肾上腺髓质素减轻载脂蛋白E~(-/-)小鼠动脉粥样硬化发生发展

背景与目的肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)是由52个氨基酸残基组成的调节循环系统功能稳态的多功能肽。本工作观察高脂膳食载脂蛋白E-/-小鼠动脉ADM及其受体系统—降钙素受体样受体(calcitonin receptor-like receptor,CRLR)和受体活性修饰蛋白(receptor activity modifying     

钙化血管平滑肌细胞肾上腺髓质素及其受体系统的基因表达上调

探讨钙化的血管平滑肌细胞肾上腺髓质素生成和肾上腺髓质素受体系统一降钙素受体样受体和受体活性修饰蛋白基因表达的改变及其病理意义。采用β-甘油磷酸盐诱导培养的大鼠血管平滑肌细胞钙化;放射免疫法测定血管平滑肌细胞分泌的肾上腺髓质素含量;半定量逆转录聚合酶链反应测定细胞肾上腺髓质素、降钙素受体样受体和受体活性修饰蛋白的mRNA水平;原子吸收分光光度计测定细胞钙含量;碱性磷酸酶试剂盒测定血管平滑肌细胞碱性磷酸酶活性;β液体闪烁计数仪测定45Ca2+放射活性。结果发现,与非钙化血管平滑肌细胞比较,钙化血管平滑肌细胞内钙含量、45Ca2+摄入及碱性磷酸酶活性分别增加118％、174％和7倍(P<0.01);钙化细胞肾上腺髓质素分泌量增高99％(P<0.01),肾上腺髓质素、降钙素受体样受体、受体活性修饰蛋白2和3的mRNA水平分别增加78％、93.7％、91.8％和109.5％(P均<0.01)。肾上腺髓质素与降钙素受体样受体、受体活性修饰蛋白2和3的mRNA水平呈正相关,其相关系数分别为0.83、0.92和0.93(P均<0.01)。结果提示,血管平滑肌细胞肾上腺髓质素 旁/自分泌功能改变可能参与血管钙化的调节过程。     

外源性硫化氢对大鼠血管钙化的影响

目的观察外源性给予硫化氢(H2S)对血管钙化的影响。方法用肌注维生素D3和灌胃尼古丁诱导大鼠血管钙化,运用Von Kossa染色、原子吸收测定钙含量4、5Ca2 沉积及碱性磷酸酶(ALP)活性测定判断血管钙化程度,半定量RT-PCR方法测定骨桥蛋白(OPN)mRNA水平。结果钙化组大鼠血管Von Kossa染色见平滑肌细胞内和细胞间基质有大量黑色颗粒聚集;主动脉钙含量、45Ca2 沉积及ALP活性分别较对照高6.8倍、1.4倍和1.9倍(P<0.01),OPN mRNA表达明显上调;低、高剂量NaHS组均明显缓解上述指标的变化(P<0.01)。结论补充H2S可减轻钙化血管的钙化程度。     

心血管组织钙化时内源性硫化氢系统下调

目的：观察心血管组织钙化时内源性硫化氢生成系统(CSE/H2S)的变化，以探讨内源性硫化氢在心血管组织钙化中的作用及血管钙化的细胞分子机制。方法：在维生素D3 (Vit D3)和尼古丁(nicotine)诱导大鼠血管钙化模型上，测定钙含量、［45Ca2+］沉积及碱性磷酸酶（ALP）活性判断心血管钙化程度,采用生化法测定血浆、心肌组织和主动脉H2S含量及CSE活性，半定量RT-PCR方法测定心血管组织CSE mRNA水平。结果：钙化组大鼠心肌组织钙含量较对照组高3.8倍,主动脉钙含量、［45Ca2+］ 沉积及ALP 活性分别较对照组高6.8倍、1.4倍和 1.9倍（P＜0.01）；钙化组大鼠血浆H2S含量较对照组低39%（P<0.01），心肌和主动脉组织的 H2S含量也分别较对照组低39%和31%，CSE mRNA表达也分别低28％和36％（P<0.01），CSE活性分别低56%和53%(P<0.01)。结论：钙化心血管组织CSE/H2S通路受抑制，内源性H2S生成减少。     

雌激素减轻大鼠血管钙化的实验研究

目的探讨雌性激素在血管钙化中的作用。方法制备30例维生素D3加尼古丁诱导雌性大鼠血管钙化模型,比较去势和去势补充雌激素对血管钙化的影响。放射免疫法测定血浆雌激素水平,并进行VonKossa染色、钙含量、45Ca2+沉积及碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性测定。结果钙化组大鼠血管主动脉平滑肌细胞及其间质内有大量黑色颗粒沉积,主动脉钙含量、45Ca2+沉积及ALP活性分别较对照高2.5倍、3.3倍和2.4倍(均P<0.01)。预先去势的动物(去势+钙化组)钙含量、45Ca2+沉积及ALP活性分别较单纯钙化组升高28%、34%和20%(均P<0.01)。补充雌激素减轻去势+钙化组钙含量、45Ca2+及ALP活性分别低37%、37%和31%(均P<0.01)。结论去卵巢大鼠主动脉钙化程度加重,补充雌激素能减轻钙化,提示雌激素具有保护血管、拮抗钙化的效应。     

丹酚酸B后给药对脂多糖引起的大鼠肠系膜细静脉微血管通透性变化的作用及机制

<正>目的:探讨丹酚酸B后给药对脂多糖(LPS)引起的大鼠肠系膜细静脉血管通透性变化的改善作用及其机制。方法:实验取雄性SD大鼠,分为对照组、丹酚酸B本底组、LPS模型组和LPS+丹酚酸B后给药组。     

中国中西医结合学会2008微循环学术大会纪要

由中国中西医结合学会微循环专业委员会主办的2008微循环学术大会于6月6日-8日在北京大学医学部召开。北京大学基础医学院中西医结合教研室主任、北京大学医学部天士力微循环研究中心主任韩晶岩教授任大会主席。     

感染性休克大鼠内源性Apelin及其受体系统表达下调

目的观察内源性Apelin及其受体（血管紧张素受体AT1相关蛋白,APJ）在盲肠结扎和穿孔所致感染性休克大鼠的变化。方法20只雄性Wistar大鼠,体重220～250g,随机分为假手术对照组和晚期休克组。酶联免疫法测定血浆和心肌中Apelin含量,RT-PCR法测定心肌组织Apelin、APJ mRNA水平,Western blot方法测定心肌组织中APJ蛋白水平。结果与假手术组比较,休克组大鼠＋LVdP/dtmax和-LVdP/dtmax明显降低;左心室舒张末期压（LVEDP）增高,平均动脉压降低,心率增快;有严重低血糖症和高乳酸血症。血浆和心肌Apelin含量明显降低（P〈0.01）,心肌组织Apelin、Apelin受体APJ mRNA水平显著下降（P〈0.01）,心肌组织APJ蛋白水平明显降低（P〈0.01）。结论Apelin及其受体系统下调在感染性休克发生发展中可能有重要作用。     

Apelin对异丙基肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血性损伤的影响

目的：探讨心血管活性肽apelin及其受体APJ在异丙基肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血损伤中的变化及意义。 方法： 皮下注射异丙基肾上腺素（ISO）复制大鼠心肌缺血损伤模型，放射免疫分析法检测血浆和心肌apelin的含量，半定量RT-PCR方法检测心肌apelin和APJ mRNA水平；股静脉注射10 nmol/kg apelin观察其对大鼠心脏功能的影响。 结果： ISO处理组大鼠广泛心内膜下心肌缺血损伤、心功能抑制，血浆、心房和心室肌apelin水平较对照动物明显降低，心室肌apelin和APJ基因表达下调（均P<0.01）；ISO+apelin处理组大鼠较单纯ISO组心内膜下心肌缺血损伤减轻，心功能明显增强。股静脉单次注射apelin（10 nmol/kg）后，正常大鼠平均血压较给药前下降15％（P<0.05），ISO组大鼠平均血压较给药前高27%（P<0.05），LV±dp/dtmax分别较给药前增高51%和53%（均P<0.01），LVESP升高23%，LVEDP降低27%（均P<0.05）。 结论： 外源性apelin可明显减轻ISO诱导的大鼠心肌缺血损伤，改善心力衰竭，apelin/APJ系统有可能是心肌缺血和心衰防治的新靶点。