血管钙化的病理分型及临床新进展

<正>血管钙化是动脉粥样硬化(AS)、糖尿病、慢性肾病等多种疾病状态下血管病理学改变的一个显著特征,表现为钙盐在细胞介导下主动沉积于血管组织的一种高度可调可逆转过程。在自然无干预情况下血管钙化会随着年龄增长而逐渐加重,引起血管壁僵硬度增加、顺应性降低、心肌缺血与肥大、斑块破裂和血栓形成等,是心脑血管疾病致死、致残的     

葛根素降低糖尿病大鼠血清糖基化终产物水平和单核细胞趋化蛋白1含量

目的　研究葛根素对糖尿病大鼠糖基化终产物 (AGEs)水平和单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)表达的影响。方法　将大鼠随机分为正常对照组 (CON)、糖尿病组 (DM )、糖尿病氨基胍治疗组 (AG )和糖尿病葛根素治疗组 (PU )。腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型 ,检测血清中AGEs(荧光法 )和MCP 1(ELISA)水平 ;病理切片PAS染色及电镜观察肾组织的病理改变。免疫组化检测肾皮质MCP 1的蛋白表达水平。结果　DM组血清AGEs和MCP 1水平较PU组和AG组明显增高 (均P <0 .0 5 ) ;电镜发现两个治疗组的肾小球基底膜和心肌细胞病理改变程度比糖尿病组轻 ;肾小球内皮细胞和系膜区MCP 1免疫组化染色阳性细胞数明显比糖尿病组少。结论　葛根素能降低糖尿病大鼠血清AGEs和MCP 1水平 ,减少肾皮质中MCP 1的表达 ,减轻肾脏和心肌的病变程度     

罗格列酮对糖基化终产物干预的人肾系膜细胞fractalkine表达的影响

观察罗格列酮和糖基化终产物对人肾系膜细胞fractalkine(FKN)表达的影响.结果 显示糖基化终产物能上调人肾系膜细胞的FKN表达,而罗格列酮能抑制糖基化终产物引起的FKN表达增加.     

罗格列酮抑制糖基化终产物诱导大鼠血管平滑肌细胞钙化机制

目的探讨罗格列酮抑制糖基化终产物(AGEs)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的可能机制。方法在含10 mmol·L~(-1)β-甘油磷酸培养液中加入200 mg·L~(-1)的AGEs及不同浓度(10~(-7)～10~(-5)mol·L~(-1))的罗格列酮体外培养VSMCs,采用甲-酚酞络合酮方法测定细胞钙含量,real time-PCR检测肿瘤坏死因子α(Tnf-α)、白细胞介素6(Il-6)及糖基化终产物受体(Rage)mRNA表达,Western blotting检测Rage蛋白表达,ELISA法检测细胞上清Tnf-α、Il-6水平。结果 AGEs可使VSMCs钙含量增加,Tnf-α、Il-6及Rage mRNA和蛋白表达增加(P<0.01);罗格列酮组均可降低VSMCs细胞层钙含量,抑制上述影响(P<0.05)。结论罗格列酮可能通过抑制VSMCs Rage表达,降低Tnf-α、Il-6表达和分泌,减轻AGEs诱导的VSMCs钙化。     

二甲双胍的心血管保护作用

二甲双胍(Metformin)属双胍类药物,作为口服降糖药应用于2型糖尿病(T2DM)已有50年的历程,其降糖作用已得到公认。近年越来越多的研究发现,二甲双胍具有降糖以外的心血管保护作用,能抑制动脉粥样硬化(Atherosclero-sis,AS)、心衰、心肌梗死等心血管病的发生和发展。但二甲双胍确切的心血管保护机制仍不明确,本文综述了二甲双胍对心血管疾病的作用,并探讨其可能的作用机制。     

特异性小干扰RNA对晚期糖基化终产物受体介导肝星状细胞激活和胶原生成的抑制作用

目的 探讨特异性小分子干扰RNA对晚期糖基化终产物受体（RAGE）介导肝星状细胞（HSC）激活和胶原生成的影响。方法 构建RAGE特异性siRNA表达载体，经脂质体转染入HSC—T6细胞，以空白和转染非特异性siRNA表达载体pGCsi-C为对照，分别用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测各组HSC—T6细胞RAGE、α平滑肌肌动蛋白（α—SMA）和Ⅰ型胶原基因及蛋白的表达。结果 与空白对照组和pGCsi—C组相比，转染特异性siRNA表达载体pGCsi—R1的HSC—T6细胞RAGE mRNA和相对分子质量50×10^3、46×10^3的RAGE蛋白表达分别下调79．65％、78．04％（F=26．005，P〈0．01），56．09％、54．93％（F=365．185，P〈0．01）和63．67％、59．67％（F=386．07，P〈0．01），同时α—SMAmRNA和蛋白、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白的表达也受到明显抑制，分别为空白对照组和pGCsi—C组的57．53％、65．50％（F=20．913，P〈0．05）、58．48％、62．80％（F=56．592，P〈0．05）、71．16％、74．23％（F=18．091，P〈0．05）和71．91％、76．09％（F=17．299，P〈0．05）。结论 RAGE特异性siRNA可在细胞内稳定表达，并能有效抑制HSC的激活和Ⅰ型胶原生成。     

罗格列酮抑制糖基化终产物诱导心肌成纤维细胞增殖和结缔组织生长因子及Smad的表达

Objective To investigate the effects of rosiglitazone on the proliferation,connective tissue growth factor and Smad expression in cultured cardiac fibroblasts induced by advanced glycosylation end-products (AGEs).Methods After being treated with various amounts of rosiglitazone,the cultured neonatal rat cardiac fibroblasts were incubated with AGEs.The status of cardiac fibroblasts proliferation and cell cycle were detected by 3-(4,5-dimethyhhiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTI) assay and flow cytometry.Furthermore,ELISA technique was applied to identify the level of TGF-β1.The protein expressions of CTGF and Smad in cardiac fibroblasts of neonatal SD rats were detected with Western blotting.Results The exposure of cardiac fibroblasts to AGEs at doses of 0-200 mg/L induced a dose-dependent increase in cell proliferation.At the concentration of rosiglitazooe (0.1,1,and 10 μmol/L),the cell proliferation was reduced compared with 200 mg/L AGEs group by O.823±0.072,0.785±0.060,0.601±0.081 vs 0.981±0.049,respectively (P < 0.05).The increased levels of TGF-β1 in supematants of cultured cardiac fibroblasts stimulated by AGEs were inhibited by rosiglitazone at the concentrations of 0.1,1,10μmol/L by 257.77±9.09,230.29±6.56,200.84±10.26 vs 300.68±8.56,respectively (vs 200 mg/L AGEs,P<0.01).Western blot indicated that pretreatment with rosiglitazone (0.1,1,and 10 μmol/L) inhibited CTGF protein production in a dose-dependent by 0.769±0.108,0.590±0.095,0.534±0.115 vs 1.021±0.113,respectively (vs 200 mg/L AGEs,P<0.01).It was also demonstrated that pretreatment with rosiglitazone (1 and 10 μmol/L) inhibited Smad2 protein production by 0.424±0.059,0.396±O.080 vs 0.572±0.073,respectively (vs 200 mg/L AGEs,P < 0.05 or P < 0.01).Meanwhile pretreatment with rosiglitazone (1 and 10 μmol/L) inhibited Smad4 protein production by 0.580±0.063,0.556±0.051 vs 0.672±0.059,respectively (vs 200 mg/L AGEs,P < 0.05 or P < 0.01).Conclusions The findings suggest that AGEs promote the proliferation of cardiac fibroblasts and stimulate the protein production of Smad and CTGF of cardiac fibroblasts.Rosiglitazone inhibits the above reaction.These results indicate that CTGF/Smad pathway may play an important role in the protective effect of rosiglitazone on myocardial fibrosis.     

糖基化终产物对糖尿病微血管病变的作用

糖尿病不仅是一种慢性终身性疾病,它又是多脏器疾病并累及多数脏器,已成为仅次于脑血管和肿瘤之后,第三位的常见病、多发病和慢性非传染性疾病.根据流行病学调查,糖尿病的发病率呈逐年上升的趋势.     

急性心肌梗死的再灌注治疗新进展

急性心肌梗死（AMI）是由于冠状动脉的不稳定粥样斑块破裂后，在血小板激活和聚集的基础上继发血栓形成致使梗死相关动脉（IRA）急性完全闭塞所致。再灌注治疗主要有两条途经，即溶栓和经皮冠状动脉介入治疗（PCI）。再灌注治疗的目的是通过上述方法使梗死的相关冠状动脉（IRCA）尽早、最大程度地持久开通，恢复心肌梗死溶栓治疗3级（TIMI-3级）血流和有效的心肌血流再灌注，挽救濒死心肌，缩小梗死面积，阻抑心室重构,保护心功能，以提高心肌梗死的存活率，改善AMI患者的近期和远期预后。笔者就近年来PCI在AMI再灌注治疗中取得的新进展作一综述。     

结缔组织生长因子的分泌表达及ELISA检测法的建立

目的　制备结缔组织生长因子 (CTGF)抗原 ,建立ELISA检测方法。方法　从血管内皮细胞中提取总RNA ,逆转录合成cDNA ,设计特异性引物 ,通过PCR方法扩增CTGFC区 2 4 2～ 349位氨基酸基因 ,插入噬菌体包膜蛋白基因Ⅲ的上游 ,制备CTGF融合蛋白。用纯化后的融合蛋白免疫家兔 ,获得抗体 ,抗体纯化后标记HRP ,建立ELISA。结果　成功克隆CTGFC区基因 ,插入表达载体经IPTG诱导后获得分子量为 2 5 0 0 0的融合蛋白 ,免疫学检测证实为CTGF。所得抗体用HRP标记。建立的ELISA法检测灵敏度为 2ng/ml,批内及批间平均变异系数为 5 .4 %和 7.5 % ,平均回收率为 10 4 .2 %。血红蛋白浓度在 0～ 5 0mmol/L ,总胆红素在 0～ 15 0 μmol/L ,三酰甘油在 0～ 2 .0mmol/L对测定结果无影响。 2例慢性乙型肝炎病人血标本 ,5例糖尿病肾病、3例肾功能衰竭、3例慢性肾炎尿标本为阳性。结论　CTGF可以作为判断纤维化发生、进展及预后的一个新指标。CTGFELISA检测方法的成功建立 ,为临床应用打下基础