奥硝唑对映体

目的：建立奥硝唑对映体的手性拆分方法,并用于测定左旋奥硝唑原料和制剂中的右旋异构体。方法：采用高效液相色谱法,Ultron ES OVM手性柱(150mm×4.6mm,5μm,Agilent),通过考察影响分离的一些因素,最终确定拆分的最佳条件,即以20mmol[DK]?L-1醋酸钠(pH 5.4)-乙腈（98[DK]∶2）为流动相,流速为0.6mL[DK]?min-1,检测波长为320nm。结果：在此条件下,奥硝唑对映体之间的分离度为2.5,奥硝唑对映体最小检出浓度为0.1μg[DK]?mL-1。结论：所建立的方法简便、快速,可用于分离和测定左旋奥硝唑原料和制剂中的右旋异构体。     

儿童发育性髋关节脱位切开复位手术后髋关节功能不满意的风险因素分析

目的研究发育性髋关节脱位(developmental dysplasia of the hip,DDH)切开复位术后髋关节功能不满意的风险因素。方法回顾性分析2008年1月至2015年12月我院收治的采用切开复位治疗且符合纳入标准的63例(76髋) DDH患者临床资料,平均手术年龄(48.8±26.3)个月。按手术方式分为单纯切开复位组、骨盆Salter/Pemberton截骨组以及骨盆三联截骨组。通过X线片评估患髋术前的骨性髋臼指数(acetabular index,AI)、Tnnis分级、术后AI、中心边缘角(center edge angle,CEA)、股骨头缺血性坏死(avascular necrosis of the femoral epiphysis,AVN)和Severin影像学评级。根据患髋的功能评估结果确定髋关节是否存在关节功能不满意,并分析年龄、性别、侧别、术前AI、Tnnis分级、治疗方式(骨盆截骨方式和股骨截骨)、AVN与DDH术后髋关节功能不满意之间的关系。结果末次随访时,22髋(28.9%)出现关节功能不满意。关节功能不满意组的年龄[(53.9±23.0)]个月显著大于功能满意组[(42.4±23.9)]个月,差异有统计学意义(P=0.036)。单纯切开复位组的关节功能不满意发生率(0%)显著低于骨盆Salter/Pemberton截骨组(34.8%)和骨盆三联截骨组(35.3%),差异有统计学意义(P=0.039)。有股骨截骨的患者髋关节功能不满意发生率(38.5%)显著高于无股骨截骨者(8.3%),差异有统计学意义(P=0.013)。18髋(23.7%)出现AVN,有AVN的患者关节功能不满意发生率(64.7%)显著高于无AVN组(19.3%),差异有统计学意义(P=0.001)。术前AI、性别、侧别、Tnnis脱位程度分级与关节功能不满意的发生率无关。结论骨盆截骨、股骨截骨、AVN是导致DDH切开复位术后髋关节功能不满意的风险因素。     

新时期护生实习压力来源的结构及水平的调查分析

目的了解新时期护生实习压力来源的结构及水平,为临床教学方法的改革提供参考。方法采用访谈和问卷调查法,对将于2013年毕业参加工作的100名新时期护生在实习期间产生的压力的结构及水平进行调查,并对调查数据进行统计和分析。结果新时期实习护生的压力来源为五因素结构：被认可性、临床护理能力、职业发展、现场应对和身心疲惫。结论新时期护生实习压力来源的结构及水平与以往相比发生了一定的变化,临床带教者应根据新时期护生的特点对临床教学进行适当改革,以便更好地帮助护生完成心理转变和角色适应。     

基于深度学习的口腔癌预后分析

TNM分期作为评估口腔癌患者预后的常用方法,多年临床应用证明其存在仅局限于分析患者临床病理数据的不足,难以适应现代医学的发展。深度学习(deep learning,DL)已广泛应用在人类生活的各个方面,具备高效、智能化的数据分析优势,可以充分挖掘和分析海量的医学数据,在医疗实践中的应用方兴未艾。在口腔癌预后分析方面,深度学习能够高效处理与分析分别以淋巴细胞、灰度协调矩阵(gray level coocrrencr matrix,GLCM)和基因图谱为代表的病理、放射影像和分子图像等患者资料,并据此进行准确的预后判断;通过辅助医师优化治疗方案,深度学习可以有效改善患者的生存情况。尽管目前深度学习在口腔癌患者预后研究中存在供给数据量不足、缺乏实际临床应用等缺陷,但其已展现出良好的临床应用前景。     

UC-MSC经PI3K/AKT信号通路影响人肺腺癌A549 细胞的凋亡和增殖

[摘要] 目的:探讨人脐带来源间充质干细胞（umbilical cord-derived mesenchymal stem cell, UC-MSC）经PI3K/AKT信号通路对人肺腺癌A549 细胞凋亡和增殖的影响及其作用机制。方法:采用酶消化法从人脐带组织中分离UC-MSC并进行体外培养,用流式细胞术鉴定所得到的UC-MSC的免疫表型。收集UC-MSC培养上清,建立UC-MSC条件培养基与肺腺癌A549 细胞株的体外间接共培养体系。采用CCK-8 法检测A549 细胞增殖率,通过Annexin V/PI 染色流式细胞术检测A549 细胞的凋亡率,通过PI染色法判断肿瘤细胞的细胞周期分布;qPCR实验检测CyclinD1、BAX、Bcl-2 等PI3K/AKT通路下游凋亡与增殖相关基因的转录水平;Wb测定PI3K/AKT通路相关蛋白质表达水平。结果:人脐带组织分离培养3 周后,可见纤维状细胞铺满培养瓶,平行排列或呈旋涡状生长。流式细胞术检测发现所得细胞表达MSC标志分子CD73、CD90、CD105,不表达CD45 和HLA-DR。UC-MSC条件培养基与肺腺癌A549 细胞株在体外间接共培养后,与对照组比较,A549 细胞的增殖率明显降低、凋亡率明显升高,其细胞周期明显停滞在G1期（均P<0.01）。PI3K/AKT信号通路相关分子CyclinD1 和Bcl-2 转录下调、BAX的转录上调（均P<0.01）;UCMSC条件培养基培养的A549 细胞总AKT水平不变,p-AKT蛋白表达呈剂量性依赖下降（P<0.01）。结论:UC-MSC明显影响肺腺癌A549 细胞的增殖和凋亡能力,细胞周期停滞在G1 期,其主要作用机制是UC-MSC抑制A549 细胞PI3K/AKT信号通路,为探索UC-MSC临床应用的安全性和有效性提供实验依据。     

子宫、阴道-膀胱平滑肌肉瘤1例并文献复习

平滑肌肉瘤(leiomyosarcoma)是一种好发于消化道和子宫的恶性软组织肿瘤,占成人软组织肿瘤发病率的5%-10%。而发生于阴道、膀胱者极为罕见,近40年以来分别报道140例及70余例[1],国内偶有个案报道。本院收治1例子宫、阴道-膀胱平滑肌肉瘤患者。现结合文献复习报道如下。