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目的 为保证DNA条形码序列模板DNA来源的单一性,和最大程度减少凭证标本的形态破坏,建立一种从医学媒介生物微量组织中免提取,直接扩增DNA条形码序列的方法。方法 以螨、蚤、蜱单个个体以及小至蝇类后足1/5跗节的组织块为材料,通过优化裂解液浓度、裂解液和缓冲液配比,优化反应体系和反应条件,用KOD FX DNA聚合酶进行DNA条形码序列的直接扩增,反应产物测序,与NCBI基因库中的序列进行比较以验证其是否被污染。结果 裂解液优化为NaOH 50 mmol/L;裂解液和缓冲液配比优化为9∶1;反应体积优化为每50μl反应体系中2×KOD FX DNA聚合酶buffer(含Mg2 +)25μl、2mmol/LdNTP10μl、KOD FX DNA聚合酶(1U/μl)1μl、正向引物LCO1490(20μmol/L)、反向引物HCO2198(20μmol/L)各1μl;反应条件优化为:95℃3 min;98℃10 s,50℃30 s,68℃1 min,35个循环;68℃7 min。测序结果显示无污染,均为有效序列。结论 该方法操作简单而且省去了DNA提取的步骤,节约了时间和费用,适合螨、蚤、蜱单个个体以及小至蝇类后足1/5跗节的组织块DNA条形码序列的直接扩增。 相似文献
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目的 研究NaCl胁迫对披针叶黄华Thermopsis laceolata愈伤组织生长及生理特性的影响,拟从细胞水平上探讨其适应盐环境的生理机制。方法 在附加0.2%~1.2% NaCl的继代培养基上对愈伤组织进行胁迫培养,测定其中的可溶性糖、可溶性蛋白质、脯氨酸、丙二醛(MDA)量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性,并对其进行分析。结果 当NaCl小于或等于0.8%时,随盐离子质量分数的增加,愈伤组织生长量下降,但与对照均无显著差异,而当NaCl大于0.8%时,愈伤组织生长极为缓慢;可溶性糖和脯氨酸量随NaCl质量分数的升高总体呈先上升后下降趋势,但均高于对照;可溶性蛋白质、SOD、CAT和POD酶活性随NaCl质量分数升高呈先上升后下降趋势;丙二醛量在0.8% NaCl及以下时积累缓慢,而NaCl高于0.8%时急剧增加。结论 披针叶黄华愈伤组织具有适应一定质量分数(≤0.8% NaCl)盐渍生境的能力,其在受到盐胁迫时可以通过增加可溶性渗透调节物质如脯氨酸、可溶性糖类以降低渗透势及增强抗氧化酶活性来缓解盐伤害。 相似文献
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目的查找造成灭菌注射用水pH升高的原因,寻求可能的解决方法。方法在灭菌注射用水生产过程中,分别在不同阶段取样,或以不同的工艺条件和不同生产厂家的安瓿来考察,并根据《中国药典》(2005年版)二部的规定对灭菌注射用水的pH值进行检测。结果高压灭菌时的高温使安瓿玻璃中的弱碱性成分分解释放到注射用水中是造成灭菌注射用水pH升高的主要原因。结论将安瓿经过注水后再煮沸的预处理方法能较好的解决灭菌注射用水的pH值升高问题。 相似文献
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OBJECTIVE The reason for the rising pH value of sterile water for injection was investigated and the capable solving method was found.METHODS In the production process,the pH value of sterile water for injection was detected according to Chinese Pharmacop 相似文献
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生产灭菌注射用水的厂家都会碰到相同的一个问题,就是生产出来的灭菌注射用水的pH总是偏高,《中国药典》规定的灭菌注射用水pH的合格范围是5.0~7.0,而实际的检测结果往往是接近上限。一般情况下新鲜制出来的注射用水pH不会超过6.0,为了寻找灭菌注射用水pH升高的原因,作者设计了几个实验,在灭菌注射用水生产过程中,分别在不同阶段取样, 相似文献
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江苏省0~6岁儿童智力残疾的城乡差异 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:了解江苏省儿童智力残疾的城乡区别。方法:比较江苏省一市一县的0-6岁儿童智力残疾在年龄、性别、受教育情况、 父母亲文化、家庭经济状况、致残原因、康复需求及康复现状等方面的差异。结果:城乡比较显示:城区残疾儿童的受教育率明显高于农村,城 区家庭收入>6000元的家庭儿童残疾率较农村高,城区智力残疾儿童进行特殊机构的需求明显高于农村,而农村残疾儿童的家庭康复需求明 显高于城区。余在年龄、性别、父母亲文化、残疾原因等方面均无显著性差异。结论:城乡智力残疾儿童的受教育情况、康复现状及需求等方 面存在差异,故对城乡的智力残疾情况必须进行有针对性的干预。 相似文献
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