孕妇外周血游离胎儿 DNA 用于无创产前检测的研究进展

产前检查的主要目的对出生之前胎儿的染色体及基因的异常进行确诊,对家庭的优生优育以及预防控制新生儿发病都有十分重要的临床意义。传统的侵入性产前检查,包括：羊膜穿刺、绒毛取样（chorionic vil－lous sampling,CVS）和脐带血穿刺,都可能对胎儿及孕妇产生一定的危害,并存在0．5％～1％流产的风险。利用微创或非创伤性的方法检测胎儿遗传性状的方法一直是科研及临所求追的目标,孕妇外周血游离胎儿DNA（cell－free fetal DNA,cffDNA）的发现则为无创产前检测（non－invasive prenatal testing,NIPT）技术提供了一个全新的策略,并且在临床上得到广泛的应用。特别是近年来快速发展的大规模平行测序（massively parallel sequencing,MPS）技术,更加提高了检测的灵敏度和特异性,使得外周血 cffDNA 应用于胎儿性别、血型、单基因病、染色体相关疾病的检测方面,都得到了长足的发展。本文将对孕妇外周血 cffDNA 作简要介绍及近年来在临床的应用作一综述。     

自然周期IVF囊胚移植成功一例分析

自然周期IVF-ET是通过妇女自然月经周期排卵时取出的一个卵子,经体外授精并培养到4～8细胞期胚胎后移植到妇女宫腔内着床、妊娠的技术.上世纪70年代,世界首例试管婴儿就是采用此技术成功的.由于当时技术条件等因素的限制,导致成功率低而被淘汰.现在由于IVF-ET技术的迅猛发展,特别是取卵以及胚胎体外培养技术的改善,使胚胎着床率得到了显著的提高,因此自然周期IVF-ET技术近年来又重新得到了认可.鉴于该技术有低费用、高安全的优点,有学者建议对于年轻、输卵管因素不孕的妇女应首选自然周期IVF-ET技术助孕[1-4].我中心对一名符合条件的妇女采用该方法结合囊胚培养和移植技术治疗获得成功妊娠.报道如下.     

328对妊娠胎儿丢失夫妇外周血染色体分析

妊娠胎儿丢失包括反复流产、死胎及畸胎。大量的研究资料证明,染色体异常是导致妊娠胎儿丢失的重要细胞遗传学因素。我院自1980年起对328对妊娠胎儿丢失的夫妇作了染色体检查,现将结果报道如下:     

金黄地鼠卵子的冷冻及临床应用

目的用冷冻金黄地鼠卵子替代新鲜金黄地鼠卵子做穿卵实验,并应用于临床.方法先将金黄地鼠卵子进行冷冻,再通过解冻观察其卵子复苏率.将复苏后卵子进行金黄地鼠穿卵试验,观察穿透率和受精指数.结果观察319个冷冻卵子,平均复苏率95.29%.金黄地鼠穿卵试验:新鲜金黄地鼠卵子37个,穿透率为43.24%,受精指数0.73.冷冻金黄地鼠卵子27个,穿透率为50.0%,受精指数0.50.冷冻金黄地鼠卵子与新鲜金黄地鼠卵子在穿透率和受精指数上无明显差异.结论冷冻金黄地鼠卵子完全可以替代新鲜金黄地鼠卵子做穿卵试验,并应用于临床.     

298例男性不育症患者细胞遗传学分析

对 2 98例不育男性进行细胞遗传学检查 ,发现 36例染色体异常核型 ,占受检者的 12 0 8% ,其中性染色体数目异常 14例 ,占异常核型 38 89% ,嵌合体 6例 ,占异常核型 16 6 7%。常染色体异常 7例 ,占异常核型 19 4 4 %。     

孕早期宫颈分泌物中获取胎儿细胞DNA进行产前诊断的可行性

目的：探索获取胎儿细胞DNA用于产前基因诊断的可行性，及能否用于预期胎儿性别。方法：收集92例孕早期人工流产妇女宫颈分泌物和绒毛组织，提取宫颈分泌物中DNA，扩增Y染色体特异重复序列DNA。短期培养制备绒毛染色体，分析核型确定流产胎儿性别。结果：92例经绒毛染色体核型分析的人工流产胎儿中，正确预期胎儿性别72例，准确率78％。结论：采集孕早期宫颈分泌物，可获得胎儿滋养层细胞DNA用于产前诊断，其准确性和可靠性有待进一步提高。     

河北中南部地区汉族群体15个STR基因座遗传多态性研究

目的 研究PowerplexTM 16荧光标记复合扩增系统的15个STR基因座在河北中南部地区汉族个体的多态性分布,建立河北中南部地区汉族群体的遗传学基础数据.方法 采用Chelex-100法应用PowerplexTM 16荧光标记复合扩增系统和ABI 3130遗传分析仪对25295例河北中南部地区汉族个体血样DNA进行检测,统计15个STR基因座的基因型分布、基因频率、杂合度(heterozygosity,Ho)、多态信息量(polymorphism information contents,PIC)、个体识别率(discrimination power,DP)、非父排除率(probability of paternity exclusion,PE)等群体遗传学参数,并进行Hand-y-Weinberg平衡检验.结果 15个基因座在群体中具有较高多态性,基因型分布均符合Handy-Weinberg平衡定律(P>0.05).共检测出293个等位基因,1364种基因型,基因频率在0.002%~51.58%之间,Ho在0.6206~0.9146之间,PIC在0.5610~0.8967之间;累积个人识别率为0.999999999999999996156,累积非父排除率为0.999999663.结论 PowerplexTM 16荧光标记复合扩增系统的15个STR基因座适合作为河北中南部汉族群体的遗传标记.     

注意缺陷多动障碍与多巴胺-β-羟化酶基因的关联

目的 探讨注意缺陷多动障碍与多巴胺-β-羟化酶(DBH)基因内含子5 Taq Ⅰ酶切位点多态性是否关联.方法 采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术,检测117例汉族注意缺陷多动障碍患儿及186名正常人群的DBH基因Taq Ⅰ位点的基因型及等位基因.结果 注意缺陷多动障碍患儿与正常对照组Taq Ⅰ位点的3种基因型比较,差异有高度统计学意义(χ2=10.35,P=0.006),等位基因之间比较,差异也有高度统计学意义(χ2=10.60,P=0.001).A1的OR95%CI为0.24～0.70,A2的OR95%CI为1.43～4.17.注意缺陷为主型Taq Ⅰ位点的3种基因型比较(χ2=7.58,P=0.023),等位基因比较(χ2=7.30,P=0.007),差异均有统计学意义.结论 DBH内含子5 Taq Ⅰ A2/A2基因型和A2等位基因,可能有增加注意缺陷多动障碍的患病趋势,是危险因子;A1可能有减少注意缺陷多动障碍的患病趋势,是保护因子.     

幼儿急疹合并粒细胞减少症30例临床分析

幼儿急疹是婴幼儿时期常见的高热、出疹性疾病,无性别差异,多发于春秋季节.近3年我院门诊及住院确诊为幼儿急疹的患儿100例,现报道如下. 1 资料与方法 1.1 一般资料在2010年1月-2013年3月我院共确诊幼儿急疹患儿100例,男46例,女54例;3~6个月63例,6个月~1岁28例,1~2岁9例;合并支气管肺炎2例,高热惊厥5例.