携带绿色荧光蛋白腺病毒经不同给药方式进入BALB/C鼠体内后的组织分布和代谢

目的 观察蕈组腺病毒分别经由尾静脉和腹膜后注射进入小鼠体内后的组织分布和代谢,探讨重组腺病毒载体与肝移植结合治疗肝癌的可行性和安全性.方法 分别采取尾静脉和腹膜后注射Adv-GFP建立动物模型,以绿色荧光蛋白(GFP)表达作为指示观察腺病毒的组织分布;用原佗杂交法比较各器官的腺病毒转录;定量检测注射后不同时间点血清和肝脏中的病毒滴度.结果 两种不同给药方式注射Adv-GFP入小鼠体内后,在基因转录与GFP表达上均显示Adv-GFP主要分布在肝、脾、肺和肾;腹膜后注射与尾静脉注射比较,肝组织内腺病毒转录与表达明显增多(P<0.05),而脾、肺和肾有不同程度的减弱;腹膜后沣射的腺病毒亦会短时内进入体循环,但肝组织的病毒滴度在1周内各个时间点均明显高于尾静脉途径.结论 重组腺病毒腹膜后注射能够优化治疗效果,并在一定程度上减少全身反应,更适于肝癌肝移植后的基因治疗.     

灭活Chk1/2基因增强H4细胞放疗后凋亡敏感性

o照射可引起H4细胞G2/M期阻滞,以10 Gy 60C0照射12h G2/M期阻滞最明显;单独反义封闭Chk1或Chk2基因可增强放疗后凋亡敏感性100%～200%,而同时反义封闭Chk1和Chk2基因具有协同作用,增强放疗后凋亡敏感性300%,其机制是通过解除G2/M期阻滞实现的.结论 放疗可激活细胞周期检测点信号传导通路导致放疗抵抗,而阻断该信号通路的关键激酶Chk1和Chk2可显著增强放疗后凋亡敏感性.     

卵巢癌与基因检测的规范化

随着卵巢癌精准治疗的全面推广,肿瘤易感基因检测的需求日益增长。国内外指南均建议卵巢癌患者在初次病理确诊时进行BRCA1/2胚系基因检测,以确定是否为遗传性上皮性卵巢癌,同时可预测患者对聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（poly ADP-ribose polymerase,PARP）抑制剂的获益。准确识别遗传性上皮性卵巢癌,可使患者从个体化治疗中获益,同时对其一级和二级亲属的肿瘤防治意义重大。其他易感基因,例如错配修复（mismatch repair,MMR）基因和同源重组缺陷（homologous recombination deficiency,HRD）相关基因,也在卵巢癌发生中起到关键作用,同时也对卵巢癌患者的治疗决策起到关键作用。文章就卵巢癌基因检测的规范化进行综合探讨分析,以期为卵巢癌个体化诊疗策略提供更具指导性的基因检测依据。     

K562和SiHA细胞株经γ-射线照射后细胞周期阻滞与ATM表达量的关系研究

共济失调毛细血管扩张症（ataxia telangiectasis,A-T）是由ATM（ataxia telangiectasis mutant）基因突变所致,其突出特点是对放射线敏感.为探讨K562和SiHA两种肿瘤细胞株ATM表达量与γ-射线照射后细胞周期阻滞即自我保护功能之间的关系,应用半定量RT-PCR测量它们的ATM mRNA表达,同时以6、10和15 Gy 60Co γ射线分别照射细胞,并于照射后6、12、24、48及60小时观察细胞周期阻滞现象和凋亡率的变化.结果显示,K562细胞株ATM RNA相对表达量为0.04,而在SiHA细胞株为0.80,SiHA的ATM RNA表达量约为K562的20倍.结论：照射后K562和SiHA细胞株均表现G2/M期阻滞,K562细胞周期阻滞即自我保护机制明显比SiHA差.     

卵巢癌高频转移细胞模型中nm23-H1基因表达的相关性研究

目的 筛选高频转移卵巢恶性肿瘤细胞，研究不同转移潜能的细胞和nm23的相关性。方法 通过反复动物接种和体外培养，观察动物肺转移状况，筛选高频转移细胞株，比较原发肿瘤和转移肿瘤的特征，并应用Northera-blot方法测定各类肿瘤细胞nm23 mRNA表达水平。结果 8株卵巢恶性肿瘤细胞中4株有较高转移潜能。多次培养接种可筛选出高频转移细胞亚群。测定各类细胞nm23 mRNA表达水平与肿瘤转移特性呈负相关。结论 由基因分子水平决定的肿瘤转移趋势在不同肿瘤种类及细胞亚群中有明显差异；卵巢癌中nm23 mRNA和蛋白的表达与其转移能力的降低有密切关系，可作为判定卵巢癌预后的敏感指标。     

PCDGF反义RNA真核表达载体的构建、转染及其对卵巢癌细胞增殖能力的抑制效应

目的:检测特异性封闭高度恶性人卵巢癌细胞株Sw626、A2780中畸胎瘤源性生长因子(PC -cell -devivedGrowthFactor,PCDGF)的表达,并观察其对增殖能力的抑制效应。方法:用RT -PCR技术扩增PCDGF基因cDNA保守序列,经pGEM -TEasy载体克隆后双酶切,反向插入哺乳动物真核表达载体pcDNA3 1 ( +)构建反义PCDGF核酸载体。并通过脂质体转染法转染人卵巢癌细胞株Sw626、A2780,用RT- PCR和Westernblot技术检测转染前后PCDGFmRNA和蛋白的表达,MTT实验检测其增殖能力的变化。结果:PCDGF反义核酸载体转染株的mRNA和蛋白水平明显低于对照组,Sw626的抑制率分别为50%、72%;A2780分别为53%、70%。同时增殖能力亦明显降低,其抑制率Sw626及A2780分别为71%、73%。结论:PCDGF反义核酸在高度恶性人卵巢癌细胞株Sw626及A2780中起了特异性封闭作用。为进一步研究PCDGF的分子生物学特性、致瘤机理及今后利用反义PCDGF核酸载体治疗卵巢癌提供了实验和理论模型。     

改良剖宫产术240例

改良剖宫产术是下腹部横切口子宫下段新式剖宫产术,该术式采用了Jocd-Cohcn切口进腹撕拉法分离皮下脂肪、腹膜、膀跳腹膜返折以及子宫肌层,不缝合腹膜及膀航腹膜返折。笔者从1998年1月～1998年8月,对有剖宫产手术指征的24O例产妇行改良剖宫产,临床上取得了良好的效果。1临床资料1．1一般资料：1998年1月～1998年8月,我院产科分娩总数878人,其中行剖它产术者298人,剖它产率33．94％,行改良下腹部根切口它下段剖宫产24O人,年龄22～33岁,平均26岁,其中胎儿宫内窘迫68例,头盆不称（包括骨盆狭窄、巨大胎儿、枕后位,头不均倾）46…     

子宫内膜癌的分子生物学研究进展

子宫内膜癌是较常见的、发病率逐年上升的妇科恶性肿瘤之一 ,在美国每年约有 35 0 0 0个新病例 ,2 0 0 0年有6 5 0 0人死于该病。我国虽缺乏大规模的统计学资料 ,但上升之势已见端倪。根据子宫内膜癌的病理及临床特征 ,有学者提出内膜癌的二元论模式 :Ⅰ型为雌激素相关型 ,占 80 %～ 90 % ,癌组织分化较好 ,常伴有子宫内膜混合型增生或不典型增生 ,进展缓慢 ,多发生于围绝经期妇女 ,预后较好 ,主要以子宫内膜样癌为主。Ⅱ型为非雌激素相关型 ,发展迅速 ,多发生于老年妇女 ,预后差 ,以乳头状浆液性腺癌为主。近年来 ,随着分子生物学的迅速发…     

卵巢癌中p27kip1和Cyclin D1的表达与预后因素的相关性研究

目的　探讨 p2 7kip1、CyclinD1在卵巢癌发生、发展方面的意义。 方法　应用免疫组化染色及半定量分析的方法 ,检测 5 0例卵巢癌、19例卵巢良性上皮肿瘤、13例正常卵巢组织中的p2 7kip1、CyclinD1表达 ,及它们与上皮组织的良恶性、病理组织分级、临床分期的相关性。结果　正常卵巢组和卵巢良性肿瘤组间 ,p2 7、CyclinD1表达无明显差异 ;p2 7在正常卵巢组织和卵巢良性上皮肿瘤中高表达 ,在卵巢癌中表达降低 (P <0 0 5 ) ,且随着肿瘤分级、分期增高 (恶性程度增高 ) ,阳性表达率逐渐下降 ;而CyclinD1的表达则相反 ;两者在肿瘤中的表达呈负相关。结论　p2 7kip1表达下降、CyclinD1过表达可能在卵巢癌的发生发展中起重要作用 ,检测 p2 7kip1、CyclinD1在卵巢癌中的表达可预测该肿瘤生物学行为特征 ,可以作为预后指标