南昌4家教学医院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌耐药机制及同源性分析

目的探讨临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药机制及同源性。方法收集南昌地区4家教学医院耐碳青霉烯类抗菌药物(亚胺培南和/或美罗培南)的肺炎克雷伯菌29株,双纸片增效法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、三维实验检测AmpC酶、改良Hodge实验和双纸片协同法检测碳青霉烯酶,PCR扩增耐药基因,并对扩增产物测序,确定其基因型。脉冲场凝胶电泳(PFGE)对其进行同源性分析。结果 29株分离菌除对阿米卡星的耐药率较低(37.9%)外,对其他13种抗菌药物的耐药率均大于69%,其中对头孢呋辛、亚胺培南的耐药率为100%,多重耐药肺炎克雷伯菌的检出率为62.1%(18/29)。29株分离菌中有19株携带碳青霉烯酶基因,占65.5%(19/29),以blaKPC-2为主(44.8%,13/29),其次为blaNDM-1、blaIMP-26及blaIMP-4,携带率分别为17.2%(5/29)、10.3%(3/29)及6.9%(2/29),另有3株同时携带blaKPC-2和blaIMP-26,1株同时携带blaKPC-2和blaIMP-4。17株除携带碳青霉烯酶基因外,还携带ESBLs基因和(或)AmpC基因,占58.6%。未检测到VIM、GES、SPM及OXA等其他碳青霉烯酶基因。29株分离菌中有27株被PFGE成功分型,分别属于20个不同克隆,其余2株分型不成功。属于同一克隆型且携带blaKPC-2基因的4株菌来自同一医院。结论 CRKP耐药及多重耐药现象严重;携带碳青霉烯酶基因是肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类药物的主要原因,blaKPC-2携带率高,且在局部有短暂流行。本地区已监测到携带blaNDM的肺炎克雷伯菌,值得关注。     

耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌耐药机制的研究

目的：调查和研究南昌地区鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法：收集南昌大学第二附属医院2012年间临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌（CRAB）非重复株。Vitek-32型全自动微生物分析仪进行菌株鉴定,K-B法进行药敏试验,三维试验检测AmpC酶,EDTA协同试验检测金属β-内酰胺酶,采用聚合酶链反应（PCR）扩增耐药基因,并对阳性产物进行双向测序分析,确定其基因型。结果：84株CRAB对临床常用的12种抗菌药物有9种耐药率〉90%,对头孢哌酮-舒巴坦的耐药率最低（44.0%）,所有菌株均为多重耐药株。三维试验在83株菌（98.8%）中检出AmpC酶,协同试验未检出产金属酶菌株。所有菌株均携带blaOXA-23、blaOXA-51及blaADC基因,1株携带blaOXA-58基因,未检测到blaOXA-24及金属酶基因（blaIMP、blaVIM-2、blaNDM-1及blaSIM-1）;外排泵编码基因adeB、调控基因adeS和adeR的检出率分别为98.8%（83/84）、81.0%（68/84）和67.9%（57/84）;所有菌株均检出外膜蛋白carO基因;69株（82.1%）检测出I类整合酶基因（intI1）,全部菌株携带插入序列ISAba1。结论：南昌地区CRAB耐药性及多重耐药性非常严重,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制为产OXA-23型碳青霉烯酶,AmpC酶、外排泵AdeABC、I类整合子和插入序列ISAba1,可能与CRAB的多重耐药性密切相关。     

质谱法对鲍曼不动杆菌的快速鉴定研究

目的建立表面解吸常压化学电离质谱(SDAPCI-MS)技术检测鲍曼不动杆菌特有的挥发性代谢产物(VCs)以便快速鉴定鲍曼不动杆菌。方法复苏临床分离获得的鲍曼不动杆菌10株,接种到血琼脂平板上,37℃孵育培养,用SDAPCI-MS对培养不同时间的鲍曼不动杆菌进行VCs检测。结果与空白培养基比较,检测到鲍曼不动杆菌特有的VCs及特征的质荷比峰(m/z 60和118),且鲍曼不动杆菌在不同培养时间产生的VCs基本相同。结论 SDAPCI-MS有望通过特征性VCs对鲍曼不动杆菌进行快速检测。     

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌多位点序列分型研究

目的：了解南昌四家教学医院的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（ CRKP）分子流行病学特征。方法收集2011年1月至2012年6月来自南昌地区四家教学医院临床分离的29株亚胺培南和／或美罗培南耐药肺炎克雷伯菌,聚合酶链反应（PCR）检测CRKP携带的耐药基因;用多位点序列分型技术（MLST）对CRKP进行分子遗传学分析;eBURST软件对多位点序列分型结果进行其种群结构分析。结果29株CRKP经MLST成功分成16个ST（序列类型）型。其中,以ST11和ST15为主（各5株）;其次为ST395（3株）,ST334、ST273、ST147（各2株）,ST1128、ST42、ST1031、ST764、ST629和ST37（各1株）;值得注意的是,4个新的ST型已被PubMlst数据库确认收录并分别命名为ST1369、ST1411、ST1412和ST1413。其中,有2个 ST 群,每个 ST 群分别包括2个 ST 型（ ST395和ST1369,ST147和ST273）,其他12个ST型都是单个的ST型,其中ST11、ST15和ST395均属于CC258克隆复合体。结论本地区CRKP具有基因多态性,主要克隆系为ST11和ST15,曾有过短暂局部的ST15流行。     

触酶阴性金黄色葡萄球菌致伤口感染1例

金黄色葡萄球菌是临床检出的常见菌,是引起皮肤及软组织化脓性感染的主要病原菌,既可引起医院感染,也可造成社区感染[1]。临床实验室常依据菌落形态、黄色色素、β溶血、革兰染色、触     

临床分离肠球菌的耐药性分析

目的了解2017年本院临床分离肠球菌耐药状况。方法采用法国梅里埃VITK2-compact全自动细菌鉴定和药敏系统进行鉴定和药敏实验,参照CLSI(美国临床实验室标准化协会)2017年版判读结果,数据分析应用WHONET5.6软件。结果 2017年收集非重复临床分离肠球菌共86株,其中粪肠球菌36株,屎肠球菌47株,鹑鸡肠球菌3株;大部分分离株来自尿液标本,且以泌尿外科分离率最高。粪肠球菌对高浓度庆大霉素和高浓度链霉素的耐药率分别为36.1%和22.2%;屎肠球菌对高浓度庆大霉素和高浓度链霉素的耐药率分别为68.1%和61.7%,屎肠球菌耐药率明显高于粪肠球菌,未检出万古霉素耐药株。结论我院临床分离肠球菌以粪肠球菌和屎肠球为主,且屎肠球菌耐药率高于粪肠球菌,临床应合理选择抗生素,以延缓耐药肠球菌的增多。     

3 159份血液标本中病原菌的构成和耐药性分析

目的了解该院血液标本中检出病原菌的构成和耐药状况,以指导临床合理用药。方法该院2016年3 159份血液标本采用美国BD BACTEC9120全自动血液分析仪培养,血培养阳性标本采用法国梅里埃VITK2-compact全自动细菌鉴定和药敏系统进行鉴定和药敏实验,参照CLSI 2015年版判读结果,WHONET5.5软件进行数据分析。结果分离出病原菌216株,阳性率6.8%;其中革兰阴性菌104株,占48.1%;革兰阳性细菌92株,占42.6%;酵母样真菌20株,占9.3%。革兰阴性杆菌以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率分别为40.3%和31.3%,未检出耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌。革兰阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)和金黄色色葡萄球菌为主,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率分别为86.4%和10.0%,未见耐万古霉素和利耐唑胺葡萄球菌和肠球菌属细菌。结论该院血培养分离菌以革兰阴性杆菌为主,细菌耐药性仍是临床重要问题,应引起临床高度重视。     

无菌体液中鲍曼不动杆菌的分布及耐药性分析

目的了解患者无菌体液中分离的鲍曼不动杆菌分布及其耐药特征,以指导临床合理使用抗菌药物。方法回顾性调查南昌大学第二附属医院2011年9月—2012年8月分离自患者无菌体液中鲍曼不动杆菌的分布和耐药特性。采用K-B法进行药敏试验,依据2011年度CLSI标准判读结果。采用WHONET5.5软件分析数据。结果共获得鲍曼不动杆菌88株,以重症监护病房多见,占63.6%(56/88),患者年龄≥50岁者占62.5%(55/88),多重耐药鲍曼不动杆菌检出率为81.8%。该菌对12种临床常用抗菌药物中的7种耐药率>75.0%,对头孢哌酮-舒巴坦耐药率最低,为21.6%。结论患者免疫功能低下是鲍曼不动杆菌感染的主要原因,无菌体液中分离的鲍曼不动杆菌耐药及多重耐药性均非常严重,头孢哌酮-舒巴坦可作为经验用药之一。     

2012年临床分离菌分布及耐药性分析

目的了解南昌大学第二附属医院临床分离菌的分布及耐药特性。方法采用纸片扩散法进行抗菌药物药敏试验,E试验检测葡萄球菌属对万古霉素及肺炎链球菌对青霉素的MIC。参照CLSI2012年版标准判读药敏结果,用WHONET5．5软件进行数据分析。结果2012年共收集到非重复临床分离菌4454株,其中革兰阴性菌3181株（71．4％）,革兰阳性菌1273株（28．6％）。呼吸道分泌物标本占28．5％,其次为血液（26．7％）和脓液（包括伤口分泌物,20．3％）。居前5位的病原菌依次为大肠埃希菌（16．1％）、鲍曼不动杆菌（12．4%）、铜绿假单胞菌（11．8％）、肺炎克雷伯菌（10．3％）和金葡菌（8．8％）。葡萄球菌属中耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）分别占29．2％和79．0％,未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。肺炎链球菌中青霉素耐药株占14．2％,G溶血链球菌对红霉素和克林霉素耐药率较高。屎肠球菌对多数抗菌药物的耐药率高于粪肠球菌,检出2株屎肠球菌和4株粪肠球菌对万古霉素耐药。大肠埃希菌、克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌）和奇异变形杆菌中ESBLs的检出率分别为68．0％、40．4％和34．0％,ESBLs阳性菌株对大多数抗菌药物的耐药率高于ESBLs阴性的菌株。肠杆菌科细菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率均低于10．0％。铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率为20．2％。鲍曼不动杆菌除对头孢哌酮-舒巴坦外,对其他常用抗菌药物的耐药率均大于60．0％。结论该院临床分离菌耐药现象严重,尤其是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药率增高较快,应引起重视。