丹酚酸B对培养的新生大鼠海马神经元的影响

目的:本研究旨在观察丹酚酸B对体外培养新生大鼠海马神经元的影响,为丹酚酸B对中枢神经系统的作用提供实验依据。方法:体外培养新生大鼠海马神经元,神经元微管相关蛋白-2(MAP-2)免疫荧光染色对培养细胞进行鉴定,实验分为对照组和给药组(终浓度分别为5 mg/L和10 mg/L),荧光显微镜下观察细胞形态,MTT比色法检测丹酚酸B对海马神经细胞的活性,细胞核染色(DAPI)观察丹酚酸B对海马神经细胞增殖的影响。结果:免疫荧光染色显示细胞呈MAP-2阳性,丹酚酸B作用7 d后,能明显促进海马神经细胞的存活与增殖,且10 mg/L的丹酚酸B作用更明显。结论:丹酚酸B能明显促进海马神经细胞的存活与增殖,提示其具有改善脑功能的重要作用。     

丹酚酸B对家兔血液流变性的影响

目的 :观察丹酚酸B静脉注射给药对家兔血液流变性的影响。方法 :静脉注射不同浓度丹酚酸B后检测正常家兔血液流变学指标并分析其变化。结果 :静脉注射丹酚酸B 2mg/kg、6mg/kg、18mg/kg对家兔全血粘度、红细胞压积有明显的降低作用 ,并对血浆粘度、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数也有一定的降低作用。结论 :丹酚酸B静脉注射给药对家兔血液流变性有明显的改善作用     

丹酚酸B对脂多糖诱导许旺细胞损伤的保护作用机制

背景：丹酚酸B是中药丹参的有效单体成分,近年已被证实有保护神经、促进神经损伤恢复的作用,但其机制尚未清楚。 目的：探讨丹酚酸B对脊髓损伤大鼠许旺细胞的保护机制。 方法：实验分为正常组、模型组、10 μmol/L甲强龙组、丹酚酸B组(0.1,1,10,100 μmol/L)。除正常组外,其他3组建立脂多糖诱导建立许旺细胞损伤模型,后2组进行对应的药物干预。以此观察丹酚酸B对脊髓损伤大鼠许旺细胞生长曲线、增殖活性、β-catenin和核因子κB蛋白与基因的表达情况。 结果与结论：干预48,72,96 h,模型组细胞活性与正常组比较显著减低(P < 0.01),与模型组比较,干预72,96 h,丹酚酸B组(10 μmol/L)细胞活性较模型组显著升高(P < 0.05)。干预72 h时,与模型组比较,甲强龙组和丹酚酸B组许旺细胞核因子κB mRNA和蛋白表达显著降低(P < 0.01),丹酚酸B组β-catenin mRNA和蛋白表达显著升高(P < 0.05)。说明丹酚酸B能够改善脂多糖刺激的大鼠许旺细胞活性损伤;同时抑制脂多糖诱导的大鼠许旺细胞核因子κB基因和蛋白的表达,促进β-catenin基因和蛋白的表达,这可能是其许旺细胞保护作用机制之一。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

丹酚酸A对缺血性脑卒中模型大鼠海马区蛋白影响的串联质谱标签蛋白组学分析北大核心

背景:丹酚酸A对缺血性脑卒中后缺血侧海马区蛋白表达的影响及其作用机制尚未明确。目的:观察丹酚酸A对缺血性脑卒中大鼠海马区蛋白差异表达的影响,探讨其可能的神经保护机制。方法:采用改良Longa方法制备缺血性脑卒中大鼠模型,造模后随机分为生理盐水组与丹酚酸A组(n=6)。丹酚酸A组于线栓拔出后尾静脉注射2 mg/kg丹酚酸A;生理盐水组注射等体积的生理盐水。采用改良神经功能缺损评分标准评价大鼠神经功能;T2加权成像检测脑梗死体积;旷场实验及Morris水迷宫测试观察各组大鼠的自主行为、学习记忆能力;串联质谱标签定量蛋白组学技术分析缺血性脑卒中模型大鼠缺血侧海马区蛋白的差异表达。结果与结论:①与生理盐水组相比,丹酚酸A组大鼠改良神经功能缺损评分显著降低;②T2加权成像显示,丹酚酸A组较生理盐水组脑梗死体积明显减少;③旷场实验结果发现,丹酚酸A组大鼠自主活动及自由探索行为表现更佳;④Morris水迷宫测试结果表明,丹酚酸A组大鼠在定向航行实验中逃避潜伏期明显缩短、穿越平台次数相较于生理盐水组显著增加;⑤缺血侧海马区差异蛋白质分析结果发现,丹酚酸A组与生理盐水组之间筛选出50个上调及3个下调差异蛋白;基因本体论分析表明它们主要参与binding,catalytic activity等分子功能;京都基因和基因组百科全书信号通路分析显示,它们主要涉及Complement and coagulation cascades,Staphylococus aureus infection等信号通路;⑥结果显示,丹酚酸A可能通过调控缺血性脑卒中大鼠缺血侧海马区差异蛋白、补体及凝血级联信号通路,对缺血性脑卒中大鼠发挥神经保护作用。     

丹酚酸B保护缺糖缺氧/复糖复氧神经元的作用机制研究

目的： 通过建立大鼠皮层神经元缺糖缺氧/复糖复氧性损伤模型,探讨丹酚酸B保护神经元的作用机制。方法: 将原代培养的大鼠皮层神经元随机分为正常组、缺糖缺氧/复糖复氧组和丹酚酸B治疗组,复制缺糖缺氧3 h后复糖复氧24 h的细胞模型。采用MTT法观察神经元的活性,比色法测定乳酸脱氢酶（LDH）漏出率,流式细胞仪检测线粒体膜电位（MMP）及细胞凋亡率,激光扫描共聚焦显微镜测定细胞内游离钙水平,以及 Hoechst 33342染色观察细胞核的形态变化。结果: 与缺糖缺氧/复糖复氧组相比,丹酚酸B可提高神经元的活性、存活率以及MMP荧光值（P<0.05,P<0.01）,同时可降低LDH漏出率、细胞内钙荧光强度和凋亡率（P<0.01）;荧光染色显示,丹酚酸B可减轻缺糖缺氧/复糖复氧诱导的细胞核的损伤。结论: 维持MMP和钙稳态可能是丹酚酸B保护缺糖缺氧/复糖复氧处理的神经元的作用机制。     

丹酚酸B对人脐带间充质干细胞向胆碱能神经元分化的影响

目的:评估不同剂量丹酚酸B联合脑源性神经营养因子(BDNF)对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)向胆碱能神经元分化的影响。方法:流式细胞技术鉴定培养的hUCMSCs细胞表型;MTT法评估丹酚酸B浓度对hUCMSCs细胞增殖生存率的影响;观察3种不同剂量丹酚酸B联合BDNF诱导hUCMSCs分化后的细胞形态学变化;ELASA法测定培养上清液中乙酰胆碱(Ach)浓度,免疫组化法测定细胞神经巢蛋白(Nsetin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胆碱乙烯转移酶(ChAT)表达水平。结果:hUCMSCs细胞表型具有干细胞的表型特征,丹酚酸B随着作用浓度的增大对hUCMSCs的增殖具有抑制作用。丹酚酸B联合BDNF诱导分化后的hUCMSCs可见神经元样分化及轴突形成的网状结构;上清液Ach浓度和细胞Nestin、NSE及ChAT表达率,在中、高剂量联合组中的表达均高于低剂量联合组和BDNF组(P0.05),而中、高剂量联合组之间差异不显著。结论:丹酚酸B联合BDNF能提高hUCMSCs向胆碱能神经元分化效率,丹酚酸B的最宜诱导分化浓度为50 mg/L。     

丹酚酸B缓释羟基磷灰石颗粒与成骨细胞的活性

背景:前期实验制备了羟基磷灰石颗粒堆积型多孔支架,可通过调节羟基磷灰石颗粒的尺寸及微观空隙结构更好地构建修复超临界尺寸的生物陶瓷支架。如果再将一些可促骨愈合的药物负载其上,既可控制药物的局部浓度以提高利用率,增加专一性、又可降低不良反应,加快骨愈合。目的:观察载丹酚酸B缓释羟基磷灰石颗粒对体外培养成骨细胞活性的影响。方法:分离培养SD大鼠成骨细胞,将羟基磷灰石颗粒、无壳聚糖包裹的丹酚酸B缓释羟基磷灰石颗粒、壳聚糖包裹的丹酚酸B缓释羟基磷灰石颗粒分别与成骨细胞共培养,采用AlamarBlue法检测各组成骨细胞增殖活性;碱性磷酸酶活性检测各组成骨细胞分化情况;免疫细胞化学染色观察各组成骨细胞中Ⅰ型胶原和骨钙素表达。结果与结论:壳聚糖包裹的丹酚酸B缓释羟基磷灰石颗粒能显著促进SD大鼠成骨细胞的增殖,同时加强碱性磷酸酶表达,其效应持续时间高于羟基磷灰石组、无壳聚糖包裹的丹酚酸B缓释羟基磷灰石组;Ⅰ型胶原和骨钙素表达与羟基磷灰石组无差异。而无壳聚糖包裹的丹酚酸B缓释羟基磷灰石组由于药物的突释对细胞造成毒性,从第2天细胞开始皱缩以致死亡。说明壳聚糖包裹的丹酚酸B缓释羟基磷灰石颗粒在较长时间内具有促进成骨细胞增殖和分化,对成骨细胞的生物学活性无影响,并保持成骨细胞的生物学活性。     

丹酚酸B对糖尿病大鼠血管舒张功能、NF-κB活化及炎症因子表达的影响

目的:研究丹酚酸B对糖尿病大鼠血管舒张功能的改善作用及其可能机制。方法:SD大鼠40只,采用高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素方法建立糖尿病大鼠模型(随机血糖16.7 mmol/L)。将糖尿病大鼠随机分为模型组、Sal B高剂量(160 mg·kg~(-1)·d~(-1))组和Sal B低剂量(80 mg·kg-1·d-1)组,另取10只正常大鼠作为对照组。丹酚酸B组每日灌胃给予相应剂量丹酚酸B,共6周。采用离体动脉环实验检测血管舒张功能,HE染色观察大鼠主动脉病理学变化,ELISA法测定血清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及C反应蛋白(CRP)水平,比色法测定血管组织中总抗氧化能力、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)水平,Western blot法检测主动脉细胞间黏附分子1(ICAM-1)和单核细胞趋化因子1(MCP-1)的蛋白表达水平以及核因子κB(NF-κB)的活化水平。结果:丹酚酸B明显减轻糖尿病大鼠主动脉病变,改善血管舒张功能,提高血管组织总抗氧化能力和NO水平,降低组织MDA以及血清IL-6、TNF-α和CRP水平(P0.05或P0.01),并减少主动脉NF-κB p65亚基核转位及ICAM-1和MCP-1蛋白表达水平(P0.05或P0.01)。结论:丹酚酸B可明显改善糖尿病大鼠血管舒张功能,其机制可能与改善机体氧化应激状态、抑制NF-κB活化而减轻血管炎性病变有关。     

丹酚酸B 诱导血管新生和缓解氧化应激对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织损伤的保护作用

目的:探究丹酚酸B(Sal B)对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织血管生成、氧化应激反应的影响以及对脑组织损伤的保护作用。方法:将40只SD大鼠分成4组:健康组(Ctrl);加药组:健康大鼠腹腔注射丹酚酸B 50 mg/kg体重;模型组:参考文献建立局灶性脑缺血再灌注(MCAO)大鼠模型;模型加药组(MCAO+Sal B):在建模前3 d向大鼠腹腔注射Sal B50 mg/kg BW,每天1次,再灌注后2 h给药;各组大鼠在建模后24 h处死。苏木素伊红(HE)染色检测各组大鼠脑组织病理损伤。TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡。试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量。免疫组化检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达情况。Western blot检测血管内皮生长因子(VEGF)及其受体VEGFR2的表达,检测p38、Hsp27的磷酸化水平。结果:与对照组相比,模型组大鼠脑组织出现显著的组织病变;凋亡细胞比率明显升高(P0. 01); SOD含量明显下降,MDA和LDH的含量明显上升(P0. 01); ICAM-1的表达显著上调(P0. 01); VEGF及受体分子VEGFR2的表达显著下调(P0. 01); p38和Hsp27的磷酸化水平显著降低(P0. 01)。模型加药组与模型组相比较,大鼠脑组织病理损伤明显减轻;凋亡细胞显著减少(P0. 01); SOD含量显著上升,MDA和LDH的含量显著下降(P0. 01); ICAM-1蛋白表达显著下调(P 0. 01); VEGF和VEGFR2的表达显著上调(P 0. 01); p38和Hsp27的磷酸化水平显著提高(P 0. 01)。结论:丹酚酸B可能通过诱导血管新生、缓解氧化应激反应,对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织具有保护作用。     

丹参、三七及其主要成分对大鼠肠系膜细静脉血栓形成的抑制作用

<正>目的:探讨丹参、三七及其主要成分(丹参素、丹酚总酸、丹酚酸A、丹酚酸B,三七总皂苷、三七皂苷Rb1、Rg1、R1)以及两对照药(阿司匹林和SOD)对血栓形成的抑制作用。     

丹酚酸B对活化的系膜细胞TGF-β_1受体和Smad2表达的影响

目的:通过观察丹酚酸B对活化的系膜细胞转化生长因子β1(TGF-β1)受体和Sma与Mad的同源基因2(Smad2)分子表达的影响,探讨丹酚酸B拮抗系膜细胞活化及肾纤维化的机制。方法:分离纯化大鼠肾小球系膜细胞,TGF-β1刺激建立系膜细胞活化模型并检测Smad2、Smad7信号分子表达。丹酚酸B(剂量分别为10-6mol/L、10-5mol/L)进行干预,免疫荧光及蛋白印记法观察对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响,蛋白免疫印迹法检测系膜细胞TGF-β1两型受体(TβRⅠ、TβRⅡ)和Smad2信号分子表达的变化。结果:5μg/L TGF-β1刺激系膜细胞24h可成功制备系膜细胞活化模型,在系膜细胞活化早期即可见Smad2分子的显著磷酸化;10-6mol/L、10-5mol/L丹酚酸B均可明显抑制其活化标志蛋白α-SMA的表达;丹酚酸B干预可致系膜细胞TGF-β1两型受体表达减少,Smad2的磷酸化状态被抑制。结论:丹酚酸B可通过抑制大鼠肾小球系膜细胞TβRⅠ、TβRⅡ表达和信号分子Smad2的磷酸化而拮抗其活化,这可能是丹酚酸B抗肾纤维化的细胞学机制之一。     

丹酚酸B对骨髓间充质干细胞增殖和血管内皮生长因子表达的影响

目的 体外分离、培养和纯化大鼠骨髓间充质干细胞(MSC),并研究中药单体丹酚酸B对MSC增殖和分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法 用贴壁培养法分离、培养和纯化MSC.免疫荧光法检测细胞抗原CD44和CD34.用含不同浓度丹酚酸B的低糖DMEM培养液培养MSC 24 h后,用MTT法检测细胞增殖水平.RT-PCR检测培养24 h、48 h、72 h 后VEGF mRNA的表达.结果 获得纯化的MSC,免疫荧光检测细胞表面标记CD44呈阳性,CD34呈阴性.MTT结果 显示,0.3 mg/L和3 mg/L丹酚酸B均可促进MSC的增殖,与空白对照组差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),而003 mg/L和30 mg/L丹酚酸B组细胞的增殖与空白对照组差异均无统计学意义(P>0.05).随着培养时间的增加,0.03、0.3、3和30 mg/L丹酚酸B均可明显促进VEGF mRNA的表达,与空白对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),而空白对照组的VEGF mRNA表达无明显变化.结论 用贴壁培养法可获得纯化的MSC.丹酚酸B可促进MSC增殖和VEGF mRNA的表达.     

人参二醇组皂苷对脂多糖攻击大鼠脑皮质NF-κB的影响

目的： 观察人参二醇组皂苷对脂多糖(LPS)攻击大鼠脑皮质NF-κB的影响。方法: 大鼠随机分为实验对照（control）组、脂多糖（LPS）组、脂多糖加地塞米松（LPS+Dex）组和脂多糖加人参二醇组皂苷（LPS+PDS）组。大鼠静脉注射LPS（4 mg·kg^-1）1 h、4 h后检测脑皮质NF-κB的变化。结果:EMSA实验显示人参二醇组皂苷可抑制LPS攻击后1 h、4 h NF-κB的DNA结合活性；抑制细胞核p65和p50蛋白的表达。结论:LPS休克早期脑组织细胞NF-κB激活入核，人参二醇组皂苷通过抑制其活性而减轻脑组织损伤。     

丹酚酸B及丹参酮ⅡA诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞

背景：目前大多数研究者采用5-氮胞苷诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞,存在着一定的不良反应,难以应用于临床。中药丹参本身在临床上广泛用于治疗心血管系统疾病,其主要化学成分为丹酚酸 B和丹参酮ⅡA。 目的：观察丹酚酸B及丹参酮ⅡA联合诱导骨髓间充质干细胞定向分化为心肌样细胞的效果。 方法：取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养骨髓间充质干细胞,应用丹酚酸B、丹参酮ⅡA及二者联合分别对第2代骨髓间充质干细胞定向诱导,不加诱导剂为空白对照组。3 d后各实验组去除诱导培养基,用正常培养基继续培养4周。 结果与结论：空白对照组细胞结蛋白、α-横纹肌肌动蛋白、肌钙蛋白T及缝隙连接蛋白43均为弱阳性或阴性表达。与空白对照组相比,丹酚酸B组,丹参酮ⅡA组,丹酚酸B+丹参酮ⅡA组骨髓间充质干细胞各标记物阳性表达均明显升高,且差异有显著性意义(P < 0.01)。其中,二者联合诱导组各标记物的阳性率均最高。荧光免疫细胞化学鉴定可见诱导组细胞质内结蛋白的表达呈红色,肌钙蛋白T的表达呈绿色,当两者同时被观察时可见其重叠的部位变成黄色。结果显示丹酚酸B及丹参酮ⅡA均可分别诱导骨髓间充质干细胞获得心肌分化表型,且二者联合诱导效果最好。     

丹酚酸B对APP/PS1小鼠学习记忆及氧化应激的作用及可能机制

目的 探讨丹酚酸B对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力、氧化应激水平及Nrf-2/HO-l信号通路的影响.方法 将7月龄的APP/PS1小鼠随机分为模型组、丹酚酸B低剂量组(30mg/kg)及丹酚酸B高剂量组(60 mg/kg),并取同龄C57BL/6小鼠作为对照组,每组10只,连续灌胃给药8周.Morris水迷宫观察各组小鼠学习与记忆能力;TUNEL染色检测小鼠海马区域细胞凋亡情况;试剂盒检测小鼠海马区域SOD、GSH-Px活性及MDA含量;Western Blot检测Nrf-2/HO-1信号通路相关蛋白Nrf-2、Keap-1及HO-1表达情况.结果 丹酚酸B低、高剂量均能改善小鼠的学习与记忆能力,表现为小鼠逃避潜伏期明显缩短,目标象限停留时间延长,穿越平台次数相应增加,海马区域细胞凋亡数量显著降低(P＜0.05),提高SOD及GSH-Px活性,降低MDA含量,上调细胞核中Nrf-2及HO-1蛋白表达,下调Keap-1蛋白表达(P＜0.05).结论 丹酚酸B改善APP/PS1小鼠学习与记忆能力,降低氧化应激水平,与激活Nrf-2/HO-1信号通路相关.     

丹酚酸B减轻骨关节炎模型大鼠软骨组织损伤

目的 探究丹酚酸B对骨关节炎模型大鼠的软骨组织损伤、低氧诱导因子-1(HIF-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法 构建骨关节炎模型大鼠，大鼠随机分为假手术组、骨关节炎组[切断交叉韧带法(ACLT)]、尼美舒利组、丹酚酸B高(40 mg/kg)和低(10 mg/kg)剂量组及丹酚酸B+HIF-1激活组，每组12只。显微CT机检测关节处骨结构；番红固绿染色和Masson染色观察软骨组织病理学变化；检测血清白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的活性；Western blot检测软骨组织HIF-1、VEGF、基质金属蛋白酶13(MMP-13)及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(ceaved caspase-3)表达。结果 与假手术组相比，骨关节炎组软骨组织损伤严重，踝骨骨体积分数(BV/TV)降低，踝骨表面积与骨体积比值(BSA/BV)、血清中IL-6、TNF-α含量、iNOS活性、软骨HIF-1、VEGF、MMP-13及cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05);与骨关节炎组相比，尼美舒利组、丹酚酸B高...     

不同药物对青春前期大鼠睾丸扭转复位健侧睾丸的远期影响

目的:观察牛磺酸、丹血通(丹参联合血栓通)和灯盏花素对青春前期大鼠睾丸扭转复位后健侧睾丸的远期影响及其保护作用,比较3种药物对抗睾丸缺血再灌注损伤的保护作用。方法:64只4周龄健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、牛磺酸单次和连续给药组、丹血通单次和连续给药组以及灯盏花素单次和连续给药组,每组8只,建立左侧睾丸扭转复位动物模型(720°,2 h)。于术后6周处死大鼠,取右侧睾丸及附睾,检测睾丸组织总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、一氧化氮合酶(NOS)活性和丙二醛(MDA)含量,测定精子畸形率和精子活动率和精子浓度,行睾丸组织病理学观察。结果:与模型组相比,3个连续组的SOD活性、TAOC、精子活动率和精子浓度均增加,MDA含量和精子畸形率均降低(P0.05)。3个单次组的SOD活性和精子活动率(除灯盏花素单次组)均增加,MDA含量和精子畸形率均降低,牛磺酸单次组T-AOC和精子浓度增加(P0.05)。模型组可见生精小管退变,间质水肿,其它给药组睾丸扭转复位诱发的组织学改变明显改善。结论:青春前期大鼠单侧睾丸扭转复位后可致健侧睾丸缺血再灌注损伤,牛磺酸、丹血通和灯盏花素均对青春前期大鼠睾丸扭转复位后健侧睾丸远期功能恢复起到一定的保护作用,其作用效果牛磺酸明显优于丹血通和灯盏花素,丹血通明显优于灯盏花素,且连续给药明显优于单次给药。     

丹酚酸B对高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化及细胞外基质分泌的影响

目的:研究丹酚酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化及细胞外基质分泌的影响及其机制。方法:培养人肾小球系膜细胞(HGMCs),随机分为正常对照组、高糖组及高糖+丹酚酸B高、中、低剂量组,高糖组和丹酚酸B各组用含高浓度(33.3 mmol/L)葡萄糖的培养基培养72 h,丹酚酸B各组同时加人相应浓度丹酚酸B共同孵育。Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平,ELISA法检测细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、纤维连接蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)的分泌水平,Western blot法检测转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及Smad2和p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的磷酸化水平。结果:高糖孵育72 h后,肾小球系膜细胞α-SMA的蛋白表达水平明显升高,ColⅠ、ColⅢ、FN及LN蛋白的分泌水平显著增加(P 0.01),TGF-β1的表达及Smad2、p38 MAPK的磷酸化水平也明显升高(P 0.01);与丹酚酸B共同孵育可明显降低α-SMA蛋白的表达水平,ColⅠ、ColⅢ、FN和LN的分泌明显减少,TGF-β1的表达及Smad2、p38 MAPK的磷酸化水平显著下降(P 0.01或P 0.05)。结论:丹酚酸B可明显抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化,减少ColⅠ和ColⅢ等细胞外基质分泌,其机制与抑制TGF-β1/Smad信号通路及p38 MAPK活化有关。     

人参皂苷Rg1对脓毒症所致心肌损伤大鼠HMGB1/NF-κB通路的影响北大核心CSCD

目的:探讨人参皂苷Rg1(Rg1)对脓毒症所致心肌损伤大鼠的保护作用及其对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/核因子-κB(NF-κB)通路的调节机制。方法:腹腔注射20 mg/kg脂多糖(LPS)构建脓毒症大鼠模型,并分为5组,每组10只,假手术组(Sham组)大鼠造模过程中腹腔注射等量生理盐水;造模前2 h,LPS+Rg1组大鼠灌胃15 mg/kg Rg1,心脏冠脉注射NF-κB-mimic-NC;LPS+Rg1+NF-κB-mimic组大鼠灌胃15 mg/kg Rg1,心脏冠脉注射NF-κB-mimic;LPS+NF-κB-mimic组大鼠灌胃等量生理盐水,心脏冠脉注射NF-κB-mimic;Sham组和LPS组大鼠灌胃等量生理盐水,心脏冠脉注射NF-κB-mimic-NC。心脏彩超检测大鼠左室收缩末内径(LVDs)、左室舒张末内径(LVDd)、左室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(FS),TUNEL染色检测大鼠心肌细胞凋亡率;试剂盒检测大鼠血清TNF-α、IL-1β、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)含量;免疫荧光染色观察大鼠心肌组织caspase-3表达;免疫组化染色观察大鼠心肌组织HMGB1表达;Western blot心肌组织HMGB1、NF-κB表达。结果:与Sham组相比,LPS组、LPS+Rg1组、LPS+Rg1+NF-κB-mimic组、LPS+NF-κB-mimic组大鼠LVDs、LVDd、心肌细胞凋亡率、血清TNF-α、IL-1β、CK-MB和LDH含量、心肌组织HMGB1、NF-κB表达明显升高,LVEF、FS明显降低(均P<0.05);与LPS组相比,LPS+Rg1组、LPS+Rg1+NF-κB-mimic组大鼠LVDs、LVDd、血清TNF-α、IL-1β、CK-MB和LDH含量、心肌组织HMGB1、NF-κB表达明显降低,LVEF、FS明显升高,LPS+NF-κB-mimic组大鼠LVDs、LVDd、心肌细胞凋亡率、血清TNF-α、IL-1β、CK-MB和LDH含量、心肌组织HMGB1、NF-κB表达明显升高,LVEF、FS明显降低(均P<0.05);与LPS+Rg1组相比,LPS+Rg1+NF-κB-mimic组、LPS+NF-κB-mimic组大鼠LVDs、LVDd、心肌细胞凋亡率、血清TNF-α、IL-1β、CK-MB和LDH含量、心肌组织HMGB1、NF-κB表达明显升高,LVEF、FS明显降低(均P<0.05)。结论:Rg1可明显抑制脓毒症诱导的心肌组织炎症应激,降低心肌细胞凋亡率,改善心功能,可能与抑制HMGB1/NF-κB信号有关。     

iNOS-GC-cGMP信号活化参与了内毒素血症大鼠血管低反应性的发生机制

目的: 探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)-鸟苷酸环化酶(GC)-环磷酸鸟苷(cGMP)信号活化在内毒素血症大鼠血管低反应中的作用。方法: 采用腹腔注射脂多糖(LPS)诱导大鼠内毒素血症模型,24只SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、内毒素血症组(LPS组)、内毒素血症+多黏菌素B组(LPS +PMX-B组)和多黏菌素B组(PMX-B组)。颈总动脉插管记录大鼠平均动脉血压(MABP);检测各组大鼠血清中NO、iNOS和TNF-α的水平;用离体血管灌流方法,生物信号处理系统测定大鼠胸主动脉环的张力。结果: 与sham组相比,LPS组大鼠MABP显著降低(P<0.01),LPS+PMX-B组大鼠明显高于LPS组(P<0.05),而PMX-B组与sham组比无统计学意义(P>0.05);生化检测发现LPS组大鼠血浆中NO、iNOS以及TNF-α水平显著高于sham组和LPS+PMX-B组(P<0.01)。同sham组相比,LPS组大鼠离体胸主动脉环对去氧肾上腺素(Phe)刺激的收缩反应及其对乙酰胆碱(ACh)的舒张反应均明显低下(P<0.01);与LPS组相比,LPS+PMX-B组的反应明显改善(P<0.01);氨基胍(AMG)预处理后,同sham组和PMX-B组相比,LPS组与LPS+PMX-B大鼠离体胸主动脉环对Phe(10^-7~10^-5 mol·L^-1)诱导下的各组血管环的收缩反应明显改善(P<0.05或P<0.01);亚甲蓝(MB)预处理后,同sham组和PMX-B组相比,LPS组与LPS+PMX-B组大鼠离体胸主动脉环对Phe(10^-7~10^-5 mol·L^-1)诱导下的各组血管环的收缩反应均得到改善(P<0.05或P<0.01);PMX-B组与sham组比差异无统计学意义(P>0.05)。结论: iNOS-GC-cGMP信号活化参与了内毒素血症大鼠血管低反应性;多黏菌素B改善内毒素血症大鼠血管低反应性,可能与中和内毒素、减少炎症因子释放、抑制iNOS-GC-cGMP信号活化有关。