甘露糖受体的肿瘤相关性

甘露糖受体为甘露糖受体家族的成员,属于C型凝集素受体。甘露糖受体广泛分布于体内的各种组织,主要表达于髓样细胞系,以非成熟的树突状细胞和巨噬细胞亚群多见。甘露糖受体能够识别细胞表面、病原体细胞壁表面及体内多种糖蛋白结合的糖分子。甘露糖受体作为一种免疫黏附分子,可能通过对不同表达量肿瘤相关抗原的识别参与机体的肿瘤免疫、肿瘤转移以及肿瘤微环境中肿瘤的免疫逃避等过程。     

下调GnTⅣa表达对肝癌Hca-F细胞增殖及侵袭的影响

目的：探讨慢病毒介导的N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅳa （N-acetylglucosaminyltransferase Ⅳa,GnTⅣa）表达下调对小鼠肝癌Hca-F细胞体外增殖及侵袭能力的影响。方法：针对GnTⅣa的编码基因Mgat4a,构建含shRNA干扰序列的慢病毒表达载体pll3.7/Mgat4a-shRNA并包装慢病毒颗粒,感染Hca-F细胞。RT-PCR 及流式细胞术分别检测Mgat4a-shRNA重组慢病毒感染对Hca-F细胞Mgat4a mRNA及GnTⅣa表达的影响,CCK-8法和Transwell侵袭实验分别检测Mgat4a-shRNA重组慢病毒感染在体外对Hca-F细胞增殖和侵袭能力的影响。结果：慢病毒能够高效感染小鼠肝癌细胞Hca-F,Mgat4a-shRNA组感染效率达72%。与Hca-F细胞和Mock-shRNA组相比,Mgat4a-shRNA组细胞内Mgat4amRNA\[（0.53±0.2） vs（2.97±02）、（2.90±0.1）;均P<0.05\]和GnTⅣa\[（47.80±2.25）vs（394.61±5.27）、（378.61±4.38）;均P<0.05\]表达显著降低;增殖能力\[细胞增殖抑制率：（46.9±0.02）%vs （0.82±0.03）%、 0,P<0.01\]和体外侵袭能力\[穿过滤膜的细胞数：（18±3）vs （42±4）、（38±3）个,均P<0.05\]显著下降。结论：慢病毒介导shRNA下调GnTⅣa的表达能够抑制小鼠肝癌细胞 Hca-F的增殖及体外侵袭。     

氯化镧对不同生长发育阶段仔鼠脑组织PI3K表达的影响

目的观察氯化镧暴露对不同发育阶段仔鼠海马组织磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)表达的影响。方法 Wistar雌鼠32只,随机分成对照组及低、中、高氯化镧组,受孕后以饮水方式对实验组动物进行氯化镧暴露,饮水中氯化镧浓度分别为0%、0. 25%、0. 5%和1. 0%,每组8只。分别于仔鼠出生后14d、28d和42d随机抽取仔鼠,采用尼氏染色的方法分析海马CA1区神经细胞尼氏体的表达;采用real-time PCR和western blot法检测海马组织PI3KmRNA及蛋白的表达;采用Morris水迷宫检测仔鼠学习记忆能力。结果氯化镧暴露可影响仔鼠生长发育,引起体重和脑重的下降,海马CA1区尼氏体表达降低,差异均有统计学意义(P 0. 05)。氯化镧组仔鼠在Morris水迷宫的搜索轨迹逐渐偏离隐蔽平台,穿越平台次数减少,差异有统计学意义(P 0. 001)。氯化镧组仔鼠海马中PI3KmRNA和蛋白的表达降低,且与暴露剂量呈负相关(γPI3KmRNA=0. 848和γPI3K蛋白=0. 945),差异有统计学意义(P 0. 001)。结论氯化镧暴露导致海马PI3K表达下降与仔鼠记忆能力受损密切相关。     

尼克酰胺-N-甲基转移酶在肺腺癌间质中的表达及其生物学功能 #br#

目的 探讨尼克酰胺-N-甲基转移酶（NNMT）在肺腺癌间质中的表达水平及过表达NNMT对肺腺癌细胞 生物学功能的影响。方法 （1）收集150例肺腺癌患者手术切除的组织标本。免疫组织化学染色检测癌组织和间质 细胞中 NNMT 的表达水平,并分析其表达与患者临床病理特征及预后间的关系。（2）分别转染过表达 NNMT 质粒 （NNMT组）和对照质粒（control组）构建稳定表达NNMT的肺成纤维细胞系HFL-1,采用荧光定量PCR（qPCR）、细胞 免疫荧光、蛋白质印迹法（Western blot）检测NNMT表达水平。（3）收集过表达NNMT及control组HFL-1细胞的培养 上清,分别和肺腺癌A549、PC9细胞进行共培养,通过细胞增殖实验、平板克隆形成实验、Transwell侵袭实验以及划 痕愈合实验比较2种培养液对A549、PC9细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力的影响。结果 （1）免疫组化染色显 示,150例患者组织标本中65例癌细胞中NNMT呈高表达,83例间质细胞中NNMT呈高表达。有淋巴结转移和病理 分期Ⅲ~Ⅳ期患者肿瘤间质细胞中NNMT高表达比例较高,且肿瘤间质中高表达NNMT患者的总生存率明显低于低 表达者。（2）成功构建了稳定过表达 NNMT 的 HFL-1 细胞,Western blot、qPCR、细胞免疫荧光染色均提示 NNMT 组 NNMT表达高于control组。（3）细胞共培养结果显示,与control组相比,表达NNMT的肺成纤维细胞系的培养液可以 显著促进A549和PC9细胞的增殖、克隆形成、迁移以及侵袭。结论 肿瘤间质表达的NNMT与肺腺癌的恶性进展密 切相关,可能是肿瘤靶向生物治疗的潜在靶点。