过敏性紫癜患儿肠道菌群结构及多样性研究

目的 探讨过敏性紫癜(HSP)患儿的肠道菌群结构及多样性变化和粪便菌群与黏膜菌群结构及多样性的差异.方法 收集47例过敏性紫癜患儿粪便样本和其中7例腹型患儿的结肠黏膜样本,以11例健康儿童粪便样本为对照,采用试剂盒提取法提取样本DNA并进行高通量测序,对测序结果进行生物学信息分析.结果 HSP患儿与健康儿童粪便菌群存在结构差异,在门水平两组均以厚壁菌门(47.10%、57.75%),变形菌门(23.04%、10.13%),拟杆菌门(22.81%、21.74%)为主要优势菌群,在科水平,均以肠杆菌科(17.60%、8.72%)、拟杆菌科(18.90%、21.65%)、瘤胃菌科(16.44%、28.93%)、毛螺菌科(11.55%、10.74%)有较高的丰度.HSP患儿粪便菌群中变形菌门、欧文氏菌属(从目到属)、拟杆菌属-uniformis种、巨单胞菌属、肠球菌属(从科到属)丰度高于对照组健康儿童,而双歧杆菌属(从目到属)、链球菌属(从目到属)、普拉梭菌种(从科到种)丰度低于对照组健康儿童.腹型患儿粪便菌群多样性高于黏膜菌群;在门水平,粪便菌群以厚壁菌门(53.64%)、变形菌门(33.65%)、拟杆菌门(9.24%)丰度较高,黏膜菌群以变形菌门(88.13%)丰度最高,在科水平,粪便菌群以肠杆菌科(27.18%)、瘤胃菌科(15.58%)、毛螺菌科(12.31%)为优势菌科,黏膜菌群以肠杆菌科(87.19%)为优势菌科;粪便菌群以双歧杆菌属(从门到属)、链球菌属(从门到属)、动性球菌科(从门到科)、丹毒丝菌科(从门到科)、梭菌科(从门到科)、瘤胃菌科(从门到科)、毛螺菌科(从门到科)为主要特征差异细菌种类,结肠黏膜菌群以欧文氏菌属(从门到属)为主要特征差异细菌种类.结论 HSP患儿粪便菌群病原菌或机会致病菌增多而有益菌减少,腹型HSP患儿黏膜菌群与粪便菌群存在结构和多样性差异.     

二十碳五烯酸对E.coli LF82感染后肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1 mRNA的影响

目的探讨二十碳五烯酸(EPA)对黏附侵袭性大肠杆菌(AIEC)LF82感染后肠上皮细胞(Caco-2)紧密连接蛋白(ZO-1)表达的影响。方法用Caco-2细胞株建立体外肠上皮细胞紧密连接模型,分为EPA处理组,EPA 0、25、50、100、200μmol/L干预96 h;以及EPA(EPA 0、25、50、100、200μmol/L)+E.coli LF82联合处理组,在不同浓度EPA干预96 h的基础上,予E.coli LF82分别干预0 h、6 h、12 h。通过细胞形态学观察,MTT法测定细胞生长曲线,以及细胞膜两侧碱性磷酸酶(ALP)活性检测对Caco-2细胞模型进行评价。流式细胞术检测不同浓度EPA对Caco-2细胞凋亡的影响。RT-q PCR检测EPA和/或E.coli LF82作用于Caco-2细胞后ZO-1 m RNA的表达情况。酶联免疫吸附法检测Caco-2细胞上清中TNF-α的变化。结果 EPA25、50μmol/L处理后,Caco-2细胞存活率均高于0浓度组,且增高呈浓度依赖性(P0.05);EPA100、200μmol/L处理组的细胞存活率下降呈浓度依赖性,均低于0浓度组(P0.05)。EPA浓度为100、200μmol/L时,细胞凋亡率较0浓度组增加(P0.05)。单独E.coli LF82干预Caco-2细胞6 h、12 h后,ZO-1 m RNA表达随处理时间延长而减少,均低于未处理组(P0.05)。EPA 25、50μmol/L干预联合E.coli LF82处理6 h或12 h,Caco-2细胞的ZO-1 m RNA表达随EPA浓度增加而增加,均高于E.coli LF82单独处理组(P0.05)。单独E.coli LF82处理6 h、12 h组的TNF-α分泌随干预时间延长而增加,均高于未处理组(P0.05)。EPA25、50μmol/L联合LF82处理6 h或12 h,细胞上清液中TNF-α分泌量随EPA浓度的增加而减少,均少于单独LF82处理组(P0.05)。结论 EPA能有效预防E.coli LF82感染后肠上皮细胞紧密连接的破坏,抑制炎症因子的分泌,对肠黏膜屏障有一定的保护作用。     

非编码RNA调控糖尿病肾病细胞焦亡的研究进展

糖尿病肾病（diabetes kidney disease,DKD）是糖尿病的主要并发症之一,是慢性肾脏病和终末期肾病的主要原因,其患病率在全球范围内不断上升。细胞焦亡（pyroptosis）是一种程序性细胞死亡,其特征是细胞肿胀、细胞内容物泄漏和释放炎症因子。细胞焦亡与糖尿病肾病密切相关,而其调控机制尚不明确。非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA),如微小RNA(microRNA,miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)和环状RNA(circRNA)在细胞焦亡的生物学调控中起重要作用。研究发现,ncRNA可直接或间接调控细胞焦亡通路,也可形成竞争性内源RNA(competing endogenous RNAs,ceRNA)网络调控细胞焦亡,进而影响DKD的发展。该文总结了ncRNA在DKD细胞焦亡中的调控作用以及中医药通过调控细胞焦亡相关通路延缓DKD的研究进展,可为DKD的发病机制和临床治疗提供研究方向和思路。     

网络药理学和分子对接法研究麦门冬汤防治2型糖尿病的分子机制及其验证

目的 结合网络药理、分子对接技术和实验验证，分析麦门冬汤防治2型糖尿病的可能作用机制。方法 从中药系统药理学数据库分析平台筛选麦门冬汤方剂中各药材的成分，采用SwissTargetPrediction和PharmMapper数据库筛选中药成分的靶点；在OMIM、Drugbank、Genecards、Genbank等数据库中查找2型糖尿病的相关靶点；用Cytoscape构建“药物-成分-靶点”的网络图，筛选关键化合物。应用STRING数据库建立蛋白质相互作用网络图，并通过Cytoscape的相关功能进行拓扑分析，筛选核心靶点。在Metascape在线分析平台，进行基因本体(GO)功能富集分析和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析，研究其作用的分子机制，并对关键靶点进行分子对接验证。实验验证采用50 mmol高糖及25μmol棕榈酸诱导小鼠胰岛瘤细胞，建立体外2型糖尿病细胞模型，对细胞模型采用不同剂量的麦门冬汤水煎液干预后，Cell Counting Kit 8(CCK8)检测药物对细胞增殖的影响，Western blot检测关键蛋白的表达。结果 从麦门冬汤中筛选出166个活性成分，靶标...