PI3K信号通路及其在后发性白内障发病机制中的研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶( phosphoinositide 3-kinases,PI3K)是使磷脂酰肌醇的肌醇环第3位磷酸化的酯酶,属于磷脂酰肌醇激酶相关蛋白家族,具有内源性脂质底物。PI3K信号通路参与细胞的增殖、分化、凋亡等生命活动,是重要的生命信号通路。晶状体上皮细胞发生上皮-间质转化是后发性白内障形成的主要机制,H...     

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的生物学特性及其在眼科疾病中的研究进展

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是一种非典型的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,属于磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶蛋白家族(phosphoinositide 3-kinaserelated kinase family,PI3K),广泛存在于酵母和哺乳动物的细胞浆中,进化十分保守.随着免疫学和分子生物学实验技术的发展,mTOR的研究取得了新的进展,本文就mTOR的生物学特性及其在眼科疾病中的研究进展作一综述.     

mTOR在TGF-β2诱导的人晶状体上皮细胞上皮-间叶样转化过程中的动态表达

目的观察雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)在转化生长因子β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)上皮-间叶样转化过程中的动态表达变化。方法将10μg·L-1TGF-β2加入HLEC-B3细胞系,分别在体外培养0h、1h、6h、12h、24h、48h,光学倒置显微镜下观察细胞的形态变化,Western blot-ting检测mTOR及其磷酸化水平在该过程中的动态表达情况,同时观察HLEC上皮细胞标志物缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin,E-cad)和间叶样细胞标志物纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达水平。结果在10μg·L-1TGF-β2诱导HLEC间叶样分化过程中,随着培养时间的增加,HLEC从类椭圆形、多角形逐渐变为长梭形,且细胞间隙增大。与未经TGF-β2处理的HLEC相比,E-cad和Cx43分别于培养的6h和12h时表达开始明显下降(E-cad:1.059±0.004,P=0.000;Cx43:0.477±0.076,P=0.032),FN和α-SMA于处理24h时表达开始明显增高(FN:0.872±0.134,P=0.011;α-SMA:0.516±0.049,P=0.000);mTOR的磷酸化水平从培养的6h开始明显增高(0.542±0.124,P=0.003),并呈时间依赖性表达上调,在24h时达到最高水平,但总mTOR的表达水平没有明显变化。结论 TGF-β2诱导HLEC上皮-间叶样转化过程中mTOR磷酸化激活,并随间叶样转化程度的增高而表达增加,提示mTOR可能参与了HLEC向间叶样细胞转化的过程。