四氢嘧啶对人皮肤成纤维细胞衰老的影响

目的 探究四氢嘧啶(ectoine)对人皮肤成纤维细胞(HSFs)是否具有减缓衰老的功效及其具体机制。方法 采用不同浓度四氢嘧啶作用于HSFs 24 h, MTT法检测细胞活性，β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色观察细胞衰老情况，流式细胞术检测细胞调亡和活性氧(ROS)的水平，qPCR检测p16、p21、p53 mRNA的表达水平。结果 MTT结果显示，与对照组相比，各四氢嘧啶处理组对细胞无毒性作用，随着四氢嘧啶浓度增加，HSFs细胞凋亡率、ROS水平以及p16、p21、p53 mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论 四氢嘧啶可通过降低细胞凋亡率、抑制ROS活性和减少p16、p21、p53 mRNA的表达来减缓HSFs衰老，这将为今后开发以四氢嘧啶作为主要成分针对HSFs的抗衰老产品提供一定的理论依据。     

丹参酮生物合成相关SmERF108转录因子的鉴定及其靶基因分析＊

目的 鉴定与丹参酮合成相关转录因子AP2/ERF家族中SmERF108转录因子，并分析转录因子SmERF108的靶基因。方法 利用生物信息学在线分析平台如NCBI、PFAM等分析SmERF108的序列特征；MEGA-X软件用于构建SmERF108与不同功能转录因子的系统进化树；拟南芥原生质体转化法鉴定SmERF108蛋白的亚细胞定位；通过实时荧光定量PCR（Real-time qPCR）对SmERF108基因在丹参不同器官和组织差异表达进行检测；利用酵母体系对SmERF108的转录激活活性进行探究并用酵母单杂技术确定其靶基因。结果 SmERF108具有典型的AP2/ERF保守结构域，属于ERF-B3亚组，系统进化树和保守基序分析显示SmERF108与丹参中SmERF128、青蒿中AaERF2亲缘关系较近且保守基序分布一致；亚细胞定位显示SmERF108蛋白定位于细胞核；SmERF108基因在周皮中表达最高，且呈现周皮（R1）>韧皮部（R2）>木质部（R3）的规律；酵母自激活验证SmERF108具有转录激活活性，同时酵母单杂交确认其能与关键酶基因SmCPS1启动子结合。结论 鉴定到丹参中一个新转录因子SmERF108，生物信息学分析及差异表达分析预测与丹参酮合成相关，分子互作初步证实靶基因为SmCPS1二萜环化酶。     

新型肝癌组织的体外三维培养模型

目的:利用肝癌组织进行体外的三维（three-dimension，3D）组织块培养，通过添加PD98059和霍乱毒素（cholera toxin，CT）优化培养条件，建立一种高活性的肝癌组织体外培养模型。方法:收集中山大学肿瘤防治中心肝胆科的肝癌组织标本，经清洗、冻存、复苏等处理后分为对照组、PD组、CT组、PD+CT组，同时进行体外的二维（two-dimension，2D）和三维培养。各组组织采用DNA断裂的原位末端标记法（TUNEL）检测组织细胞凋亡情况，qRT-PCR检测BCL-2、BID、Caspase 3、Cyclin D1、CDK2、ELK-1、C-FOS、C-MYC、C-JUN等相关基因的mRNA表达水平，免疫荧光染色检测BCL-2和cleaved caspase-3蛋白表达情况，筛选并确定最优的体外培养方法。结果:3D培养组的组织细胞凋亡均少于2D培养组；PD98059通过上调BCL-2蛋白的表达，下调cleaved caspase-3蛋白的表达，激活MEK/ERK下游基因，从而减少体外培养的组织细胞凋亡，增强其抗凋亡能力；霍乱毒素通过上调Cyclin D1、CDK2的基因表达，促进其增殖。结论:我们开发了一种新型肝癌组织的体外三维培养模型，它可以作为进一步的药物试验和人源性异种移植(PDX)模型的工具。     

PBL联合CBL教学法在针灸科住院医师规范化培训中的应用

目的探索基于问题的教学模式(PBL)联合基于案例的教学模式(CBL)教学法在针灸科住院医师规范化培训(规培)中的教学效果。方法 144名规培学员随机分为试验组和对照组,每组72名。试验组采用PBL联合CBL教学法,对照组采用基于讲授式的教学模式(LBL)教学法。规培结束后,对两组规培学员进行出科成绩考核及问卷调查两种方式评价教学效果。结果试验组考核成绩优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。问卷调查结果显示,试验组满意率为75.0%,对照组满意率为41.7%,差异有统计学意义(P0.05);试验组对带教老师质量评价反馈的分数高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);试验组在激发学习兴趣、提高自学能力、提高沟通和协作能力、培养临床思维、提高临床实践能力、提高分析和解决问题的能力方面均优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 PBL联合CBL教学法在针灸科规培中取得良好效果,是胜任于提高中医类规培学员在针灸科规培的临床综合能力的教学模式探索。     

不同手术方式治疗高血压脑出血的临床疗效分析

目的探讨不同手术方式治疗高血压脑出血的临床效果。方法随机将2017-06—2018-12间新郑市人民医院收治的122例高血压脑出血患者分为2组,每组61例。对照组行开颅显微镜下血肿清除术,观察组应用神经内镜下血肿清除术。比较2组的手术时间、术中出血量、血肿清除率、住院时间和术后并发症发生率。结果观察组手术时间、术中出血量、住院时间等指标均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。2组血肿清除率及术后并发症发生率差异无统计学意义(P0.05)。结论与开颅显微镜治疗相比,神经内镜下血肿清除术治疗高血压脑出血手术微创、并发症少,且可促进患者术后早期恢复。     

跟骨锁定钢板治疗跟骨关节内粉碎性骨折的临床效果评价

目的评价跟骨锁定钢板治疗跟骨关节内粉碎性骨折的临床疗效。方法选择2009年7月至2011年7月在濮阳市人民医院利用跟骨锁定钢板治疗跟骨关节内粉碎性骨折的40例患者作为研究对象,按照骨折Sanders分型,9例Ⅱ型,20例Ⅲ型,11例Ⅳ型。治疗后使用Maryland足部评分标准进行评分。结果骨折愈合时间10~18周,平均为12.6周,未出现不愈合、延迟愈合以及固定松动等现象,患者康复优良率为85.9%。Bobhler’s角及Gissane角较术前均有明显改善。结论应用跟骨锁定钢板治疗跟骨关节内粉碎性骨折的临床疗效显著,有利于患者早日康复。