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结核分枝杆菌链霉素耐药性的噬菌体检测技术研究 总被引:2,自引:1,他引:2
目的 建立结核分枝杆菌(结核菌)链霉素耐药性的噬菌体快速检测技术,并探讨其临床应用价值。方法 应用分枝杆菌噬菌体感染结核菌建立链霉素耐药性的噬菌体检测技术,并对最佳测定条件进行探讨;将所建立的方法用于38株世界卫生组织药敏质控株和372株临床分离株链霉素耐药性测定,并与绝对浓度法和Bactec 960药敏结果比较,对不符合菌株进行最低抑菌浓度(MIC)和rpsL耐药基因检测。结果 链霉素终浓度5μg/ml作用24h、噬菌体10^8噬菌体形成单位/ml感染60min、杀毒剂5%室温作用5min为选择的检测条件。噬菌体法检测38株药敏质控株结果完全符合。372株临床分离株链霉素耐药性检测结果表明,如以绝对浓度法药敏结果为判断标准,则本法敏感性为97.4%、特异性为91.0%、阳性预测值为81.7%、阴性预测值为98.9%、准确性为92.9%;如以Bactec 960药敏结果为判断标准,则本法敏感性为97.2%、特异性为97.1%、阳性预测值为94.6%、阴性预测值为98.5%、准确性为97.1%。有22株噬菌体法药敏结果与常规药敏试验结果不符,其中的11株噬菌体法检测结果与MIC和rpsL耐药基因检测结果相同。结论 噬菌体法检测链霉素耐药性快速、简便,具有很高的敏感性和特异性,可作为结核菌链霉素耐药性的快速检测方法。 相似文献
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目的评价微量液体培养基最低抑菌浓度(MIC)快速法检测临床分离株耐多药结核分枝杆菌(Mycobacterium Tuberculosis,MTB)的临床应用价值。方法采用微量液体培养基MIC法对220株MTB临床分离株的链霉素(SM)、异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)、氧氟沙星(OFLX)、左氧氟沙星(LVFX)、莫西沙星(MOX)、阿米卡星(AMK)、卡那霉素(KAN)和卷曲霉素(CPM)的最小抑菌浓度在96孔U型板微量液体培养基MIC中药物敏感性进行检测,并同传统的罗氏比例法药物敏感性进行比对。结果微量液体培养基MIC法药物敏感7~10 d获得结果,与罗氏比例法药敏结果进行比较,其敏感性分别为93.0%、95.9%、100.0%、93.8%、90.8%、88.6%、100.0%、90.0%、85.7%和93.7%,特异性分别为96.3%、95.9%、97.9%、94.9%、96.5%、97.7%、99.1%、93.9%、99.0%和95.2%,符合率分别为95.0%、95.9%、98.6%、94.5%、94.5%、95.9%、99.1%、93.2%、98.2%和95.0%。结论微量MIC药物敏性快速检测方法与罗氏比例法药物敏感性结果比较,10种药物微量MIC测定敏感性、特异性、符合率均较高,是目前较理想的一种快速检测结核分枝杆菌药物敏感性的方法,具有较高的临床应用价值。 相似文献
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吡嗪酰胺耐药性结核分枝杆菌的噬菌体检测技术研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 建立噬菌体生物扩增法(PhaB)快速测定吡嗪酰胺耐药性,并探讨其在结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性测定中的应用价值。方法 应用建立的PhaB测定108株结核分枝杆菌临床分离株的吡嗪酰胺耐药性,并与绝对浓度法的药敏结果进行比较,对不符合的菌株进行最低抑菌浓度(MIC)测定和序列测定分析。结果 PhaB检测吡嗪酰胺耐药性的最佳测定条件为pH值5.5、药物浓度200μg/ml、37℃作用48h。用绝对浓度法检测108株结核分枝杆菌临床分离株,其中吡嗪酰胺敏感33株、耐药75株;用PhaB检测该108株结核分枝杆菌临床分离株,若以噬菌斑减少95%为判断标准。则吡嗪酰胺敏感32株,耐药76株。2种方法检测均为敏感的为28株,均为耐药的为71株,符合率为91.7%;2种方法检测结果不符的为9株,其中5株的PhaB结果与MIC结果相符,4株的结果不符,测序结果表明9株中有7株的PhaB结果与测序结果相符。如以绝对浓度法药敏结果为判断标准,PhaB检测吡嗪酰胺耐药性的敏感性为94.7%,特异性为84.8%,阳性预测值为93.4%,阴性预测值为87.5%,准确性为91.7%。结论 PhaB测定吡嗪酰胺耐药性简便、快速,3d即可获得药敏结果,可作为吡嗪酰胺耐药性的快速筛选方法。 相似文献
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目的 对耐多药MTB临床分离株进行利福布汀和利福平交叉耐药性研究分析,为利福布汀治疗耐多药MTB提供依据.方法 在96孔板上检测利福布汀和利福平对99株耐多药MTB菌株的90%最低抑菌浓度(MIC90),交叉耐药率数据分析采用x2检验,两组间MIC比较经对数转化后采用独立样本t检验.结果 利福布汀和利福平的交叉耐药率为85.9%(85/99).利福布汀的MIC90值为≤16 mg/L,中位数为2 mg/L;利福平的MIC9o值为≥2 mg/L,中位数>32 mg/L,利福布汀MIC90值仅为利福平的1/8 ~ 1/32.利福布汀和利福平交叉耐药率随利福平的耐药程度加大而上升,低耐利福平组和中耐利福平组的交叉耐药例数分别为0/9和5/9,而高耐利福平组几乎全部交叉耐药(98.8%,80/81).结论 利福布汀对利福平耐药MTB菌株有一定的抗菌活性,可作为利福类药物耐药结核病的可选择药物. 相似文献
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结核分枝杆菌临床分离株药敏结果与耐药程度的关联分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨结核分枝杆菌临床分离株对12种抗结核药物的MIC值及其药敏检测结果 与耐药程度的关联规律,从而为临床制定治疗方案提供借鉴依据.方法 采用液体培养基联合MTT技术进行抗结核药物的MIC检测.对上海市肺科医院2009年1-6月间的163株结核分枝杆菌临床分离株进行RFP、INH、SM、EMB、OFLX、LVFX、MOX、AMK、CPM、PTA、CLA和PAIN的MIC检测和Bactec MGIT快速培养仪药敏检测,并进行MIC与耐药程度的关联性分析.结果 67%(42/62)的SM耐药株MIC≥16 μg/ml,63%(51/81)的INH耐药株MIC≥8 μg/ml,77%(50/65)的RFP耐药株MIC≥8 μg/ml,20%(12/60)的EMB耐药株MIC≥4 μg/ml;43%(25/58)的OFLX耐药株MIC≥8 μg/ml;41%(15/37)的AMK耐药菌株MIC≥16 μg/ml,41%(12/29)的CPM耐药菌株MIC≥4 μg/ml.OFLX耐药株的3个氟喹诺酮类药物的MIC(OFLX、LVFX和MOX的MIC分别为2~128、1~32和0.0625~1 μg/ml)差异有统计学意义(F=16.874,P<0.01);SM、INH、RFP、EMB、OFLX、AMK和CPM在任6种及7种药物同时耐药株中的MIC值(分别为0.5~128、2~64、0.25~128、1~32、1~64、0.5~128和1~128μg/ml)明显高于任1种及2种药物耐药菌株的MIC值(MIC值分别为0.25~128、0.0625~64、0.25~32、0.25~2、0.125~2、0.5~4和1~4 μg/ml,F值分别为20.066、40.499、47.197、70.373、91.432、41.840和21.547,P均<0.05);SM、INH、RFP、EMB在4种药物同时耐药菌株中MIC值(分别为1~128、2~64、0.25~128和1~32μg/ml)显著高于任1种及2种药物耐药株(MIC值分别为0.25~128、0.0625~64、0.25~64和0.25~2 μg/ml,F值分别为26.242、23.563、31.541和64.469,P均<0.05);RFP在MDR酶株的MIC值(2~64 μg/ml)显著高于非MDR的耐药菌株的MIC值(0.25 μg/ml,F=5.613,P<0.05).结论 本研究揭示了常用的12种抗结核药物的耐药程度与常规药敏检测结果 之间的关联规律,为临床医生根据常规药敏结果 制定更加有效的抗结核治疗方案提供重要的借鉴. 相似文献
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微量MIC检测判断结核分枝杆菌药敏的方法学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立用微量MIC值判断结核分枝杆菌药物敏感性的方法 ,并进行初步临床应用评价.方法 采用液体培养基MIC测定技术,在96孔U型板中进行检测,以60株已知药敏结果 的本院菌株库保存菌株作为试验菌株, 根据Bactec MGIT结果采用ROC曲线分析建立微量MIC药敏判断界值,最后用80株连续时间段内收集的结核分枝杆菌临床分离株对微量MIC药敏判断界值进行验证和修正.结果 微量MIC药敏法的最佳接种菌量为10~(-3)mg/ml数量级,7~10 d即可报告结果 ,链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇、氧氟沙星、阿米卡星和卷曲霉素的最佳判断界值分别为2、0.25、1、2、1、4和4 μg/ml,其敏感度分别为93.5%、97.7%、93.5%、84.4%、95.8%、91.7%和88.9%, 特异度分别为95.6%、94.6%、100.0%、93.8%、92.9%、95.6%和91.5%.其准确性分别达95.0%、96.3%、97.5%、90.0%、93.8%、95.0%和91.3%. 结论 微量MIC药敏检测方法 具有快速、准确、低成本和操作简单的优点,具有良好的推广应用前景,适合在我国各级结核病专业收治机构使用. 相似文献
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目的:探讨肝药酶细胞色素P4502C19(CYP2C19)基因多态性与抗结核药物性肝损害(ATDIH)易感性的关系。方法:采用回顾性病例对照研究方法,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对ATDIH病例组106例与抗结核治疗无肝损害的对照组103例的CYP2C19*2和CYP2C19*3位点进行基因型分型,分析基因多态性与ATDIH的相关性。结果:病例组与对照组CYP2C19*2和CYP2C19*3基因表型频率差异无统计学意义(P>0.05)。根据CYP2C19*2和CYP2C19*3双基因表型的代谢速度分为快代谢型、中间代谢型和慢代谢型。Logistic回归分析表明,慢代谢型患者出现肝损害的危险性是快代谢型的2.657倍(95%CI=1.0896.482)。结论:汉族人群CYP2C19*2和CYP2C19*3基因多态性可能与ATDIH的发生有关,慢代谢型患者较快代谢型患者更易出现肝损害。 相似文献
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目的 采用Meta分析的方法评价基因测序快速诊断结核分枝杆菌(Mtb)对乙胺丁醇耐药性的诊断价值.方法 检索PubMed、Web Of Science、OVID、Cochrane Library、中国知网、万方和维普等数据库,初步检索文献767篇,剔除重复后获得566篇文献,通过阅读题目及摘要初步排除477篇,其余89篇文献进入全文筛选,最终纳入18篇.根据诊断试验系统评价质量评价工具QUADAS-2 (quality assessment of diagnostic accuracy studies)标准评价文献,通过Q检验进行文献异质性分析,运用Meta-Disc 1.4软件计算总敏感度、总特异度、诊断优势比等统计量.结果 基因测序检测embB306位点,检测embB306、embB406位点,检测embB306、embB406、embB497位点突变诊断结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性的总敏感度(95%可信区间,95%CI)分别为0.56(0.53~0.59)、0.60(0.56~0.64)、0.76(0.70~0.81),总特异度(95%CI)分别为0.93(0.92~0.94)、0.89(0.86~0.91)、0.89(0.83~0.93);诊断优势比(95%CI)分别为17.59(9.35~33.10)、15.24(5.51~42.11)、33.69(4.53~250.90).结论 基因测序检测embB306、embB406、mebB497位点诊断结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性总特异度较高,可作为早期快速耐药株检测的初筛方法. 相似文献