羟氯喹通过Toll样受体4/核因子-κB信号通路对系统性红斑狼疮小鼠肺损伤的影响

目的:探讨羟氯喹(HCQ)对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠肺损伤以及Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路的影响。方法:取32只雌性MRL/lpr狼疮小鼠(自发型SLE小鼠模型)随机分为模型组、HCQ(80 mg/kg)组、HCQ(80 mg/kg)+TAK242(TLR4抑制剂,0.3 mg/kg)组和HCQ(80 mg/kg)+LPS(TLR4激动剂,2.5 mg/kg)组,每组8只;另取8只同龄雌性C57BL/6小鼠设为正常对照组。各组分别连续给药治疗5周后,通过肺功能仪检测肺功能指标[气道阻力(Raw)、动态肺顺应性(Cdyn)、第0.1秒用力呼气容积(FEV0.1)],ELISA法检测肺泡灌洗液中炎症因子[干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6]水平和血清中免疫学指标[抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(ds-DNA)]水平,HE染色法和Masson染色法观察肺组织病理学改变和纤维化状况,并进行病理评分和计算胶原容积分数(CVF),RT-qPCR法和Western blot法检测肺组织TLR4、NF-κB p65、I...     

羟氯喹抑制TLR9/MyD88/NF-κB通路减轻系统性红斑狼疮小鼠肾损伤作用

目的 探讨羟氯喹对系统性红斑狼疮小鼠肾损伤的影响,并基于Toll样受体9/髓样分化因子88/核因子-κB(TLR9/MyD88/NF-κB)信号通路探索其潜在机制。方法 采用ip降植烷的方法构建系统性红斑狼疮雌性小鼠模型,设模型组、羟氯喹(ig 80 mg/kg)组、TLR9抑制剂(ODN2088,ip 4 mg/kg)组、羟氯喹+ODN2088组,另设对照组,每组8只。分别1次/d连续给药5周后采集标本,称体质量、肾脏质量并计算肾脏指数(RI),检测24 h尿蛋白量(24 h-UTP)和血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平;苏木精-伊红染色法(HE)和Masson染色观察肾组织病变和纤维化程度,进行病理评分和胶原容积分数(CVF);检测肾组织干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)水平;RT-PCR法和Western blotting法检测肾组织TLR9、MyD88、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达。结果 与模型组比较,羟氯喹组、ODN2088组和HCQ+ODN2088组小鼠体质量显著升高,RI、24 h-UTP、血清Scr、BUN水平均显著降低(P<0.05);肾组织病变和纤维化状况均明显改善,肾小球、肾小管病理评分和CVF均显著降低(P<0.05);肾组织IFN-γ、TNF-α、IL-4水平显著降低,IL-2水平显著升高(P<0.05);肾组织TLR9、MyD88、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达量均显著降低(P<0.05)。羟氯喹+ODN2088组对系统性红斑狼疮小鼠各检测指标的影响显著优于羟氯喹组和ODN2088组(P<0.05)。结论 羟氯喹对系统性红斑狼疮小鼠肾损伤具有保护作用,其机制可能与抑制TLR9/MyD88/NF-κB信号通路,减轻炎症反应有关。