排序方式： 共有41条查询结果，搜索用时 15 毫秒
1.
2.
目的 探讨转基因肝星状细胞株CFSC／HGF对大鼠肝细胞生长的支持作用。方法将大鼠原代肝细胞培养于稳定表达肝细胞生长因子(HGF)的肝星状细胞株CFSC／HGF所构建的饲养层上,连续动态观察肝细胞的形态、超微结构、白蛋白分泌、尿素合成以及吲哚氰绿摄取排泌功能的变化,同时与传统胶原贴壁培养的肝细胞进行比较,并通过半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HGF受体c-Met表达的变化。结果共培养的肝细胞体外培养至7～10d时细胞增殖、白蛋白分泌及尿素合成达到峰值,以后逐渐下降,至35d时仍保持一定的存活和功能。与传统胶原上培养的肝细胞相比,其寿命、形态和功能的维持时间明显延长;RT-PCR结果显示,与CFSC／HGF饲养层细胞共培养1周后,肝细胞表面c-Met表达上调2．23倍。结论转基因肝星状细胞株CFSC／HGF对肝细胞较长时间内保持高活性、高密度的生长有显著的支持作用,CFSC／HGF诱导的肝细胞表面c-Met表达上调可能参与了该支持作用。 相似文献
3.
目的观察冷冻研磨获得的脱细胞真皮基质粉(ADMP)生物学性状,探索高纯度且保留生物活性的异种(猪)ADMP对表皮细胞和成纤维细胞生长的支持及在皮肤创伤修复中的应用。
方法选取幼龄长白猪背部皮肤,经生物酶法脱细胞、冷冻干燥后经过不同冷冻研磨程序得到异种(猪)ADMP,再由60钴辐照获得无菌异种(猪)ADMP;通过扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察异种(猪)ADMP颗粒大小及胶原形态,确定适合应用的研磨程序;通过MTT法检测HaCaT细胞和BJ人皮肤成纤维细胞在不同浓度异种(猪)ADMP包被下的黏附作用,确定异种(猪)ADMP实现细胞最大黏附的浓度范围;DMEM培养液基添加异种(猪)ADMP为实验组,单纯DMEM培养液基为对照组,使用实时细胞分析技术分析BJ人皮肤成纤维细胞迁移指数,验证异种(猪)ADMP对成纤维细胞的促迁移作用;原代表皮细胞接种在异种(猪)ADMP培养液8 d,绘制增殖曲线,检测异种(猪)ADMP对原代表皮细胞的促增殖作用,同时免疫荧光检测原代表皮细胞表面成熟与分化蛋白的表达。对数据进行Student′s t－检验。
结果1、2、3、5、7、10次循环研磨获得异种(猪)ADMP,肉眼可见全部为白色、无块状,其中1、2、3次循环呈较粗颗粒;5、7、10次循环呈现集中均匀趋势,粒径分布在0～12 μm之间。其中5次循环粒径(13.00±2.10) μm与7次循环[(6.00±0.96) μm比较,差异有统计学意义(t＝6.093,P＝0.0002)。异种(猪)ADMP透射电子显微镜下发现,不同循环次数获得的异种(猪)ADMP均能保留大量胶原分子。BJ人成纤维细胞和HaCaT细胞随包被浓度的增加,细胞黏附作用不断增强,浓度高于750 μg/cm2,无明显变化。实时细胞分析技术检测BJ人皮肤成纤维细胞在DMEM培养液基对照组培养液72 h后的迁移指数为1.21±0.10,而异种(猪)ADMP培养液基试验组的迁移指数为3.66±0.11,两组比较差异有统计学意义(t＝22.24,P＝0.002)。在异种(猪)ADMP培养液的原代表皮细胞形态统一增殖迅速,对照组出现一定比例的分化细胞,试验组与对照组第5天细胞数分别为(4.11±0.28)×105、(1.10±0.12)×105个,两组比较差异有统计学意义(t＝13.51,P＝0.005);第8天细胞数分别为(5.00±0.48)×105、(3.05±0.30)×105个,两组比较差异有统计学意义(t＝4.87,P＝0.039),增殖曲线显示试验组在接种即日培养液至第5天,一直处于指数增长期。荧光染色中异种(猪)ADMP培养液的原代表皮细胞E-cad全部表达,少量表达角蛋白10,整合素α6几乎全部强阳性,角蛋白14全部表达并有部分强阳性,Ki-67抗原表达率高。
结论通过生物酶解和冷冻研磨获得的异种(猪)ADMP对参与皮肤创伤修复最重要的表皮细胞和成纤维细胞,具有促进其增殖和迁移的作用,未来可进一步应用于皮肤创伤修复。 相似文献
4.
目的超高压技术作为一种有效的灭菌消毒的物理手段,对灭活血浆中模型病毒的条件及灭活效果探讨。方法取正常人血浆按10%的比例分别加入PRV、PRV、VSV、PV1、PPV等指示病毒混匀,放在超高压试验机的样品仓中,以不同的压力和不同的时间进行处理。用微量细胞病变法检测超高压处理前后各组样品的病毒滴度。结果 600 Mpa处理10 min、500 Mpa处理20 min、400 Mpa处理60 min、350 Mpa处理90 min可灭活PRV、PRV、VSV等3种脂包膜指示病毒达4 lgs以上。结论该方法能够有效灭活的病毒是HBV和HCV的指示病毒。符合"血液制品去除/灭活病毒技术方法及验证指导原则"中病毒灭活工艺有效的要求。 相似文献
5.
诱导大鼠骨髓Thy-1+ β2 M-细胞分化为肝脏细胞 总被引：2，自引：0，他引：2
目的探讨定向诱导大鼠骨髓来源的Thy-1^ β1M^-细胞(bone marrow—derived Thy—1^ β2M^-cell,BDTC)分化为成熟的、有功能的肝脏细胞及其可能的机制：方法分别采用Transwell培养板联合培养BDTC和丙烯醇(allyl alcohol,AA)损伤的肝脏细胞,并用含有肝细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的条件诱导液单独培养BDTC,通过光镜和电镜观察BDTC的形态变化,免疫细胞化学和RT—PCR检测BDTC诱导前后肝细胞特异性基因的表达;用靛青绿(indocyanine green,ICG)摄取、排泌实验及白蛋白、尿素分泌检测肝细胞的相关功能。结果联合培养及单独以条件诱导液培养7d,部分BDTC体积明显增大,出现大而圆的单个或多个细胞核,胞浆富含线粒体、内质网和糖原颗粒等;这些细胞表达幼稚或成熟肝细胞特异性的AFP、OV-6、CK18等基因,并具有靛青绿摄取、排泌和分泌白蛋白、氨基代谢生成尿素等功能：结论大鼠BDTC在AA所致肝损伤环境中或在特定诱导体系内均可以向成熟的、有生理功能的肝脏细胞分化,而且该过程无需通过细胞融合而实现? 相似文献
6.
目的探讨和研究r-tPA静脉溶栓在治疗急性脑梗死的治疗效果以及安全性和有效性。方法将该院收治的急性脑梗死患者62例随机分成rtPA组与对照组各为31例。对照组患者运应用低分子右旋糖酐另加复方丹参静脉滴注对于rtPA组患者,给予重组组织型的纤溶酶原激活物rtPA(爱通立),加入到生理盐水中静脉滴注,在90 min内滴完。在次日经过头颅CT证实没有出血以后,再使用低分子肝素每隔12 h进行一次腹部皮下注射,均治疗一周后对比治疗前、治疗后24 h、21 d两组间的差异。结果在患者治疗后24 h和21 d治疗组和对照组对比差异有统计学意义(P<0.01)。经过3个月治疗后,rtPA组临床治愈率为41.9%,对照组的临床治愈率为16.1%,两组中该项指标对比差异有统计学意义(P<0.01)。结论 r-tPA静脉溶栓对于治疗急性脑梗死患者,治疗效果确切,并具有以安全性和有效性特点,值得临床推广。 相似文献
7.
尿胰蛋白酶抑制剂生产中病毒灭活工艺的效果观察 总被引：1，自引：0，他引：1
目的验证尿胰蛋白酶抑制剂(UTI)生产工艺中采用的60℃水浴10 h和乙醇处理3 h的病毒灭活效果。方法将Sindbis病毒、伪狂犬病毒(PRV)和脊髓灰质炎病毒(PV1)3种指示病毒分别加入不同的UTI原料样品中,进行60℃水浴10 h和乙醇处理3 h,处理不同时间后分别取样,用微量细胞病变法检测不同时间段样品中的病毒残留滴度。结果60℃水浴10 h可灭活(6.503±0.102)LgTCID50/mL的Sindbis病毒,灭活(6.42±0.158)LgTCID50/mL的PRV以及(6.587±0.061)LgTCID50/mL的PV1。乙醇处理3 h后可灭活(5.88±0.204)LgTCID50/mL的Sindbis病毒,灭活(6.378±0.268)LgTCID50/mL的PRV以及(5.963±0.118)LgTCID50/mL的PV1。经两种方法处理后的样品加入细胞经3代盲传均未见细胞病变(CPE)出现。结论UTI生产工艺中采用的60℃水浴10 h和乙醇处理3 h均可灭活所验证的3种指示病毒,灭活效果>6.0 LgTCID50/mL。 相似文献
8.
Shy-Drager综合征(附8例临床分析) 总被引：1，自引：0，他引：1
Shy-Drager综合征(SDS)为多系统萎缩疾病中一种变性疾病,近10年来国内相继报道.但该病少见,误诊较多,我们于1988～1998年诊治8例,现报道如下. 相似文献
9.
慢性感染性脱髓鞘性多发性神经根神经病（ＣＩＤＰ），为一周围神经的慢性、复发性疾病。以感觉性共济失调为主要表现的ＣＩＤＰ报道较少，本文收集１９９４～１９９９年６例病人的临床资料进行探讨。本组患者男女各３例，发病年龄１７～４５岁，平均２７．３岁。均行走困难，站立不稳（闭目时较睁眼时明显），龙伯征（＋），音叉振动觉和关节位置觉明显减退。缓慢进展型３例，慢性复发型２例，阶梯式进展型１例。２周后腰穿蛋白０．９～１．３ｇ／Ｌ，细胞数正常。肌电图检查５例患者，均为双下肢感觉神经传导速度减慢。２例做了腓神经活检… 相似文献
10.