慢性马兜铃酸肾病大鼠肾组织微血管损伤机制及温阳活血方的干预作用

目的:研究慢性马兜铃酸肾病大鼠肾组织微血管损伤机制及温阳活血方对其干预作用,探讨温阳活血方对慢性马兜铃酸肾病的保护作用机制.方法:将48只雄性SD大鼠随机分为5组.(1)正常对照组(n=8):予生理盐水灌胃;(2)模型组(n=10):按关木通水煎液10 ml·kg-1·d-1(相当于关木通40 g·kg-1·d-1,马兜铃酸A 2.6 mg·kg-1·d-1)给大鼠灌胃;(3)中药组(n=10):在模型组基础上,再予温阳活血方30 g·kg-1·d-1灌胃;(4)西药组(n=10):在模型组基础上,再予科素亚33.3 mg·kg-1·d-1灌胃;(5)中西药结合组(n=10):在模型组基础上,再予温阳活血方30 g·kg-1·d-1 科素亚33.3 mg·kg-1·d-1灌胃.20周末,光镜观察肾脏病理,采用CD 34免疫组化染色来反映肾组织微血管的损伤情况,实时PCR检测肾组织中Ang-1、Ang-2、Tie-2和VEGF mRNA的表达.结果:(1)与正常对照组比较,模型组大鼠肾组织CD34表达明显降低(P＜0.01);而治疗组大鼠肾组织CD34表达较模型组明显升高(P＜0.05),其中尤以中药组明显(P＜0.01);(2)与正常对照组比较,模型组大鼠肾组织Ang-1、Tie-2、VEGF mRNA表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01),Ang-2表达明显升高(P＜0.01);而治疗组大鼠肾组织Ang-1、Tie-2、VEGF mRNA表达较模型组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),中西药结合组Ang-2表达明显减少(P＜0.01).结论:慢性马兜铃酸肾病大鼠肾组织存在微血管的损伤,其损伤机制可能与Ang-1、Tie-2和VEGF mRNA的下调,Ang-2 mRNA上调有关,温阳活血方能明显改善微血管的损伤,对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾脏具有保护作用.     

柴芩肾安方对IgA肾病大鼠肾组织TGF-β1和Smad 7的影响

目的：探讨柴芩肾安方对IgAN大鼠肾组织TGF-β1和Smad 7表达的影响。方法：采用灌服并定时静脉注射BSA复合感染SEB的方法制成大鼠IgAN模型,并用柴芩肾安方治疗,以氯沙坦为对照。第15周末,观察肾组织形态学变化和免疫复合物的沉积情况;采用免疫组化和RT—PCR的方法,分别检测肾组织TGF—β1和Smad 7蛋白及其mRNA的表达。结果：与正常组相比,模型组大鼠肾小球系膜细胞和系膜基质轻度增生,伴见弥漫的IgA和少量IgG沉积;TGF—β1和Smad 7蛋白及其mRNA表达均明显升高（P〈0．01）。柴芩肾安方治疗后上述指标均明显减轻（P〈0．01）,且作用效果与氯沙坦类似。结论：抑制肾组织TGF—β1和Smad 7蛋白及其mRNA的表达,可能是柴芩肾安方延缓IgAN肾脏病变进展的机制之一。     

柴芩肾安方对IgA肾病大鼠肾小球足细胞podocin表达的影响

目的观察柴芩肾安方对IgA肾病（IgAN）大鼠肾小球足细胞podoc in表达的影响。方法雄性SD大鼠随机分为正常组、切肾组、IgAN组、柴芩肾安方组和氯沙坦组,通过切除单侧肾并反复静脉注射葡萄球菌肠毒素B（SEB）建立大鼠IgAN模型,分别进行药物干预。第12周末,检测各组大鼠24h尿蛋白量（Upr）,观察肾小球病理变化,并采用免疫组化和实时定量PCR检测足细胞podo-c in蛋白及mRNA的表达。结果与正常组比较,IgAN组大鼠Upr、肾小球系膜细胞、系膜基质相对含量均显著升高（P〈0.01）,大部分足突融合,足细胞podoc in蛋白及mRNA表达均明显下调（P〈0.01）。柴芩肾安方组上述指标均明显改善,与IgAN组比较差异显著（P〈0.01）,且其podoc in蛋白表达高于氯沙坦组（P〈0.01）。结论柴芩肾安方能减轻IgAN大鼠蛋白尿及肾小球病变,这可能与其恢复足细胞podoc in表达有关。     

柴芩肾安方对IgA肾病大鼠肾小球Ⅳ型胶原和基质金属蛋白酶-2/基质金属蛋白酶组织抑制物-2的影响

IgA肾病(IgAN)是我国最常见的原发性肾小球疾病,近10年来其发病率呈上升趋势[1],已成为我国终末期肾病的主要病因之一.肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质(ECM)增多是多种肾小球疾病,尤其是系膜增生性肾小球肾炎(包括IgAN)的病理学特征,ECM的过多聚积最终可导致肾小球硬化.     

姜黄素对醛固酮诱导肾间质纤维化的保护作用

目的探讨姜黄素对醛固酮诱导肾纤维化的保护作用和机制。方法雄性SD大鼠行左侧单肾切除后给予醛固酮处理诱导肾间质纤维化,同时分别给予姜黄素、安体舒通以及姜黄素和安体舒通联合处理。留取24 h尿采用ELISA法检测尿糖皮质激素诱导蛋白激酶(SGK1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、IL-6和TNF-α排泄情况;组织病理切片采用Masson染色观察肾组织纤维化程度,免疫组化和RT-PCR观察各组TGF-β1、结缔组织生长因子(CTGF)和血清糖皮质激素诱导蛋白激酶(SGK1)的表达情况。结果醛固酮能显著增加尿TGF-β1、IL-6和TNF-α水平(P<0.01),姜黄素和安体舒通均能显著减少上述因子的排泄水平(P<0.01),二者合用具有协调作用。病理组织学结果显示,醛固酮可明显促进肾小管间质纤维化以及TGF-β1、CTGF和SGK1等致炎致纤维化因子表达,姜黄素和安体舒通能显著拮抗醛固酮的促炎促纤维化效应,二者合用有协同效应。结论姜黄素能通过抑制致炎致纤维化因子表达而有效拮抗醛固酮诱导的肾间质纤维化。     

右归丸治疗肾阳虚型慢性肾脏病2～3期的临床疗效研究

[目的]观察右归丸治疗肾阳虚型慢性肾脏病2~3期的临床疗效。[方法]选取80例肾阳虚型慢性肾脏病2~3期患者,随机分为治疗组和对照组,对照组(40例)予西医一体化治疗,治疗组(40例)在西医一体化治疗的基础上加用右归丸,观察两组患者在治疗前、治疗后的血清肌酐(Scr)、估算肾小球滤过率(e GFR)、24 h尿蛋白定量及中医证候积分的变化情况,观察周期为24周。[结果]在血清Scr、24 h尿蛋白定量、e GFR及中医证候改善方面,治疗组均优于对照组(P0.05)。[结论]右归丸可有效改善肾阳虚型慢性肾脏病2~3期患者的中医证候积分及其肾功能,降低24 h尿蛋白定量,具有一定的肾脏保护作用,并且临床运用安全。     

柴芩肾安方对IgA肾病大鼠肾小球TGF—β1和CTGF表达的影响

2007年美国肾脏病年会报道，目前我国终末期肾脏病（ESRD）的首位病因仍是原发性肾小球疾病，而IgA肾病（IgAN）是最常见的原发性小球疾病，占肾活检的10％～25％。其中5％～10％的患者快速进展，10％～50％缓慢进展至肾功能衰竭。因此，积极探索有效的治疗措施，延缓本病进展至ESRD，具有重要的意义。本研究通过观察柴芩肾安方对IgAN大鼠肾小球TGF-β1和CTGF表达的影响，探讨其延缓IgAN肾小球病变进展的可能机制。     

葡萄球菌肠毒素B复合感染联合5/6肾切除建立免疫球蛋白A肾病肾小球硬化模型

目的 探讨免疫球蛋白A(IgA)肾病肾小球硬化模型的建立方法,为研究提供新的模型.方法 将24只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、5/6肾切除组、葡萄球菌肠毒素B(SEB)复合感染组和SEB复合感染联合5/6肾切除组,每组6只.实验12周末观察尿红细胞计数、24 h尿蛋白定量、血清尿素氮和肌酐水平,免疫荧光观察肾小球中IgA的表达,应用光学显微镜和透射电子显微镜分别观察大鼠肾组织结构及超微结构的情况,并采用免疫组织化学法检测转化生长因子(TGF)-β1在肾组织中的表达.结果 SEB复合感染联合5/6肾切除组的尿红细胞计数显著高于假手术组和5/6肾切除组(P值均＜0.01),24 h尿蛋白定量、血清尿素氮和肌酐水平显著高于假手术组和SEB复合感染组(P值均＜0.01),肾小球系膜区可见大量IgA沉积,且强度较SEB复合感染组强,光学显微镜和透射电子显微镜可见大部分区域出现肾小球硬化伴系膜区电子致密物沉积,肾组织中TGF-β1表达显著高于假手术组和SEB复合感染组(P值均＜0.01).结论 SEB复合感染联合5/6肾切除制作的IgA肾病肾小球硬化模型在一定程度上符合人类的临床病理特点,可提供一种新的模型.